摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-20页 |
1.1 钾离子通道简介 | 第12-14页 |
1.2 BK通道的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 短链蝎毒素的研究进展 | 第15-18页 |
1.4 Martentoxin:特异性神经型BK通道阻断剂 | 第18-19页 |
1.5 本课题的研究意义 | 第19-20页 |
第二章 Martentoxin表达及纯化体系的优化 | 第20-49页 |
2.1 材料 | 第20-26页 |
2.1.1 实验材料与试剂 | 第20-21页 |
2.1.2 实验仪器与设备 | 第21-22页 |
2.1.3 主要实验用液配方 | 第22-26页 |
2.2 方法 | 第26-35页 |
2.2.1 表达载体的构建 | 第26-30页 |
2.2.2 Martentoxin的表达及纯化 | 第30-34页 |
2.2.3 r Martentoxin的药理学活性检测 | 第34-35页 |
2.3 结果 | 第35-47页 |
2.3.1 载体的构建 | 第35-37页 |
2.3.2 五种载体的比较筛选 | 第37-39页 |
2.3.3 Martentoxin的表达条件 | 第39-42页 |
2.3.4 Martentoxin的亲和层析柱分离 | 第42-44页 |
2.3.5 目的蛋白Martentoxin的分离纯化 | 第44-45页 |
2.3.6 r Martentoxin在LB和M9培养基中的提纯并比较 | 第45-46页 |
2.3.7 Martentoxin药理活性的检测 | 第46-47页 |
2.4 讨论 | 第47-49页 |
第三章 BK通道孔区的结构模拟 | 第49-63页 |
3.1 材料 | 第49页 |
3.2 方法 | 第49-52页 |
3.2.1 p QE30-Kcs A-BK表达质粒的构建 | 第49-50页 |
3.2.2 Kcs A-BK嵌合体蛋白的表达及纯化 | 第50-51页 |
3.2.3 表面等离子共振(SPR) | 第51-52页 |
3.3 结果 | 第52-60页 |
3.3.1 Kcs A-BK的表达纯化 | 第52-53页 |
3.3.2 Kcs A-BK的药理结合活性鉴定 | 第53-55页 |
3.3.3 BK通道建模的序列一致性分析 | 第55-56页 |
3.3.4 BK通道孔区模型的选取 | 第56-58页 |
3.3.5 BK模型结构评估及优化 | 第58-60页 |
3.4 讨论 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-67页 |
作者在攻读硕士学位期间的学术成果 | 第67-68页 |
作者在攻读硕士学位期间所参与的项目 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |