| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第12-27页 |
| 1.1 糖尿病对男性生殖系统的影响 | 第12-18页 |
| 1.1.1 糖尿病的概述 | 第12-13页 |
| 1.1.2 糖尿病与低血清睾酮 | 第13-15页 |
| 1.1.3 雄激素对糖尿病影响的相关机制研究 | 第15-16页 |
| 1.1.4 糖尿病对雄激素影响的相关机制研究 | 第16-17页 |
| 1.1.5 睾酮补充疗法对糖尿病的治疗 | 第17-18页 |
| 1.2 睾丸间质细胞(Leydig cell,LC) | 第18-24页 |
| 1.2.1 Leydig细胞谱系的发育过程 | 第18-19页 |
| 1.2.2 不同发育阶段LC的分子标记 | 第19-22页 |
| 1.2.3 LC雄激素合成通路 | 第22-23页 |
| 1.2.4 影响LC雄激素合成的因素 | 第23-24页 |
| 1.3 论文背景和思路 | 第24-25页 |
| 1.4 技术路线图 | 第25-27页 |
| 1.4.1 通过EDS再生LC恢复睾酮含量对2型糖尿病大鼠的影响 | 第25-26页 |
| 1.4.2 不同糖浓度对体外培养曲细精管中SLC的再生影响 | 第26-27页 |
| 第二章 EDS恢复SLC的再生对糖尿病大鼠的影响 | 第27-55页 |
| 2.1 实验材料及设备 | 第27-33页 |
| 2.1.1 实验动物及材料 | 第27页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4 主要抗体 | 第29-30页 |
| 2.1.5 ELISA检测试剂盒 | 第30页 |
| 2.1.6 Real-time PCR实验材料 | 第30页 |
| 2.1.7 Real-time PCR引物 | 第30页 |
| 2.1.8 溶液配制 | 第30-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-40页 |
| 2.2.1 糖尿病模型大鼠的构建 | 第34页 |
| 2.2.2 利用EDS构建大鼠SLC的再生模型 | 第34页 |
| 2.2.3 放射性免疫法测大鼠血清睾酮含量 | 第34-35页 |
| 2.2.4 RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.5 cDNA第一链的合成 | 第36页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 2.2.7 蛋白提取 | 第37页 |
| 2.2.8 BCA法测定蛋白浓度 | 第37页 |
| 2.2.9 蛋白免疫印记检测(Western-blot) | 第37-38页 |
| 2.2.10 ELISA检测血液指标 | 第38-39页 |
| 2.2.11 石蜡切片的HE染色 | 第39-40页 |
| 2.2.12 冰冻切片的免疫荧光检测 | 第40页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第40-54页 |
| 2.3.1 糖尿病模型大鼠的构建 | 第40-42页 |
| 2.3.2 建立糖尿病模型大鼠ALC“敲除”模型 | 第42页 |
| 2.3.3 “敲除”ALC的糖尿病模型大鼠睾酮含量的变化 | 第42-44页 |
| 2.3.4 睾丸间质干细胞的再生对糖尿病模型大鼠血糖的调控 | 第44-45页 |
| 2.3.5 血清中LH、FSH及INS含量分析 | 第45-47页 |
| 2.3.6 T2D模型大鼠身体指征的改善 | 第47-50页 |
| 2.3.7 高糖环境中睾丸间质细胞雄激素合成酶表达量的分析 | 第50-51页 |
| 2.3.8 高糖环境对睾丸间质细胞数目变化的影响 | 第51-53页 |
| 2.3.9 LC发育标记蛋白SRD5A1的变化 | 第53-54页 |
| 2.4 本章小结 | 第54-55页 |
| 第三章 不同糖浓度对SLC发育的影响 | 第55-74页 |
| 3.1 实验材料及设备 | 第55-62页 |
| 3.1.1 实验动物及材料 | 第55页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第55-56页 |
| 3.1.3 曲细精管分离培养基及相关因子 | 第56-57页 |
| 3.1.4 主要抗体 | 第57页 |
| 3.1.5 酶学染色实验试剂 | 第57-58页 |
| 3.1.6 Real-time PCR实验材料 | 第58页 |
| 3.1.7 Real-time PCR引物 | 第58页 |
| 3.1.8 溶液配制 | 第58-62页 |
| 3.2 实验方法 | 第62-69页 |
| 3.2.1 大鼠曲细精管体外模型的构建 | 第62页 |
| 3.2.2 大鼠曲细精管体外培养模型的梯度糖浓度培养 | 第62页 |
| 3.2.3 3βHSD1酶学染色 | 第62-63页 |
| 3.2.4 大鼠睾丸间质干细胞增殖实验 | 第63-64页 |
| 3.2.5 大鼠睾丸间质干细胞分化实验 | 第64页 |
| 3.2.6 放射性免疫法检测培养基上清睾酮含量 | 第64-65页 |
| 3.2.7 RNA的提取 | 第65-66页 |
| 3.2.8 cDNA第一链的合成 | 第66页 |
| 3.2.9 荧光定量PCR | 第66-67页 |
| 3.2.10 蛋白提取 | 第67页 |
| 3.2.11 BCA法测定蛋白浓度 | 第67-68页 |
| 3.2.12 蛋白免疫印记检测(Western-blot) | 第68-69页 |
| 3.3 统计方法 | 第69页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第69-73页 |
| 3.4.1 建立高糖环境的曲细精管培养体系 | 第69-71页 |
| 3.4.2 高糖环境抑制SLC的增殖 | 第71页 |
| 3.4.3 糖浓度影响睾酮合成相关限速酶基因的表达 | 第71-73页 |
| 3.5 本章小结 | 第73-74页 |
| 第四章 讨论、创新点、展望 | 第74-77页 |
| 5.1 讨论 | 第74-75页 |
| 5.2 创新点 | 第75-76页 |
| 5.3 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-92页 |
| 附录 | 第92-94页 |
| 攻读硕士学位期间的科研论文情况 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
