| 符号说明 | 第5-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 前言 | 第13-25页 |
| 参考文献 | 第17-25页 |
| 第一部分 Rab5a在肝癌组织和肝癌细胞中表达分析 | 第25-38页 |
| 1 材料与方法 | 第25-35页 |
| 1.1 材料 | 第25-29页 |
| 1.1.1 肝癌细胞系以及肝癌组织病理切片 | 第25页 |
| 1.1.2 试剂 | 第25-29页 |
| 1.1.3 主要仪器及设备 | 第29页 |
| 1.2 方法 | 第29-35页 |
| 1.2.1 细胞复苏、细胞传代和细胞换液 | 第29-31页 |
| 1.2.2 免疫组化、qRT-PCR、蛋白提取和Western Blot | 第31-35页 |
| 2 结果 | 第35-37页 |
| 2.1 肝癌组织中Rab5a高表达量 | 第35-36页 |
| 2.2 肝癌细胞中Rab5a的表达量呈上调趋势 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 第二部分 Rab5a在肝癌发生发展中的功能研究 | 第38-49页 |
| 1 材料与方法 | 第38-44页 |
| 1.1 材料 | 第38-39页 |
| 1.1.1 肝癌细胞系 | 第38页 |
| 1.1.2 质粒载体、干扰RNA及细菌感受态 | 第38-39页 |
| 1.1.3 主要仪器及设备 | 第39页 |
| 1.2 方法 | 第39-44页 |
| 1.2.1 构建Rab5a过表达质粒 | 第39-41页 |
| 1.2.2 转染质粒 | 第41-42页 |
| 1.2.3 RNA提取 | 第42-43页 |
| 1.2.4 细胞功能实验 | 第43-44页 |
| 2 结果 | 第44-48页 |
| 2.1 构建Rab5a过表达质粒 | 第44-45页 |
| 2.2 检测Rab5a过表达和干扰效果 | 第45-46页 |
| 2.3 Rab5a对肝癌细胞迁移、侵袭能力影响的检测 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48-49页 |
| 第三部分 阐明Raba5在肝癌发生发展中的作用机制 | 第49-55页 |
| 1 材料与方法 | 第49-51页 |
| 1.1 材料 | 第49页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第49页 |
| 1.1.2 转染质粒、慢病毒及293T细胞株 | 第49页 |
| 1.2 方法 | 第49-51页 |
| 1.2.1 qRT-PCR | 第49-50页 |
| 1.2.2 Western Blot | 第50页 |
| 1.2.3 双荧光素酶活性测定 | 第50-51页 |
| 2 结果 | 第51-54页 |
| 2.1 qRT-PCR筛选预测靶基因 | 第51-52页 |
| 2.2 检测Rab5a对靶基因蛋白质水平的影响 | 第52-53页 |
| 2.3 双荧光素报告基因实验检测Rab5a启动子活性 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 第四部分 动物模型中验证Rab5a对肝癌进展的影响 | 第55-61页 |
| 1 材料和方法 | 第55-58页 |
| 1.1 材料 | 第55页 |
| 1.1.1 细胞系和裸鼠 | 第55页 |
| 1.1.2 慢病毒质粒 | 第55页 |
| 1.2 方法 | 第55-58页 |
| 1.2.1 Rab5a慢病毒过表达质粒建构 | 第55-57页 |
| 1.2.2 构建慢病毒介导的Rab5a稳定表达肝癌细胞系 | 第57-58页 |
| 1.2.3 裸鼠异位移植瘤实验 | 第58页 |
| 2 结果 | 第58-60页 |
| 2.1 验证Rab5a稳定过表达细胞系是否构建成功 | 第58-59页 |
| 2.2 裸鼠异位移植瘤模型构建成功 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 全文总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 文献综述 | 第64-76页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 博士期间发表的论文 | 第77页 |
