| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-21页 |
| 1 新孢子虫病研究进展 | 第10-13页 |
| ·病原学及分类 | 第10-11页 |
| ·培养特性 | 第11页 |
| ·生活史 | 第11-12页 |
| ·犬新孢子虫抗原 | 第12-13页 |
| ·免疫机理 | 第13页 |
| 2 犬新孢子虫的危害 | 第13-15页 |
| 3 脂质体在表达中的应用 | 第15-17页 |
| 4 犬新孢子虫防治措施 | 第17-19页 |
| ·疫苗研究 | 第17-19页 |
| ·药物治疗 | 第19页 |
| 5 本研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 试验研究 | 第21-36页 |
| 1 材料 | 第21-28页 |
| ·虫株与菌株 | 第21页 |
| ·细胞系与实验动物 | 第21页 |
| ·载体与主要试剂 | 第21页 |
| ·试验所需溶液 | 第21-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-28页 |
| 2 方法 | 第28-36页 |
| ·引物的设计与合成 | 第28页 |
| ·犬新孢子虫吉林株的体外培养 | 第28页 |
| ·虫体DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·SAG1基因的PCR扩增与鉴定 | 第29页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·目的基因与pMD18-T Simple Vector的重组连接 | 第30页 |
| ·连接产物的转化 | 第30页 |
| ·重组质粒pMD18-SAG1的提取 | 第30页 |
| ·重组质粒pMD18-SAG1的PCR鉴定、酶切鉴定、序列测定与分析 | 第30-31页 |
| ·重组质粒pMD18-SAG1与真核表达载体pVAX1双酶切 | 第31页 |
| ·目的基因与载体的连接、转化 | 第31-32页 |
| ·重组质粒pVAX-SAG1的鉴定 | 第32页 |
| ·重组质粒pVAX-SAG1转染BHK21细胞 | 第32页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第33页 |
| ·重组表达质粒的大量提取 | 第33-34页 |
| ·动物免疫及血清分离 | 第34页 |
| ·间接ELISA检测体液免疫水平 | 第34页 |
| ·流式细胞技术检测细胞免疫水平 | 第34-36页 |
| 结果 | 第36-46页 |
| 1 犬新孢子虫吉林株的体外培养 | 第36页 |
| 2 目的基因的扩增 | 第36-37页 |
| 3 重组质粒PMD18-SAG1的PCR鉴定 | 第37页 |
| 4 重组质粒PMD18-SAG1的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| 5 重组质粒PMD18-SAG1的序列测定 | 第38-39页 |
| 6 蛋白质抗原性预测 | 第39页 |
| 7 重组质粒PVAX-SAG1的PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 8 重组质粒PVAX-SAG1的酶切鉴定 | 第40页 |
| 9 间接免疫荧光检测重组质粒PVAX-SAG1在BHK21细胞中的表达 | 第40-41页 |
| 10 RT-PCR检测重组质粒PVAX-SAG1在BHK21细胞中的表达 | 第41-42页 |
| 11 间接ELISA检测体液免疫水平 | 第42-43页 |
| 12 BALB/c小鼠T淋巴细胞亚群含量测定结果 | 第43-46页 |
| 讨论 | 第46-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
| 在研期间发表的论文 | 第60页 |
