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玉米PHYB1基因在拟南芥中的功能分析

摘要第6-7页
abstract第7页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-21页
    1.1 我国玉米生产现状第13页
    1.2 光受体研究进展第13-14页
    1.3 避荫反应遗传网络研究进展第14-17页
        1.3.1 避荫反应在双子叶植物中的研究进展第15-16页
        1.3.2 避荫反应在单子叶植物中的研究进展第16-17页
    1.4 光敏色素及光敏色素互作因子(PIFS)研究进展第17-20页
        1.4.1 光敏色素研究进展第17-18页
        1.4.2 光敏色素互作因子(PIFs)研究进展第18-20页
    1.5 本研究的意义及内容第20-21页
        1.5.1 课题研究目的第20页
        1.5.2 研究内容第20-21页
第二章 玉米PHYB1基因的克隆第21-29页
    2.1 材料第21-22页
        2.1.1 实验材料第21页
        2.1.2 实验试剂及试剂盒第21页
        2.1.3 本实验所用培养基及溶液配制方法第21-22页
        2.1.4 实验用仪器第22页
    2.2 实验方法第22-26页
        2.2.1 玉米基因组DNA提取第22页
        2.2.2 玉米叶片总RNA提取第22页
        2.2.3 反转录第22-23页
        2.2.4 实时荧光定量PCR第23页
        2.2.5 玉米PHYB1基因克隆第23-26页
    2.3 结果与分析第26-28页
        2.3.1 PHYB蛋白在不同物种中的保守性分析第26页
        2.3.2 ZmPHYB1在玉米不同组织中的表达分析第26-27页
        2.3.3 ZmPHYB1蛋白进行改造第27-28页
    2.4 本章小结第28-29页
第三章 拟南芥的转化与转基因纯合株系的筛选第29-36页
    3.1 材料与方法第29页
        3.1.1 实验材料第29页
        3.1.2 实验培养基及溶液配置第29页
        3.1.3 实验仪器第29页
    3.2 实验方法第29-32页
        3.2.1 农杆菌转化第29-30页
        3.2.2 菌落PCR第30页
        3.2.3 农杆菌浸染拟南芥第30页
        3.2.4 种子消毒方法第30页
        3.2.5 拟南芥转基因阳性植株的筛选第30-31页
        3.2.6 拟南芥纯合株系的筛选第31页
        3.2.7 拟南芥转基因阳性植株PCR鉴定第31-32页
        3.2.8 实时荧光定量PCR检测转基因株系中ZmPHYB1的表达第32页
    3.3 结果与分析第32-35页
        3.3.1 转基因纯合子筛选第32-33页
        3.3.2 转基因阳性苗鉴定第33页
        3.3.3 转基因株系的表达量(qPCR)分析第33-35页
    3.4 本章小结第35-36页
第四章 转ZmPHYB1基因拟南芥植株的表型分析第36-45页
    4.1 材料与方法第36页
        4.1.1 实验材料第36页
        4.1.2 实验所用培养基及溶液配制第36页
        4.1.3 实验所用仪器第36页
    4.2 实验方法第36-37页
        4.2.1 不同光处理条件转基因株系下胚轴的测定第36-37页
        4.2.2 开花时间统计分析第37页
        4.2.3 叶形态变化统计第37页
    4.3 结果与分析第37-44页
        4.3.1 不同光处理条件下胚轴变化第37-40页
        4.3.2 转基因株系开花时间变化第40-42页
        4.3.3 转基因株系叶型的变化第42-44页
    4.4 本章小结第44-45页
第五章 ZmPHYB1蛋白的功能分析第45-56页
    5.1 材料与方法第45页
        5.1.1 实验材料第45页
        5.1.2 实验所用菌株第45页
        5.1.3 实验所用培养基及溶液配制第45页
        5.1.4 实验所用仪器第45页
    5.2 实验方法第45-49页
        5.2.1 荧光显微镜检测ZmPHYB1亚细胞定位第45-46页
        5.2.2 萤光素酶互补成像(LCI)验证ZmPHYB1与AtPIFs互作第46-47页
        5.2.3 双分子荧光互补(BiFC)验证ZmPHYB1与AtPIFs互作第47-48页
        5.2.4 转基因株系中响应基因表达模式第48-49页
    5.3 结果与分析第49-54页
        5.3.1 ZmPHYB1在拟南芥中的亚细胞定位第49页
        5.3.2 LCI验证ZmPHYB1与AtPIFs互作第49-50页
        5.3.3 BiFC验证ZmPHYB1与AtPIFs互作第50-52页
        5.3.4 下游基因的表达模式第52-54页
    5.4 本章小结第54-56页
第六章 结论与讨论第56-58页
参考文献第58-65页
附录第65-66页
致谢第66-67页
作者简历第67页

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