摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-21页 |
1.1 我国玉米生产现状 | 第13页 |
1.2 光受体研究进展 | 第13-14页 |
1.3 避荫反应遗传网络研究进展 | 第14-17页 |
1.3.1 避荫反应在双子叶植物中的研究进展 | 第15-16页 |
1.3.2 避荫反应在单子叶植物中的研究进展 | 第16-17页 |
1.4 光敏色素及光敏色素互作因子(PIFS)研究进展 | 第17-20页 |
1.4.1 光敏色素研究进展 | 第17-18页 |
1.4.2 光敏色素互作因子(PIFs)研究进展 | 第18-20页 |
1.5 本研究的意义及内容 | 第20-21页 |
1.5.1 课题研究目的 | 第20页 |
1.5.2 研究内容 | 第20-21页 |
第二章 玉米PHYB1基因的克隆 | 第21-29页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.2 实验试剂及试剂盒 | 第21页 |
2.1.3 本实验所用培养基及溶液配制方法 | 第21-22页 |
2.1.4 实验用仪器 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-26页 |
2.2.1 玉米基因组DNA提取 | 第22页 |
2.2.2 玉米叶片总RNA提取 | 第22页 |
2.2.3 反转录 | 第22-23页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR | 第23页 |
2.2.5 玉米PHYB1基因克隆 | 第23-26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-28页 |
2.3.1 PHYB蛋白在不同物种中的保守性分析 | 第26页 |
2.3.2 ZmPHYB1在玉米不同组织中的表达分析 | 第26-27页 |
2.3.3 ZmPHYB1蛋白进行改造 | 第27-28页 |
2.4 本章小结 | 第28-29页 |
第三章 拟南芥的转化与转基因纯合株系的筛选 | 第29-36页 |
3.1 材料与方法 | 第29页 |
3.1.1 实验材料 | 第29页 |
3.1.2 实验培养基及溶液配置 | 第29页 |
3.1.3 实验仪器 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-32页 |
3.2.1 农杆菌转化 | 第29-30页 |
3.2.2 菌落PCR | 第30页 |
3.2.3 农杆菌浸染拟南芥 | 第30页 |
3.2.4 种子消毒方法 | 第30页 |
3.2.5 拟南芥转基因阳性植株的筛选 | 第30-31页 |
3.2.6 拟南芥纯合株系的筛选 | 第31页 |
3.2.7 拟南芥转基因阳性植株PCR鉴定 | 第31-32页 |
3.2.8 实时荧光定量PCR检测转基因株系中ZmPHYB1的表达 | 第32页 |
3.3 结果与分析 | 第32-35页 |
3.3.1 转基因纯合子筛选 | 第32-33页 |
3.3.2 转基因阳性苗鉴定 | 第33页 |
3.3.3 转基因株系的表达量(qPCR)分析 | 第33-35页 |
3.4 本章小结 | 第35-36页 |
第四章 转ZmPHYB1基因拟南芥植株的表型分析 | 第36-45页 |
4.1 材料与方法 | 第36页 |
4.1.1 实验材料 | 第36页 |
4.1.2 实验所用培养基及溶液配制 | 第36页 |
4.1.3 实验所用仪器 | 第36页 |
4.2 实验方法 | 第36-37页 |
4.2.1 不同光处理条件转基因株系下胚轴的测定 | 第36-37页 |
4.2.2 开花时间统计分析 | 第37页 |
4.2.3 叶形态变化统计 | 第37页 |
4.3 结果与分析 | 第37-44页 |
4.3.1 不同光处理条件下胚轴变化 | 第37-40页 |
4.3.2 转基因株系开花时间变化 | 第40-42页 |
4.3.3 转基因株系叶型的变化 | 第42-44页 |
4.4 本章小结 | 第44-45页 |
第五章 ZmPHYB1蛋白的功能分析 | 第45-56页 |
5.1 材料与方法 | 第45页 |
5.1.1 实验材料 | 第45页 |
5.1.2 实验所用菌株 | 第45页 |
5.1.3 实验所用培养基及溶液配制 | 第45页 |
5.1.4 实验所用仪器 | 第45页 |
5.2 实验方法 | 第45-49页 |
5.2.1 荧光显微镜检测ZmPHYB1亚细胞定位 | 第45-46页 |
5.2.2 萤光素酶互补成像(LCI)验证ZmPHYB1与AtPIFs互作 | 第46-47页 |
5.2.3 双分子荧光互补(BiFC)验证ZmPHYB1与AtPIFs互作 | 第47-48页 |
5.2.4 转基因株系中响应基因表达模式 | 第48-49页 |
5.3 结果与分析 | 第49-54页 |
5.3.1 ZmPHYB1在拟南芥中的亚细胞定位 | 第49页 |
5.3.2 LCI验证ZmPHYB1与AtPIFs互作 | 第49-50页 |
5.3.3 BiFC验证ZmPHYB1与AtPIFs互作 | 第50-52页 |
5.3.4 下游基因的表达模式 | 第52-54页 |
5.4 本章小结 | 第54-56页 |
第六章 结论与讨论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
附录 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简历 | 第67页 |