摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第9-18页 |
1.1 猪瘟与猪瘟病毒 | 第9-10页 |
1.1.1 猪瘟 | 第9页 |
1.1.2 猪瘟病毒 | 第9-10页 |
1.2 CSFV囊膜糖蛋白的结构及功能 | 第10-11页 |
1.3 囊膜病毒及CSFV的侵入机制 | 第11-14页 |
1.3.1 囊膜病毒的侵入过程及机制 | 第11-13页 |
1.3.2 CSFV的侵入机制研究进展 | 第13-14页 |
1.4 重组蛋白的表达及悬浮细胞培养技术 | 第14-16页 |
1.4.1 重组蛋白的表达 | 第14-15页 |
1.4.2 悬浮细胞培养技术 | 第15-16页 |
1.4.3 慢病毒转导系统 | 第16页 |
1.5 研究的目的及意义 | 第16-18页 |
第2章 E2蛋白在猪瘟病毒内化中作用的研究 | 第18-36页 |
2.1 材料与方法 | 第18-25页 |
2.1.1 细胞、毒株、载体和抗体 | 第18页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第18页 |
2.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.4 基因扩增与质粒构建 | 第19-20页 |
2.1.5 悬浮293细胞的培养及传代 | 第20-21页 |
2.1.6 慢病毒的包装及表达重组蛋白悬浮细胞系的构建 | 第21页 |
2.1.7 流式细胞仪分选 | 第21页 |
2.1.8 重组蛋白的纯化 | 第21-22页 |
2.1.9 SDS-PAGE及Westernblotting | 第22页 |
2.1.10 E2蛋白多抗的制备及检测 | 第22-23页 |
2.1.11 可溶性蛋白封闭试验 | 第23页 |
2.1.12 细胞吸附和内化试验 | 第23页 |
2.1.13 抗体封闭试验 | 第23-24页 |
2.1.14 荧光定量RT-PCR | 第24页 |
2.1.15 测毒价和间接免疫荧光试验 | 第24-25页 |
2.1.16 统计学分析 | 第25页 |
2.2 结果 | 第25-34页 |
2.2.1 携带串联标签的重组E2蛋白真核表达质粒的构建结果 | 第25-26页 |
2.2.2 悬浮细胞系的建立及重组E2蛋白的表达纯化 | 第26-27页 |
2.2.3 重组E2蛋白具有阻断活性 | 第27-28页 |
2.2.4 重组E2蛋白阻断CSFV的感染早期 | 第28-29页 |
2.2.5 重组E2蛋白不能阻断CSFV的吸附 | 第29-30页 |
2.2.6 抗E2多抗中和活性检测结果 | 第30-31页 |
2.2.7 抗E2多抗抑制CSFV的吸附 | 第31-32页 |
2.2.8 重组E2蛋白抑制CSFV的内化 | 第32-33页 |
2.2.9 抗E2多抗不能抑制CSFV的内化 | 第33-34页 |
2.3 讨论 | 第34-36页 |
第3章 结论 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-39页 |
参考文献 | 第39-47页 |
个人简介 | 第47-48页 |