缩略语表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-15页 |
Abstract | 第15-22页 |
前言 | 第23-25页 |
文献回顾 | 第25-43页 |
一、FOX 家族的命名与分类 | 第25-26页 |
二、FOX 转录因子家族的结构特点与活性调节 | 第26-29页 |
三、FOX 转录因子家族的主要生物学功能及与疾病的关系 | 第29-33页 |
四、FOX 转录因子家族在肿瘤中的作用 | 第33-36页 |
五、FOXJ1 的结构功能和在肿瘤中的作用 | 第36-43页 |
第一部分 FOXJ1 在胃癌组织和癌旁组织中的表达 | 第43-61页 |
1 材料 | 第44-46页 |
1.1 组织芯片 | 第44页 |
1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
1.3 主要仪器 | 第45-46页 |
2 方法 | 第46-51页 |
2.1 免疫组织化学染色 | 第46-47页 |
2.2 结果判定 | 第47页 |
2.3 组织总 RNA 提取 | 第47-48页 |
2.4 合成 cDNA | 第48页 |
2.5 Realtime PCR | 第48-50页 |
2.6 组织总蛋白提取 | 第50页 |
2.7 Western blot | 第50-51页 |
2.8 统计学分析 | 第51页 |
3 结果 | 第51-58页 |
3.1 FOXJ1 在胃癌组织中的表达明显低于相应的癌旁组织 | 第51-53页 |
3.2 FOXJ1 的表达水平与胃癌分期和转移密切相关 | 第53-55页 |
3.3 生存分析显示 FOXJ1 的表达水平与胃癌患者预后密切相关 | 第55页 |
3.4 单因素和多因素 COX 回归模型分析提示 FOXJ1 的表达水平可作为胃癌患者的独立预后因素 | 第55-57页 |
3.5 FOXJ1 在淋巴结转移灶中的表达水平明显低于胃癌原发灶 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
第二部分 FOXJ1 对胃癌恶性生物学表型的影响 | 第61-92页 |
引言 | 第61页 |
1 材料 | 第61-64页 |
1.1 细胞株和实验动物 | 第61页 |
1.2 质粒载体 | 第61-62页 |
1.3 主要试剂 | 第62-63页 |
1.4 主要仪器及器材 | 第63-64页 |
2 方法 | 第64-76页 |
2.1 细胞培养 | 第64-65页 |
2.2 FOXJ1 过表达慢病毒载体(LVFOXJ1)的构建 | 第65-68页 |
2.3 FOXJ1 shRNA 慢病毒载体(LVFOXJ1shRNA)的构建 | 第68-71页 |
2.4 慢病毒稳定转染细胞系的建立 | 第71页 |
2.5 提取细胞总 RNA | 第71-72页 |
2.6 合成 cDNA | 第72页 |
2.7 Realtime PCR | 第72页 |
2.8 提取细胞总蛋白 | 第72页 |
2.9 Western blot | 第72页 |
2.10 MTT 法测定细胞生长曲线 | 第72-73页 |
2.11 裸鼠体内成瘤实验 | 第73页 |
2.12 高内涵细胞分析仪分析细胞运动情况 | 第73-74页 |
2.13 划痕实验 | 第74页 |
2.14 Transwell 迁移和侵袭实验 | 第74-75页 |
2.15 裸鼠尾静脉注射内脏转移和活体成像实验 | 第75-76页 |
2.16 统计学分析 | 第76页 |
3 结果 | 第76-89页 |
3.1 FOXJ1 在各胃癌细胞系中的表达 | 第76-77页 |
3.2 成功构建 FOXJ1 过表达和 shRNA 慢病毒载体 | 第77-78页 |
3.3 成功建立 LVFOXJ1、LVFOXJ1shRNA 及其相应对照载体稳定感染的细胞系 | 第78-80页 |
3.4 FOXJ1 可抑制胃癌细胞的体外增殖能力 | 第80-82页 |
3.5 FOXJ1 可抑制胃癌细胞的体内成瘤能力 | 第82页 |
3.6 FOXJ1 可抑制胃癌细胞的体外运动、迁移和侵袭能力 | 第82-87页 |
3.7 FOXJ1 可抑制胃癌细胞的体内转移能力 | 第87-89页 |
4 讨论 | 第89-92页 |
第三部分 FOXJ1 抑制胃癌转移相关机制的初步探讨 | 第92-104页 |
引言 | 第92页 |
1 材料 | 第92-94页 |
1.1 细胞株和组织芯片 | 第92页 |
1.2 主要试剂 | 第92-93页 |
1.3 主要仪器和器材 | 第93-94页 |
2 方法 | 第94-96页 |
2.1 细胞培养 | 第94页 |
2.2 提取细胞总 RNA、合成 cDNA、Realtime PCR | 第94-95页 |
2.3 提取细胞总蛋白、Western blot | 第95页 |
2.4 免疫组织化学染色 | 第95页 |
2.5 细胞免疫荧光染色 | 第95-96页 |
2.6 统计学分析 | 第96页 |
3 结果 | 第96-101页 |
3.1 FOXJ1 可抑制胃癌细胞系中 MMP2 和 MMP9 的表达 | 第96-97页 |
3.2 FOXJ1 可促进胃癌细胞系中 TIMP1、TIMP2 的表达 | 第97-98页 |
3.3 FOXJ1 与βcatenin 在胃癌中的表达呈负相关 | 第98-100页 |
3.4 FOXJ1 对胃癌细胞中βcatenin 表达部位的影响 | 第100页 |
3.5 FOXJ1 促进胃癌细胞中βcatenin 的磷酸化 | 第100-101页 |
4 讨论 | 第101-104页 |
小结 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-114页 |
个人简历和研究成果 | 第114-115页 |
致谢 | 第115页 |