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FOXJ1在胃癌恶性生物学表型中的作用和机制

缩略语表第7-9页
中文摘要第9-15页
Abstract第15-22页
前言第23-25页
文献回顾第25-43页
    一、FOX 家族的命名与分类第25-26页
    二、FOX 转录因子家族的结构特点与活性调节第26-29页
    三、FOX 转录因子家族的主要生物学功能及与疾病的关系第29-33页
    四、FOX 转录因子家族在肿瘤中的作用第33-36页
    五、FOXJ1 的结构功能和在肿瘤中的作用第36-43页
第一部分 FOXJ1 在胃癌组织和癌旁组织中的表达第43-61页
    1 材料第44-46页
        1.1 组织芯片第44页
        1.2 主要试剂第44-45页
        1.3 主要仪器第45-46页
    2 方法第46-51页
        2.1 免疫组织化学染色第46-47页
        2.2 结果判定第47页
        2.3 组织总 RNA 提取第47-48页
        2.4 合成 cDNA第48页
        2.5 Realtime PCR第48-50页
        2.6 组织总蛋白提取第50页
        2.7 Western blot第50-51页
        2.8 统计学分析第51页
    3 结果第51-58页
        3.1 FOXJ1 在胃癌组织中的表达明显低于相应的癌旁组织第51-53页
        3.2 FOXJ1 的表达水平与胃癌分期和转移密切相关第53-55页
        3.3 生存分析显示 FOXJ1 的表达水平与胃癌患者预后密切相关第55页
        3.4 单因素和多因素 COX 回归模型分析提示 FOXJ1 的表达水平可作为胃癌患者的独立预后因素第55-57页
        3.5 FOXJ1 在淋巴结转移灶中的表达水平明显低于胃癌原发灶第57-58页
    4 讨论第58-61页
第二部分 FOXJ1 对胃癌恶性生物学表型的影响第61-92页
    引言第61页
    1 材料第61-64页
        1.1 细胞株和实验动物第61页
        1.2 质粒载体第61-62页
        1.3 主要试剂第62-63页
        1.4 主要仪器及器材第63-64页
    2 方法第64-76页
        2.1 细胞培养第64-65页
        2.2 FOXJ1 过表达慢病毒载体(LVFOXJ1)的构建第65-68页
        2.3 FOXJ1 shRNA 慢病毒载体(LVFOXJ1shRNA)的构建第68-71页
        2.4 慢病毒稳定转染细胞系的建立第71页
        2.5 提取细胞总 RNA第71-72页
        2.6 合成 cDNA第72页
        2.7 Realtime PCR第72页
        2.8 提取细胞总蛋白第72页
        2.9 Western blot第72页
        2.10 MTT 法测定细胞生长曲线第72-73页
        2.11 裸鼠体内成瘤实验第73页
        2.12 高内涵细胞分析仪分析细胞运动情况第73-74页
        2.13 划痕实验第74页
        2.14 Transwell 迁移和侵袭实验第74-75页
        2.15 裸鼠尾静脉注射内脏转移和活体成像实验第75-76页
        2.16 统计学分析第76页
    3 结果第76-89页
        3.1 FOXJ1 在各胃癌细胞系中的表达第76-77页
        3.2 成功构建 FOXJ1 过表达和 shRNA 慢病毒载体第77-78页
        3.3 成功建立 LVFOXJ1、LVFOXJ1shRNA 及其相应对照载体稳定感染的细胞系第78-80页
        3.4 FOXJ1 可抑制胃癌细胞的体外增殖能力第80-82页
        3.5 FOXJ1 可抑制胃癌细胞的体内成瘤能力第82页
        3.6 FOXJ1 可抑制胃癌细胞的体外运动、迁移和侵袭能力第82-87页
        3.7 FOXJ1 可抑制胃癌细胞的体内转移能力第87-89页
    4 讨论第89-92页
第三部分 FOXJ1 抑制胃癌转移相关机制的初步探讨第92-104页
    引言第92页
    1 材料第92-94页
        1.1 细胞株和组织芯片第92页
        1.2 主要试剂第92-93页
        1.3 主要仪器和器材第93-94页
    2 方法第94-96页
        2.1 细胞培养第94页
        2.2 提取细胞总 RNA、合成 cDNA、Realtime PCR第94-95页
        2.3 提取细胞总蛋白、Western blot第95页
        2.4 免疫组织化学染色第95页
        2.5 细胞免疫荧光染色第95-96页
        2.6 统计学分析第96页
    3 结果第96-101页
        3.1 FOXJ1 可抑制胃癌细胞系中 MMP2 和 MMP9 的表达第96-97页
        3.2 FOXJ1 可促进胃癌细胞系中 TIMP1、TIMP2 的表达第97-98页
        3.3 FOXJ1 与βcatenin 在胃癌中的表达呈负相关第98-100页
        3.4 FOXJ1 对胃癌细胞中βcatenin 表达部位的影响第100页
        3.5 FOXJ1 促进胃癌细胞中βcatenin 的磷酸化第100-101页
    4 讨论第101-104页
小结第104-105页
参考文献第105-114页
个人简历和研究成果第114-115页
致谢第115页

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