| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号对照表 | 第12-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-42页 |
| 1.1 研究意义 | 第13-14页 |
| 1.2 研究背景 | 第14-39页 |
| 1.2.1 表观遗传学与 DNA 甲基化 | 第14-24页 |
| 1.2.2 膀胱癌与 DNA 甲基化 | 第24-35页 |
| 1.2.3 TCF21 | 第35-39页 |
| 1.3 研究内容 | 第39-40页 |
| 1.4 方法路线 | 第40-42页 |
| 1.4.1 膀胱癌细胞中 TCF21 基因甲基化与表达 | 第41页 |
| 1.4.2 膀胱癌组织中 TCF21 基因甲基化 | 第41页 |
| 1.4.3 膀胱癌尿脱落细胞中 TCF21 基因甲基化 | 第41-42页 |
| 第2章 膀胱癌细胞中 TCF21 基因甲基化与表达 | 第42-64页 |
| 2.1 材料 | 第42-44页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第42页 |
| 2.1.2 实验耗材 | 第42页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第42-43页 |
| 2.1.4 实验设备 | 第43-44页 |
| 2.2 方法 | 第44-54页 |
| 2.2.1 TCF21 测序引物、PCR 引物和探针设计 | 第44-45页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第45页 |
| 2.2.3 基因组 DNA 提取 | 第45-46页 |
| 2.2.4 DNA 定量与纯度测定 | 第46页 |
| 2.2.5 亚硫酸氢钠修饰与纯化 | 第46-48页 |
| 2.2.6 甲基化 PCR | 第48-49页 |
| 2.2.7 焦磷酸测序 | 第49页 |
| 2.2.8 去甲基化 | 第49-50页 |
| 2.2.9 RNA 提取 | 第50页 |
| 2.2.10 逆转录 PCR(RT-PCR) | 第50-51页 |
| 2.2.11 双标记荧光探针法 | 第51页 |
| 2.2.12 蛋白提取 | 第51-52页 |
| 2.2.13 蛋白电泳 | 第52-53页 |
| 2.2.14 Western Blot | 第53页 |
| 2.2.15 数据统计分析 | 第53-54页 |
| 2.3 结果与分析 | 第54-63页 |
| 2.3.1 膀胱癌细胞株 5637 基因组 | 第54页 |
| 2.3.2 膀胱癌细胞株 5637 生长曲线 | 第54-56页 |
| 2.3.3 膀胱癌细胞中 TCF21 基因甲基化水平 | 第56-58页 |
| 2.3.4 膀胱癌细胞株 5637 中 TCF21 mRNA 的表达 | 第58-61页 |
| 2.3.5 膀胱癌细胞中 TCF21 蛋白的表达 | 第61-62页 |
| 2.3.6 膀胱癌细胞中 TCF21 蛋白、TCF21 mRNA 的表达与基因甲基化之间的关系 | 第62-63页 |
| 2.4 结论 | 第63-64页 |
| 第3章 膀胱癌组织中 TCF21 基因甲基化的临床意义 | 第64-76页 |
| 3.1 材料 | 第64-66页 |
| 3.1.1 研究对象 | 第64-65页 |
| 3.1.2 实验耗材 | 第65页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第65页 |
| 3.1.4 实验设备 | 第65-66页 |
| 3.2 方法 | 第66-67页 |
| 3.2.1 石蜡组织基因组 DNA 提取 | 第66页 |
| 3.2.2 亚硫酸氢钠修饰与纯化 | 第66-67页 |
| 3.2.3 甲基化 PCR | 第67页 |
| 3.2.4 焦磷酸测序 | 第67页 |
| 3.2.5 数据统计分析 | 第67页 |
| 3.3 结果与分析 | 第67-75页 |
| 3.3.1 研究对象临床参数 | 第67-68页 |
| 3.3.2 膀胱癌组织中 TCF21 基因甲基化 | 第68-69页 |
| 3.3.3 膀胱癌组织中 TCF21 基因甲基化水平在各临床参数上比较 | 第69-72页 |
| 3.3.4 膀胱癌组织中 TCF21 基因甲基化水平与年龄、肿瘤分级和分期相关性 | 第72-74页 |
| 3.3.5 膀胱癌与肾癌组织中 TCF21 基因甲基化水平之间的关系 | 第74-75页 |
| 3.4 结论 | 第75-76页 |
| 第4章 膀胱癌尿脱落细胞中 TCF21 基因甲基化的临床意义 | 第76-88页 |
| 4.1 材料 | 第76-77页 |
| 4.1.1 研究对象 | 第76-77页 |
| 4.1.2 实验耗材 | 第77页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第77页 |
| 4.1.4 实验设备 | 第77页 |
| 4.2 方法 | 第77-79页 |
| 4.2.1 尿样处理 | 第77-78页 |
| 4.2.2 尿脱落细胞基因组 DNA 提取 | 第78页 |
| 4.2.3 亚硫酸氢钠修饰与纯化 | 第78页 |
| 4.2.4 甲基化 PCR | 第78页 |
| 4.2.5 焦磷酸测序 | 第78-79页 |
| 4.2.6 数据统计分析 | 第79页 |
| 4.3 结果与分析 | 第79-86页 |
| 4.3.1 研究对象临床参数 | 第79页 |
| 4.3.2 膀胱癌尿脱落细胞中 TCF21 基因甲基化 | 第79-80页 |
| 4.3.3 膀胱癌尿脱落细胞中 TCF21 基因甲基化水平在各临床参数上比较 | 第80-83页 |
| 4.3.4 膀胱癌尿脱落细胞中 TCF21 基因甲基化水平与年龄、分级、分期相关性 | 第83-85页 |
| 4.3.5 评估在尿脱落细胞中 TCF21 基因甲基化的诊断潜力 | 第85-86页 |
| 4.4 结论 | 第86-88页 |
| 第5章 结论 | 第88-92页 |
| 5.1 研究对象 | 第88-89页 |
| 5.2 主要研究结果 | 第89-90页 |
| 5.3 创新与特色 | 第90页 |
| 5.4 局限性 | 第90页 |
| 5.5 工作展望 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第100-101页 |
| 基本信息 | 第100页 |
| 教育经历 | 第100页 |
| 科研成果 | 第100-101页 |
| 1、专利申请 | 第100页 |
| 2、论文发表 | 第100-101页 |
| 3、撰写论著 | 第101页 |
| 4、主持课题 | 第101页 |