摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 引言 | 第11-22页 |
1 黏着斑激酶—肿瘤治疗的新靶点 | 第11-15页 |
·FAK的结构 | 第11-12页 |
·FAK的活性调控 | 第12-13页 |
·FAK介导肿瘤细胞的迁移、增殖以及凋亡 | 第13-15页 |
2 RNA干扰及应用 | 第15-22页 |
·RNA干扰 | 第15-18页 |
·RNAi技术应用于FAK的相关研究 | 第18-20页 |
·FAK与肝癌 | 第20-22页 |
第二章 研究论文的立论依据、内容及目的意义 | 第22-24页 |
第三章 RNAi对SMMC-7721细胞FAK表达的抑制 | 第24-46页 |
1 材料 | 第24-29页 |
·细胞及质粒 | 第24页 |
·主要试剂及仪器 | 第24-26页 |
·试剂配制 | 第26-29页 |
2 实验方法 | 第29-37页 |
·siRNA序列的设计及质粒构建 | 第29-30页 |
·质粒制备 | 第30-31页 |
·实验分组 | 第31页 |
·细胞培养 | 第31页 |
·细胞转染及观察转染效率 | 第31-32页 |
·RT-PCR检测FAK基因表达 | 第32-33页 |
·Western Blot检测FAK蛋白表达情况 | 第33-36页 |
·免疫细胞化学检测 | 第36-37页 |
·统计学处理 | 第37页 |
3 实验结果 | 第37-42页 |
·重组质粒电泳检测及浓度测定 | 第37-38页 |
·细胞转染效率的观察 | 第38页 |
·RT-PCT检测FAK mRNA水平 | 第38-41页 |
·FAK蛋白表达变化 | 第41-42页 |
·FAK蛋白定位表达变化 | 第42页 |
4 讨论 | 第42-46页 |
·FAK siRNA的设计 | 第42-43页 |
·重组质粒的构建和导入细胞 | 第43-44页 |
·FAK基因表达的抑制 | 第44-46页 |
第四章 FAK表达减弱对SMMC-7721细胞迁移、增值以及凋亡的影响 | 第46-54页 |
1 材料 | 第46页 |
·细胞及质粒 | 第46页 |
·主要试剂及仪器 | 第46页 |
·主要试剂配制 | 第46页 |
2 实验方法 | 第46-48页 |
·损伤修复法 | 第46-47页 |
·MTT法 | 第47页 |
·Hoechst 33258染色 | 第47页 |
·统计学处理 | 第47-48页 |
3 实验结果 | 第48-50页 |
·细胞迁移能力变化 | 第48-49页 |
·细胞增殖情况 | 第49-50页 |
·细胞凋亡的形态学观察 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-54页 |
·FAK与肿瘤细胞的运动 | 第51页 |
·FAK与肿瘤细胞的增殖 | 第51-52页 |
·FAK与肿瘤细胞的凋亡 | 第52-53页 |
·靶点的抑制效应比较 | 第53页 |
·RNAi应用存在的问题 | 第53-54页 |
总结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第62-63页 |