| 第一部分 Alstr6m综合征致病基因鉴定 | 第7-31页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1.1 前言 | 第9-10页 |
| 1.2 材料 | 第10-14页 |
| 1.2.1 研究对象 | 第10-11页 |
| 1.2.2 临床检查仪器与材料 | 第11页 |
| 1.2.3 分子遗传学研究仪器与材料 | 第11-14页 |
| 1.3 方法 | 第14-20页 |
| 1.3.1 病史采集 | 第14页 |
| 1.3.2 眼科一般检查 | 第14页 |
| 1.3.3 眼科特殊检查 | 第14-16页 |
| 1.3.4 相关辅助检查 | 第16页 |
| 1.3.5 外周血基因组DNA的提取、鉴定及定量 | 第16-17页 |
| 1.3.6 PCR引物的设计、合成与稀释 | 第17页 |
| 1.3.7 PCR扩增 | 第17-18页 |
| 1.3.8 PCR扩增产物鉴定 | 第18页 |
| 1.3.9 PCR产物的纯化 | 第18-19页 |
| 1.3.10 基因测序 | 第19-20页 |
| 1.3.11 结果分析步骤 | 第20页 |
| 1.4 结果 | 第20-26页 |
| 1.4.1 研究对象的临床资料 | 第20-23页 |
| 1.4.2 研究对象的遗传检测结果 | 第23-26页 |
| 1.5 讨论 | 第26-28页 |
| 1.6 小结 | 第28-29页 |
| 1.7 参考文献 | 第29-31页 |
| 第二部分 全色盲致病基因鉴定 | 第31-52页 |
| 摘要 | 第31-32页 |
| Abstract | 第32-33页 |
| 2.1 前言 | 第33-34页 |
| 2.2 材料 | 第34-37页 |
| 2.2.1 研究对象 | 第34-37页 |
| 2.3 方法 | 第37-39页 |
| 2.3.1 病史采集 | 第37页 |
| 2.3.2 眼科一般检查 | 第37页 |
| 2.3.3 眼科特殊检查 | 第37页 |
| 2.3.4 外周血基因组DNA的提取、鉴定及定量 | 第37-38页 |
| 2.3.5 PCR引物的设计、合成与稀释 | 第38页 |
| 2.3.6 PCR扩增 | 第38页 |
| 2.3.7 PCR扩增产物鉴定 | 第38页 |
| 2.3.8 PCR产物的纯化 | 第38页 |
| 2.3.9 基因测序 | 第38页 |
| 2.3.10 结果分析步骤 | 第38-39页 |
| 2.4 结果 | 第39-43页 |
| 2.4.1 研究对象的临床资料 | 第39-41页 |
| 2.4.2 研究对象的遗传学分析 | 第41-43页 |
| 2.5 讨论 | 第43-48页 |
| 2.6 小结 | 第48-49页 |
| 2.7 参考文献 | 第49-52页 |
| 第三部分 D211E突变型CNGA3基因体外功能的初步研究 | 第52-68页 |
| 摘要 | 第52-53页 |
| Abstract | 第53-54页 |
| 3.1 前言 | 第54页 |
| 3.2 材料 | 第54-57页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第54-55页 |
| 3.2.2 质粒 | 第55页 |
| 3.2.3 细胞 | 第55页 |
| 3.2.4 定点诱变、质粒提取及细胞转染用试剂盒 | 第55页 |
| 3.2.5 主要实验耗材 | 第55-56页 |
| 3.2.6 实验主要仪器 | 第56-57页 |
| 3.3 方法 | 第57-62页 |
| 3.3.1 主要试剂配制方法 | 第57-58页 |
| 3.3.2 利用定点诱变技术构建突变型CNGA3-pCMV6基因真核表达载体 | 第58-60页 |
| 3.3.3 HEK293细胞的体外培养 | 第60-61页 |
| 3.3.4 野生型及突变型CNGA3-pCMV6基因真核表达载体体外转染HEK293细胞 | 第61页 |
| 3.3.5 细胞免疫荧光 | 第61-62页 |
| 3.4 结果 | 第62-64页 |
| 3.4.1 突变型CNGA3-pCMV6基因真核表达载体的定点诱变 | 第62-63页 |
| 3.4.2 细胞转染 | 第63页 |
| 3.4.3 荧光显微镜观察蛋白在HEK293细胞中的表达和分布 | 第63-64页 |
| 3.5 讨论 | 第64-66页 |
| 3.5.1 CNGA3基因及及其表达的蛋白 | 第64页 |
| 3.5.2 CNGA3基因突变及其分类 | 第64-65页 |
| 3.5.3 错义突变D211E | 第65页 |
| 3.5.4 突变蛋白功能学研究的意义 | 第65-66页 |
| 3.6 小结 | 第66-67页 |
| 3.7 参考文献 | 第67-68页 |
| 第四部分 全色盲小鼠模型Cnga3~(cpf15)的基因治疗 | 第68-84页 |
| 摘要 | 第68-69页 |
| Abstract | 第69-70页 |
| 4.1 前言 | 第70页 |
| 4.2 材料 | 第70-72页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第70-71页 |
| 4.2.2 主要耗材 | 第71-72页 |
| 4.2.3 实验主要仪器 | 第72页 |
| 4.3 方法 | 第72-75页 |
| 4.3.1 全色盲小鼠模型及繁殖和饲养 | 第72-73页 |
| 4.3.2 视网膜下腔注射 | 第73页 |
| 4.3.3 小鼠视网膜电流图 | 第73页 |
| 4.3.4 试剂配方 | 第73-74页 |
| 4.3.5 视网膜组织冰冻切片的制备 | 第74-75页 |
| 4.4 结果 | 第75-77页 |
| 4.4.1 视网膜下腔注射载体情况 | 第75页 |
| 4.4.2 cpf15和正常小鼠视网膜比较 | 第75-76页 |
| 4.4.3 视蛋白在基因治疗后的cpf15小鼠视网膜的表达情况 | 第76-77页 |
| 4.4.4 视网膜电流图检测结果 | 第77页 |
| 4.5 讨论 | 第77-81页 |
| 4.5.1 基因治疗的具体方法 | 第77-78页 |
| 4.5.2 基因治疗应用于视网膜遗传性疾病的特殊性 | 第78-79页 |
| 4.5.3 AAV的优点 | 第79页 |
| 4.5.4 视网膜变性疾病的动物模型 | 第79-80页 |
| 4.5.5 全色盲的基因治疗 | 第80页 |
| 4.5.6 基因治疗存在的问题 | 第80-81页 |
| 4.5.7 基因治疗的前景 | 第81页 |
| 4.6 小结 | 第81-82页 |
| 4.7 参考文献 | 第82-84页 |
| 第五部分 综述全色盲遗传学研究进展 | 第84-94页 |
| 摘要 | 第84页 |
| Abstract | 第84-85页 |
| 5.1 引言 | 第85页 |
| 5.2 临床特点 | 第85-86页 |
| 5.3 致病基因功能概况 | 第86页 |
| 5.4 致病基因及其突变 | 第86-89页 |
| 5.4.1 CNGA3基因 | 第86-87页 |
| 5.4.2 CNGB3基因 | 第87-88页 |
| 5.4.3 GNAT2基因 | 第88页 |
| 5.4.4 PDE6C基因 | 第88页 |
| 5.4.5 PDE6H基因 | 第88-89页 |
| 5.5 动物模型及其基因治疗 | 第89-90页 |
| 5.6 展望 | 第90-91页 |
| 5.7 参考文献 | 第91-94页 |
| 缩略词表 | 第94-96页 |
| 已发表和待发表文章 | 第96-98页 |
| 个人情况 | 第98-100页 |
| 致谢 | 第100-102页 |
