| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1. 文献综述 | 第12-19页 |
| 1.1 本论文的立题意义 | 第12页 |
| 1.2 水稻遗传转化的研究 | 第12-13页 |
| 1.3 水稻遗传转化方法 | 第13-16页 |
| 1.3.1 直接转化方法 | 第14-15页 |
| 1.3.1.1 聚乙二醇法 | 第14页 |
| 1.3.1.2 电击法 | 第14-15页 |
| 1.3.1.3 基因枪法 | 第15页 |
| 1.3.1.4 花粉管通道法 | 第15页 |
| 1.3.2 农杆菌介导法 | 第15-16页 |
| 1.4 影响水稻遗传转化的因素 | 第16-19页 |
| 1.4.1 外植体 | 第16页 |
| 1.4.2 培养条件 | 第16-17页 |
| 1.4.3 继代时间和继代次数 | 第17页 |
| 1.4.4 菌液浓度和菌液侵染转化方法 | 第17页 |
| 1.4.5 外源植物激素 | 第17-19页 |
| 2. 材料与方法 | 第19-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 水稻品种 | 第19页 |
| 2.1.2 质粒与菌株 | 第19页 |
| 2.2 实验仪器和药品 | 第19-20页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.2 主要药品 | 第20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-27页 |
| 2.3.1 多基因遗传转化载体构建 | 第20-21页 |
| 2.3.2 水稻遗传转化与筛选 | 第21-24页 |
| 2.3.2.1 培养基 | 第21页 |
| 2.3.2.2 愈伤组织的诱导及继代 | 第21-22页 |
| 2.3.2.2.1 准备材料 | 第21-22页 |
| 2.3.2.2.2 消毒 | 第22页 |
| 2.3.2.2.3 愈伤组织的诱导与继代 | 第22页 |
| 2.3.2.3 农杆菌转化水稻 | 第22-24页 |
| 2.3.2.3.1 菌株活化 | 第22-23页 |
| 2.3.2.3.2 农杆菌侵染 | 第23页 |
| 2.3.2.3.3 洗菌 | 第23-24页 |
| 2.3.2.3.4 抗性愈伤组织的筛选及分化成苗 | 第24页 |
| 2.3.2.3.5 炼苗 | 第24页 |
| 2.3.3 转基因植株的分子检测 | 第24-27页 |
| 2.3.3.1 CTAB法微量提取水稻基因组DNA | 第24-25页 |
| 2.3.3.2 抗性植株的PCR分析 | 第25-27页 |
| 3. 结果与分析 | 第27-37页 |
| 3.1 不同外植体对愈伤组织诱导的影响 | 第27-28页 |
| 3.2 不同培养条件对筛选愈伤组织的影响 | 第28页 |
| 3.3 草甘磷对明恢86愈伤组织的致死浓度 | 第28-30页 |
| 3.4 G418对明恢86愈伤组织的致死浓度 | 第30-31页 |
| 3.5 多基因的遗传转化 | 第31页 |
| 3.6 影响农杆菌介导转化的因素 | 第31-35页 |
| 3.6.1 菌液浓度对愈伤组织转化率的影响 | 第31-32页 |
| 3.6.2 侵染时间对愈伤组织转化率的影响 | 第32-33页 |
| 3.6.3 共培养方式对愈伤组织转化率的影响 | 第33页 |
| 3.6.4 共培养时间对愈伤组织转化率的影响 | 第33-34页 |
| 3.6.5 2,4-D浓度对愈伤组织诱导的影响 | 第34-35页 |
| 3.7 抗性植株的获得及检测 | 第35-37页 |
| 4. 讨论 | 第37-40页 |
| 4.1 外植体的选择 | 第37页 |
| 4.2 筛选浓度的确定 | 第37-38页 |
| 4.3 菌液浓度对转化效率的影响 | 第38页 |
| 4.4 侵染时间对转化率的影响 | 第38页 |
| 4.5 共培养时间和方式对转化效率的影响 | 第38-39页 |
| 4.6 2,4-D对诱导愈伤组织的影响 | 第39页 |
| 4.7 结论与展望 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 附录A 主要缩写词 | 第44-45页 |
| 附录B | 第45-48页 |
| 致谢 | 第48页 |