| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 英文缩写-中文对照表 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-30页 |
| 1.1 禽呼肠孤病毒研究的进展 | 第18-20页 |
| 1.1.1 禽呼肠孤病毒的概况 | 第18-19页 |
| 1.1.2 禽呼肠孤病毒的基因组和蛋白质 | 第19页 |
| 1.1.3 禽呼肠孤病毒的增殖特性 | 第19-20页 |
| 1.1.4 禽呼肠孤病毒的感染与诊断 | 第20页 |
| 1.2 细胞因子的研究进展 | 第20-25页 |
| 1.2.1 白细胞介素1β | 第21-22页 |
| 1.2.2 白细胞介素6 | 第22页 |
| 1.2.3 白细胞介素17 | 第22-23页 |
| 1.2.4 白细胞介素18 | 第23-24页 |
| 1.2.5 干扰素-γ | 第24页 |
| 1.2.6 肿瘤坏死因子-α | 第24-25页 |
| 1.3 鸡CD4、CD8分子研究概述 | 第25-27页 |
| 1.3.1 鸡CD4分子和CD4+T细胞 | 第26页 |
| 1.3.2 鸡CD8分子和CD8+T细胞 | 第26-27页 |
| 1.4 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 1.5 本课题研究的意义 | 第28-30页 |
| 第二章 鸡IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18、IFN-γ、TNF-α和GAPDH荧光定量PCR检测方法的建立 | 第30-40页 |
| 摘要 | 第30-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第31-34页 |
| 2.1.1 主要仪器与试剂 | 第31页 |
| 2.1.2 细胞制备与培养 | 第31页 |
| 2.1.3 引物设计与合成 | 第31-32页 |
| 2.1.4 细胞RNA抽提与反转录 | 第32-33页 |
| 2.1.5 标准品制备 | 第33页 |
| 2.1.6 反应条件优化 | 第33-34页 |
| 2.1.7 标准曲线的制作 | 第34页 |
| 2.1.8 特异性试验 | 第34页 |
| 2.1.9 敏感性试验 | 第34页 |
| 2.1.10 重复性试验 | 第34页 |
| 2.2 结果 | 第34-39页 |
| 2.2.1 质粒标准品的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.2 real-time PCR条件优化 | 第35页 |
| 2.2.3 标准曲线的制作 | 第35-36页 |
| 2.2.4 特异性试验结果 | 第36-37页 |
| 2.2.5 敏感性试验结果 | 第37-38页 |
| 2.2.6 重复性试验结果 | 第38-39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 ARV感染对鸡胚成纤维细胞6种细胞因子mRNA转录水平的影响 | 第40-52页 |
| 摘要 | 第40-41页 |
| 3.1 材料与方法 | 第41-43页 |
| 3.1.1 病毒 | 第41页 |
| 3.1.2 主要仪器与试剂 | 第41页 |
| 3.1.3 细胞的制备与培养 | 第41页 |
| 3.1.4 病毒TCID_(50)测定 | 第41-42页 |
| 3.1.5 病毒感染方法 | 第42页 |
| 3.1.6 收集细胞样品 | 第42页 |
| 3.1.7 细胞RNA抽提与反转录 | 第42页 |
| 3.1.8 样品测定 | 第42页 |
| 3.1.9 数据统计分析 | 第42-43页 |
| 3.2 结果 | 第43-50页 |
| 3.2.1 ARV病毒结构蛋白σ C基因的表达变化 | 第43-44页 |
| 3.2.2 IL-1β基因的表达变化 | 第44-45页 |
| 3.2.3 IL-6基因的表达变化 | 第45-46页 |
| 3.2.4 IL-17基因的表达变化 | 第46页 |
| 3.2.5 IL-18基因的表达变化 | 第46-47页 |
| 3.2.6 IFN-γ基因的表达变化 | 第47-48页 |
| 3.2.7 TNF-α基因的表达变化 | 第48页 |
| 3.2.8 不同接种剂量感染CEF细胞24h后6种细胞因子的表达变化 | 第48-50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 ARV感染对SPF鸡组织器官中6种细胞因子mRNA转录的影响 | 第52-62页 |
| 摘要 | 第52-53页 |
| 4.1 材料与方法 | 第53-55页 |
| 4.1.1 主要仪器与试剂 | 第53页 |
| 4.1.2 病毒 | 第53页 |
| 4.1.3 SPF鸡孵化 | 第53页 |
| 4.1.4 SPF鸡饲养管理 | 第53页 |
| 4.1.5 SPF鸡的人工感染试验 | 第53-54页 |
| 4.1.6 SPF鸡剖检及组织样品采集 | 第54页 |
| 4.1.7 组织样品RNA抽提及反转录 | 第54页 |
| 4.1.8 Real-time PCR对试验样品的测定 | 第54页 |
| 4.1.9 数据处理和统计分析 | 第54-55页 |
| 4.2 结果 | 第55-59页 |
| 4.2.1 感染后临床表现 | 第55页 |
| 4.2.2 关节中6种细胞因子的表达变化 | 第55-56页 |
| 4.2.3 心脏中6种细胞因子的表达变化 | 第56-57页 |
| 4.2.4 脾脏中6种细胞因子的表达变化 | 第57页 |
| 4.2.5 胸腺中6种细胞因子的表达变化 | 第57-58页 |
| 4.2.6 法氏囊中6种细胞因子的表达变化 | 第58-59页 |
| 4.2.7 外周血中6种细胞因子的表达变化 | 第59页 |
| 4.3 讨论 | 第59-62页 |
| 第五章 ARV感染对SPF鸡外周CD4~+、CD8~+T细胞量的影响 | 第62-68页 |
| 摘要 | 第62页 |
| 5.1 材料与方法 | 第62-64页 |
| 5.1.1 仪器与主要试剂 | 第62-63页 |
| 5.1.2 病毒 | 第63页 |
| 5.1.3 SPF鸡孵化 | 第63页 |
| 5.1.4 SPF鸡饲养管理 | 第63页 |
| 5.1.5 SPF鸡的人工感染试验 | 第63页 |
| 5.1.6 外周血淋巴细胞样品的制备 | 第63-64页 |
| 5.1.7 流式细胞仪检测分析样品 | 第64页 |
| 5.1.8 数据处理 | 第64页 |
| 5.2 结果 | 第64-66页 |
| 5.2.1 ARV感染后外周血中CD4~+T细胞数的变化 | 第64-65页 |
| 5.2.2 ARV感染后外周血中CD8~+T细胞数的变化 | 第65-66页 |
| 5.3 讨论 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 个人简历 | 第77页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第77页 |
