| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第8-28页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第8-10页 |
| 1.2 癌转移的研究进展 | 第10-18页 |
| 1.2.1 癌细胞转移过程 | 第11-12页 |
| 1.2.2 癌细胞转移与细胞骨架的关系 | 第12-13页 |
| 1.2.3 癌细胞转移与细胞外基质的关系 | 第13-15页 |
| 1.2.4 癌细胞转移与基质金属蛋白酶的关系 | 第15-17页 |
| 1.2.5 癌细胞转移与血管生成的关系 | 第17-18页 |
| 1.3 Rap2 功能简介 | 第18-22页 |
| 1.3.1 小分子量 G 蛋白家族简介 | 第18-19页 |
| 1.3.2 Rap 亚族成员与 Rap2 的结构功能 | 第19-22页 |
| 1.4 Rap2 活性的调节 | 第22-24页 |
| 1.4.1 正调控因子 GEFs | 第22-23页 |
| 1.4.2 负调控因子 GAPs | 第23-24页 |
| 1.5 Rap2 结构功能中相互作用蛋白 | 第24-26页 |
| 1.5.1 PARG | 第25页 |
| 1.5.2 TNIK | 第25页 |
| 1.5.3 MINK | 第25-26页 |
| 1.5.4 MAP4K4 | 第26页 |
| 1.6 本文的主要研究内容 | 第26-27页 |
| 1.7 技术路线 | 第27-28页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第28-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-32页 |
| 2.1.1 PCR 所需引物 | 第28页 |
| 2.1.2 细胞系和菌株 | 第28-29页 |
| 2.1.3 质粒及 RNA 干扰片段 | 第29页 |
| 2.1.4 主要试剂材料及试剂配方 | 第29-31页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2.1.6 主要分析软件 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-41页 |
| 2.2.1 细胞培养以及样本的收集 | 第32-33页 |
| 2.2.2 蛋白样本的处理 | 第33-35页 |
| 2.2.3 Western blot 检测蛋白水平 | 第35-36页 |
| 2.2.4 目的片段的扩增 | 第36-37页 |
| 2.2.5 质粒的扩增与纯化 | 第37页 |
| 2.2.6 细胞转染与稳转细胞的筛选 | 第37-38页 |
| 2.2.7 细胞运动能力的检测 | 第38-40页 |
| 2.2.8 蛋白在细胞内的表达水平的检测 | 第40-41页 |
| 第3章 肾癌细胞系中 Rap2 高活性化机制的研究 | 第41-46页 |
| 3.1 Rap2 活性化水平的检测 | 第41-43页 |
| 3.1.1 诱导表达 GST 融合蛋白 | 第41-42页 |
| 3.1.2 Rap2 活性化水平分析 | 第42-43页 |
| 3.2 Rap2 高活性化机制 | 第43页 |
| 3.3 讨论 | 第43-44页 |
| 3.4 本章小结 | 第44-46页 |
| 第4章 Rap2 对肾癌细胞转移能力的影响及调控 | 第46-55页 |
| 4.1 稳转细胞系的构建 | 第46-48页 |
| 4.2 Rap2 对肾癌细胞转移能力的影响 | 第48-52页 |
| 4.2.1 上调 Rap2 的表达对肾癌细胞转移能力的影响 | 第48-50页 |
| 4.2.2 抑制 Rap2 的表达对肾癌细胞转移能力的影响 | 第50-52页 |
| 4.3 Rap2 相互作用蛋白对细胞转移能力的影响 | 第52-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-54页 |
| 4.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第5章 Rap2 的表达对 FAK 的影响 | 第55-58页 |
| 5.1 Rap2 的表达对 FAK 的影响 | 第55-57页 |
| 5.2 讨论 | 第57页 |
| 5.3 本章小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58页 |
| 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
