| 摘要 | 第7-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-19页 |
| 1. 黑色素细胞的发育与功能 | 第10-13页 |
| 1.1 黑色素细胞的发育 | 第10-11页 |
| 1.2 黑色素细胞的功能 | 第11页 |
| 1.3 黑色素的合成路径 | 第11-12页 |
| 1.4 有关黑色素生成的信号转导途径 | 第12-13页 |
| 1.5 影响色素形成的主效基因 | 第13页 |
| 2 miRNAs的研究现状及其在毛色中的应用 | 第13-19页 |
| 2.1 RNA干扰作用和miRNA的发现 | 第13-14页 |
| 2.2 miRNA生物发生机制 | 第14-15页 |
| 2.3 miRNA的功能 | 第15-19页 |
| 材料和方法 | 第19-34页 |
| 1 实验材料 | 第19-22页 |
| 1.1 实验样本 | 第19页 |
| 1.2 实验所用仪器 | 第19页 |
| 1.3 细胞培养所需试剂与耗材 | 第19-20页 |
| 1.4 构建lpa-miR-nov-66过表达载体,靶基因sGC扩增和双荧光报告载体所需试剂和耗材 | 第20页 |
| 1.5 总RNA的提取,RT-PCR,qRT-PCR所需试剂 | 第20页 |
| 1.6 总蛋白的提取及免疫蛋白印迹技术所需试剂 | 第20-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-34页 |
| 2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2 lpa-miR-nov-66过表达载体质粒的构建,靶基因sGC的筛选以及靶基因sGC双荧光报告载体的构建 | 第23-27页 |
| 2.3 双荧光报告载体和lpa-miR-nov-66表达载体共转染293T细胞检测荧光信号 | 第27-28页 |
| 2.4 黑色素细胞总RNA的提取 | 第28-30页 |
| 2.5 蛋白免疫印迹实验方法 | 第30-32页 |
| 2.6 cAMP和cGMP含量的测定 | 第32-33页 |
| 2.7 黑色素含量的测定 | 第33-34页 |
| 实验结果 | 第34-42页 |
| 1. lpa-miR-nov-66在不同毛色羊驼皮肤中的表达量 | 第34页 |
| 2. sGC扩增序列和预测位点结果 | 第34-36页 |
| 3. lpa-miR-nov-66转染羊驼黑色素细胞的表达量变化 | 第36-38页 |
| 3.1 转染lpa-miR-nov-66羊驼黑色素细胞总RNA的质量检测 | 第36页 |
| 3.2 lpa-miR-nov-66转染羊驼黑色素细胞后lpa-miR-nov-66表达水平 | 第36-37页 |
| 3.3 lpa-miR-nov-66转染羊驼黑色素细胞后sGC,MITF,TYR,TYRP1基因表达水平 | 第37-38页 |
| 4. lpa-miR-nov-66转染羊驼黑色素细胞后sGC,MITF,TYR和TYRP1蛋白表达水平 | 第38-39页 |
| 5. lpa-miR-nov-66转染羊驼黑色素细胞后黑色素含量的检测 | 第39页 |
| 6. lpa-miR-nov-66转染羊驼黑色素细胞后对cAMP和cGMP的影响结果 | 第39-40页 |
| 7. 双荧光表达载体转染293T细胞验证靶基因 | 第40-42页 |
| 讨论 | 第42-45页 |
| 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| Abstract | 第51-52页 |
| 中英文对照表及縮写表 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
