| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-13页 |
| 第一部分 HIF-1α和VEGF 在RA 滑膜细胞中的表达及意义 | 第13-21页 |
| 1 材料和方法 | 第13-19页 |
| 1.1 研究对象 | 第13页 |
| 1.1.1 排除标准 | 第13页 |
| 1.1.2 实验对象 | 第13页 |
| 1.2 实验材料 | 第13-15页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第13-14页 |
| 1.2.2 试剂配制 | 第14-15页 |
| 1.2.3 实验仪器 | 第15页 |
| 1.3 实验方法 | 第15-17页 |
| 1.3.1 细胞培养 | 第15-16页 |
| 1.3.2 实验分组 | 第16页 |
| 1.3.3 各组滑膜细胞 HIF-1α和 VEGF 蛋白表达情况检测 | 第16-17页 |
| 1.4 统计学处理 | 第17-19页 |
| 2 实验结果 | 第19-21页 |
| 2.1 滑膜细胞生长情况 | 第19页 |
| 2.2 RA 和 OA 滑膜细胞 HIF-1α和 VEGF 蛋白表达情况 | 第19-20页 |
| 2.3 RA 和 OA 滑膜细胞中 HIF-1α和 VEGF 蛋白表达的相关性分析 | 第20-21页 |
| 第二部分 RNA 干扰HIF-1α基因对RA 滑膜细胞的VEGF 表达及其增殖的影响 | 第21-41页 |
| 1 材料和方法 | 第21-32页 |
| 1.1 实验对象 | 第21页 |
| 1.2 实验材料 | 第21-23页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.2.2 试剂配制 | 第22页 |
| 1.2.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 1.3 实验方法 | 第23-31页 |
| 1.3.1 感受态细胞制备 | 第23页 |
| 1.3.2 质粒转化感受态细胞 | 第23-24页 |
| 1.3.3 HIF-1α-shRNA 重组质粒提取及酶切鉴定 | 第24-25页 |
| 1.3.4 无内毒素的质粒大提取 | 第25-26页 |
| 1.3.5 实验分组 | 第26页 |
| 1.3.6 质粒转染滑膜细胞 | 第26-27页 |
| 1.3.7 分组培养 | 第27-28页 |
| 1.3.8 各组滑膜细胞 HIF-1α和 VEGF 蛋白表达情况检测 | 第28页 |
| 1.3.9 实时荧光定量 PCR（real-time PCR）检测相关 mRNA 表达 | 第28-30页 |
| 1.3.10 MTS 法检测缺氧条件下滑膜细胞增殖情况 | 第30-31页 |
| 1.4 统计学处理 | 第31-32页 |
| 2 实验结果 | 第32-37页 |
| 2.1 HIF-1α-shRNA 重组质粒的酶切鉴定及电泳 | 第32-33页 |
| 2.2 细胞转染效率观察 | 第33页 |
| 2.3 滑膜细胞 HIF-1α和 VEGF 蛋白表达情况 | 第33-34页 |
| 2.4 RA 各组滑膜细胞中 HIF-1α和 VEGF mRNA 表达情况 | 第34-35页 |
| 2.5 滑膜细胞 HIF-1α和 VEGF 表达水平的相关分析 | 第35-36页 |
| 2.6 滑膜细胞的增殖情况分析 | 第36-37页 |
| 3 全文讨论 | 第37-40页 |
| 4 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 附录A 2010 年ACR/EULAR 的RA 分类标准 | 第44-45页 |
| 附录B 1995 年ACR 的骨关节炎诊断标准 | 第45-46页 |
| 附录C 综述 | 第46-55页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 在学研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
