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葡萄VpSBP3,16基因抗血清制备及ZHD基因家族鉴定与分析

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第11-18页
    1.1 基因体外表达系统研究进展第11-15页
        1.1.1 原核表达系统第11-13页
        1.1.2 真核表达系统第13-15页
    1.2 SBP 基因研究进展第15-16页
    1.3 ZHD 基因研究进展第16-17页
    1.4 本研究的目的与意义第17-18页
第二章 VpSBP3 与 VpSBP16 基因原核表达、抗血清制备第18-29页
    2.1 材料第18页
        2.1.1 葡萄材料第18页
        2.1.2 载体与菌株第18页
        2.1.3 试剂与仪器第18页
    2.2 方法第18-21页
        2.2.1 重组原核表达载体在大肠杆菌中的诱导表达第18-19页
        2.2.2 目的融合蛋白诱导表达条件的优化及表达形式的确定第19页
        2.2.3 目的融合蛋白的大量表达及纯化第19-20页
        2.2.4 抗血清的制备及 Western blot 检测第20页
        2.2.5 葡萄不同组织总蛋白的提取第20页
        2.2.6 不同组织中的 VpSBP3 及 VpSBP16 的表达分析第20-21页
    2.3 结果与分析第21-26页
        2.3.1 VpSBP3 及 VpSBP16 基因重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达第21-22页
        2.3.2 GST-VpSBP3 融合蛋白表达条件的优化第22-23页
        2.3.3 GST-VpSBP3 及 GST-VpSBP16 融合蛋白表达形式的确定第23-24页
        2.3.4 GST-VpSBP3 及 GST-VpSBP16 融合蛋白的纯化第24页
        2.3.5 VpSBP3 及 VpSBP16 抗血清的制备与 Western blot第24-26页
        2.3.6 葡萄不同组织中 VpSBP3 及 VpSBP16 的 Western blot 检测第26页
    2.4 讨论第26-28页
        2.4.1 VpSBP3 及 VpSBP16 的原核表达第26-27页
        2.4.2 目的融合蛋白的回收纯化第27页
        2.4.3 多克隆抗血清的制备第27页
        2.4.4 目的蛋白表达分析第27-28页
    2.5 结论第28-29页
第三章 葡萄 ZHD 基因家族的鉴定与分析第29-43页
    3.1 材料第29页
        3.1.1 葡萄材料第29页
    3.2 方法第29-31页
        3.2.1 葡萄 ZHD(VvZHD)基因的鉴定与注释第29页
        3.2.2 染色体定位与同线性分析第29页
        3.2.3 VvZHD 基因的序列比对、进化树分析及特征结构域定位第29-30页
        3.2.4 非生物、生物胁迫处理与外源物处理第30页
        3.2.5 半定量 PCR 与定量 PCR 表达分析第30-31页
    3.3 结果与分析第31-39页
        3.3.1 葡萄 ZHD 基因(VvZHD)的鉴定第31-32页
        3.3.2 葡萄 ZHD 基因家族的扩增模式第32页
        3.3.3 葡萄与拟南芥 ZHD 基因的进化关系第32页
        3.3.4 葡萄 ZHD 基因的系统发育分析第32-35页
        3.3.5 葡萄 ZHD 基因的序列分析第35-36页
        3.3.6 葡萄 ZHD 基因在不同组织中的表达情况第36页
        3.3.7 葡萄 ZHD 基因在不同的逆境条件与外源物处理下的表达模式第36-39页
            3.3.7.1 非生物胁迫第37页
            3.3.7.2 生物胁迫第37页
            3.3.7.3 外源物处理第37-39页
    3.4 讨论第39-42页
        3.4.1 葡萄 ZHD 基因的进化第40页
        3.4.2 葡萄 ZHD 基因家族的扩增和同线性分析第40-41页
        3.4.3 葡萄 ZHD 基因家族不同组织中的空间特异表达第41页
        3.4.4 葡萄 ZHD 基因家族在一系列的生物过程中起着重要作用第41-42页
    3.5 结论第42-43页
参考文献第43-50页
附录第50-55页
致谢第55-57页
作者简介第57页

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