摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 基因体外表达系统研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 原核表达系统 | 第11-13页 |
1.1.2 真核表达系统 | 第13-15页 |
1.2 SBP 基因研究进展 | 第15-16页 |
1.3 ZHD 基因研究进展 | 第16-17页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
第二章 VpSBP3 与 VpSBP16 基因原核表达、抗血清制备 | 第18-29页 |
2.1 材料 | 第18页 |
2.1.1 葡萄材料 | 第18页 |
2.1.2 载体与菌株 | 第18页 |
2.1.3 试剂与仪器 | 第18页 |
2.2 方法 | 第18-21页 |
2.2.1 重组原核表达载体在大肠杆菌中的诱导表达 | 第18-19页 |
2.2.2 目的融合蛋白诱导表达条件的优化及表达形式的确定 | 第19页 |
2.2.3 目的融合蛋白的大量表达及纯化 | 第19-20页 |
2.2.4 抗血清的制备及 Western blot 检测 | 第20页 |
2.2.5 葡萄不同组织总蛋白的提取 | 第20页 |
2.2.6 不同组织中的 VpSBP3 及 VpSBP16 的表达分析 | 第20-21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-26页 |
2.3.1 VpSBP3 及 VpSBP16 基因重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第21-22页 |
2.3.2 GST-VpSBP3 融合蛋白表达条件的优化 | 第22-23页 |
2.3.3 GST-VpSBP3 及 GST-VpSBP16 融合蛋白表达形式的确定 | 第23-24页 |
2.3.4 GST-VpSBP3 及 GST-VpSBP16 融合蛋白的纯化 | 第24页 |
2.3.5 VpSBP3 及 VpSBP16 抗血清的制备与 Western blot | 第24-26页 |
2.3.6 葡萄不同组织中 VpSBP3 及 VpSBP16 的 Western blot 检测 | 第26页 |
2.4 讨论 | 第26-28页 |
2.4.1 VpSBP3 及 VpSBP16 的原核表达 | 第26-27页 |
2.4.2 目的融合蛋白的回收纯化 | 第27页 |
2.4.3 多克隆抗血清的制备 | 第27页 |
2.4.4 目的蛋白表达分析 | 第27-28页 |
2.5 结论 | 第28-29页 |
第三章 葡萄 ZHD 基因家族的鉴定与分析 | 第29-43页 |
3.1 材料 | 第29页 |
3.1.1 葡萄材料 | 第29页 |
3.2 方法 | 第29-31页 |
3.2.1 葡萄 ZHD(VvZHD)基因的鉴定与注释 | 第29页 |
3.2.2 染色体定位与同线性分析 | 第29页 |
3.2.3 VvZHD 基因的序列比对、进化树分析及特征结构域定位 | 第29-30页 |
3.2.4 非生物、生物胁迫处理与外源物处理 | 第30页 |
3.2.5 半定量 PCR 与定量 PCR 表达分析 | 第30-31页 |
3.3 结果与分析 | 第31-39页 |
3.3.1 葡萄 ZHD 基因(VvZHD)的鉴定 | 第31-32页 |
3.3.2 葡萄 ZHD 基因家族的扩增模式 | 第32页 |
3.3.3 葡萄与拟南芥 ZHD 基因的进化关系 | 第32页 |
3.3.4 葡萄 ZHD 基因的系统发育分析 | 第32-35页 |
3.3.5 葡萄 ZHD 基因的序列分析 | 第35-36页 |
3.3.6 葡萄 ZHD 基因在不同组织中的表达情况 | 第36页 |
3.3.7 葡萄 ZHD 基因在不同的逆境条件与外源物处理下的表达模式 | 第36-39页 |
3.3.7.1 非生物胁迫 | 第37页 |
3.3.7.2 生物胁迫 | 第37页 |
3.3.7.3 外源物处理 | 第37-39页 |
3.4 讨论 | 第39-42页 |
3.4.1 葡萄 ZHD 基因的进化 | 第40页 |
3.4.2 葡萄 ZHD 基因家族的扩增和同线性分析 | 第40-41页 |
3.4.3 葡萄 ZHD 基因家族不同组织中的空间特异表达 | 第41页 |
3.4.4 葡萄 ZHD 基因家族在一系列的生物过程中起着重要作用 | 第41-42页 |
3.5 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
附录 | 第50-55页 |
致谢 | 第55-57页 |
作者简介 | 第57页 |