| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 干扰素概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 干扰素的来源与发现 | 第11页 |
| 1.1.2 干扰素的分类 | 第11-12页 |
| 1.1.3 干扰素的分子结构 | 第12-13页 |
| 1.2 牛干扰素α和重组牛干扰素α概述 | 第13-14页 |
| 1.2.1 牛干扰素α的结构特点 | 第13页 |
| 1.2.2 牛干扰素α的生物学活性及作用机理 | 第13-14页 |
| 1.2.3 重组牛干扰素α的研究进展 | 第14页 |
| 1.3 利用巴斯德毕赤酵母表达外源蛋白的研究 | 第14-15页 |
| 1.3.1 巴斯德毕赤酵母表达系统简介 | 第15页 |
| 1.3.2 巴斯德毕赤酵母表达系统的特点 | 第15页 |
| 1.3.3 巴斯德毕赤酵母应用于干扰素表达的研究 | 第15页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-28页 |
| 2.1 材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 质粒、载体、宿主菌、病毒 | 第17页 |
| 2.1.2 细胞、培养基、血清 | 第17页 |
| 2.1.3 酶、抗体、生化试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第17-18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-28页 |
| 2.2.1 BoIFN-α1/7/14成熟肽基因的克隆及序列分析 | 第18-20页 |
| 2.2.2 重组酵母表达载体pPICZαA-BoIFN-α1/7/14的构建及鉴定 | 第20-22页 |
| 2.2.3 重组酵母表达载体pPICZαA-BoIFN-α1/7/14转化入毕赤酵母GS115 | 第22-23页 |
| 2.2.4 重组酵母的鉴定 | 第23页 |
| 2.2.5 阳性重组毕赤酵母的诱导表达与重组BoIFN-α1/7/14的初步纯化 | 第23-24页 |
| 2.2.6 重组BoIFN-α1/7/14的SDS-PAGE和Western blot分析 | 第24-25页 |
| 2.2.7 重组BoIFN-α1/7/14理化性质分析 | 第25页 |
| 2.2.8 重组BoIFN-α1/7/14体外抗病毒活性分析 | 第25-26页 |
| 2.2.9 重组BoIFN-α1/7/14抗增殖活性测定 | 第26-27页 |
| 2.2.10 数据统计 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-38页 |
| 3.1 BoIFN-α1/7/14成熟肽基因的PCR扩增 | 第28-31页 |
| 3.1.1 BoIFN-α1/7/14成熟肽基因的PCR扩增 | 第28页 |
| 3.1.2 重组质粒pEASY-Blunt-Simple-BoIFN-α1/7/14的鉴定 | 第28页 |
| 3.1.3 BoIFN-α1/7/14成熟肽基因的序列分析 | 第28-31页 |
| 3.2 重组酵母表达载体的构建及鉴定 | 第31页 |
| 3.3 重组酵母的鉴定 | 第31-32页 |
| 3.4 重组BoIFN-α1/7/14的SDS-PAGE和Western blot分析 | 第32-33页 |
| 3.5 重组BoIFN-α1/7/14理化性质分析 | 第33-34页 |
| 3.5.1 重组BoIFN-α1/7/14胰酶敏感性分析 | 第33页 |
| 3.5.2 重组BoIFN-α1/7/14 pH敏感性分析 | 第33页 |
| 3.5.3 重组BoIFN-α1/7/14温度敏感性分析 | 第33-34页 |
| 3.6 重组BoIFN-α1/7/14体外抗病毒活性分析 | 第34-37页 |
| 3.6.1 重组BoIFN-α1/7/14抗VSV活性测定 | 第34-36页 |
| 3.6.2 重组BoIFN-α1/7/14抗病毒活性阻断分析 | 第36-37页 |
| 3.6.3 重组BoIFN-α1/7/14对IBRV的抗病毒效果 | 第37页 |
| 3.7 重组BoIFN-α1/7/14抗增殖活性测定 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| 4.1 关于牛干扰素α多基因家族及亚型划分的研究 | 第38页 |
| 4.2 BoIFN-α1/7/14成熟肽基因的PCR引物设计 | 第38页 |
| 4.3 酵母表达蛋白的糖基化 | 第38-39页 |
| 4.4 BoIFN-α1/7/14的理化性质 | 第39页 |
| 4.5 BoIFN-α1/7/14的抗病毒活性 | 第39-40页 |
| 4.6 BoIFN-α1/7/14的抗增殖活性 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第48页 |
