| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 引言 | 第6-8页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第8-15页 |
| 1.1 实验材料 | 第8页 |
| 1.1.1 细胞系及细胞培养所需的主要试剂 | 第8页 |
| 1.1.2 实验中的主要仪器 | 第8页 |
| 1.2 实验过程及方法 | 第8-14页 |
| 1.2.1 WIF-1蛋白的准备 | 第9页 |
| 1.2.2 细胞培养 | 第9页 |
| 1.2.3 冻存及复苏 | 第9页 |
| 1.2.4 WIF-1蛋白对骨肉瘤MG-63细胞的刺激 | 第9-10页 |
| 1.2.4.1 不同浓度的WIF-1蛋白对人骨肉瘤MG-63细胞的刺激作用 | 第9页 |
| 1.2.4.2 WIF-1刺激下人骨肉瘤MG-63细胞的生长情况 | 第9-10页 |
| 1.2.5 实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测β-catenin基因的表达 | 第10-13页 |
| 1.2.5.1 RNA的提取 | 第10页 |
| 1.2.5.2 逆转录cDNA的合成 | 第10-11页 |
| 1.2.5.3 设计并合成目的基因及管家基因引物 | 第11-12页 |
| 1.2.5.4 实时荧光定PCR检测MG63细胞中β-catenin mRNA的表达 | 第12-13页 |
| 1.2.6 Western Blot法检测β-catenin蛋白的表达 | 第13-14页 |
| 1.2.6.1 细胞的裂解及蛋白质的提取 | 第13页 |
| 1.2.6.2 Western Blot法检测目的基因蛋白的表达 | 第13-14页 |
| 1.3 细胞形态学观察 | 第14页 |
| 1.4 统计学分析 | 第14-15页 |
| 第二章 结果 | 第15-21页 |
| 2.1 细胞形态学观察 | 第15-16页 |
| 2.2 不同浓度的WIF-1刺激下β-catenin mRNA的表达情况 | 第16-18页 |
| 2.3 不同浓度的WIF-1刺激下β-catenin蛋白的表达情况 | 第18-20页 |
| 2.4 细胞生长曲线的测定 | 第20-21页 |
| 第三章 讨论 | 第21-27页 |
| 3.1 骨肉瘤的治疗 | 第21-22页 |
| 3.1.1 骨肉瘤的新辅助化疗及手术治疗 | 第21页 |
| 3.1.2 骨肉瘤基因治疗的研究前景 | 第21-22页 |
| 3.2 Wnt信号通路与骨肉瘤 | 第22-24页 |
| 3.3 Wnts拮抗家族的成员--WIF-1 | 第24页 |
| 3.4 实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
| 3.5 蛋白质免疫印迹技术 | 第25-26页 |
| 3.6 研究成果及问题 | 第26-27页 |
| 结论 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-32页 |
| 综述 | 第32-47页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
