| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-24页 |
| 1.1 研究背景 | 第14-15页 |
| 1.2 组蛋白赖氨酸去甲基化酶LSD1及其在胃癌治疗中的意义 | 第15-16页 |
| 1.2.1 组蛋白赖氨酸去甲基化酶LSD1 | 第15页 |
| 1.2.2 LSD1在胃癌治疗中的意义 | 第15-16页 |
| 1.3 紫杉醇及其耐药性 | 第16-17页 |
| 1.4 多药耐药的解决办法 | 第17-18页 |
| 1.4.1 多药耐药逆转剂 | 第17页 |
| 1.4.2 联合用药 | 第17-18页 |
| 1.4.3 反义核酸技术及开发新的抗肿瘤药物 | 第18页 |
| 1.5 联合用药效果的评价方式 | 第18-19页 |
| 1.6 GSK-LSD12HCl与紫杉醇联用的可能性及意义 | 第19-20页 |
| 1.7 PI3K/AKT通路介导的细胞凋亡及其与多药耐药 | 第20-21页 |
| 1.8 自噬及其与多药耐药 | 第21-22页 |
| 1.9 细胞转移及其与多药耐药 | 第22-23页 |
| 1.10 实验课题的内容与意义 | 第23-24页 |
| 2 GSK-LSD12HCl与PTX联合作用于人胃癌耐药细胞MGC803/PTX的浓度筛选 | 第24-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 细胞株及药品 | 第24页 |
| 2.1.2 实验仪器与设备 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第26-27页 |
| 2.2.2 MTT法检测药物对细胞的抑制率 | 第27-29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-32页 |
| 2.3.1 人胃癌耐药细胞株MGC803/PTX的耐药指数 | 第29-30页 |
| 2.3.2 GSK-LSD1对MGC803/PTX的抑制作用 | 第30页 |
| 2.3.3 联合用药浓度的初筛选 | 第30-31页 |
| 2.3.4 联合用药浓度的最终确定 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论与总结 | 第32-33页 |
| 3 GSK-LSD12HCl与PTX联合作用于人胃癌耐药细胞MGC803/PTX的生物学特性及作用机制研究 | 第33-63页 |
| 3.1 实验材料 | 第33-37页 |
| 3.1.1 细胞株及药品 | 第33页 |
| 3.1.2 实验仪器与设备 | 第33-34页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第34-35页 |
| 3.1.4 主要溶液配制 | 第35-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-45页 |
| 3.2.1 细胞及细胞核形态学观察 | 第37页 |
| 3.2.2 平板克隆检测细胞的集落形成能力 | 第37-38页 |
| 3.2.3 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第38页 |
| 3.2.4 细胞划痕检测细胞的转移侵袭能力 | 第38页 |
| 3.2.5 Transwell实验检测细胞转移能力 | 第38-39页 |
| 3.2.6 胞内活性氧水平的检测 | 第39页 |
| 3.2.7 免疫荧光法检测胞内自噬体 | 第39-40页 |
| 3.2.8 透射电镜检测观察细胞自噬体的产生 | 第40页 |
| 3.2.9 Western blot检测相关蛋白的表达量 | 第40-45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-57页 |
| 3.3.1 GSK-LSD1与PTX联用可以诱导细胞凋亡 | 第45-49页 |
| 3.3.1.1 细胞及细胞核形态学观察 | 第45-46页 |
| 3.3.1.2 平板克隆检测细胞的集落形成能力 | 第46-47页 |
| 3.3.1.3 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 3.3.1.4 Western Blot检测凋亡相关的蛋白表达量 | 第48-49页 |
| 3.3.2 GSK-LSD1与PTX联用可以抑制细胞转移 | 第49-52页 |
| 3.3.2.1 细胞划痕检测细胞转移侵袭能力 | 第49-50页 |
| 3.3.2.2 Transwell实验检测细胞转移能力 | 第50-51页 |
| 3.3.2.3 Western Blot转移相关通路的蛋白表达量 | 第51-52页 |
| 3.3.3 GSK-LSD1与PTX联用可以促进细胞自噬 | 第52-57页 |
| 3.3.3.1 胞内活性氧水平的检测 | 第52-54页 |
| 3.3.3.2 免疫荧光法检测胞内自噬体 | 第54页 |
| 3.3.3.3 透射电镜检测观察细胞自噬体的产生 | 第54-55页 |
| 3.3.3.4 Western Blot检测LC-3、P62的蛋白表达量 | 第55-56页 |
| 3.3.3.5 Western blot检测加入自噬抑制剂 3-MA后LC3B、P62蛋白表达量变化。 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-62页 |
| 3.5 结论 | 第62-63页 |
| 4 总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 个人简历、发表论文、荣誉 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
