摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
引言 | 第8-10页 |
1 实验材料 | 第10-14页 |
1.1 实验对象 | 第10页 |
1.1.1 组织标本 | 第10页 |
1.1.2 细胞系 | 第10页 |
1.2 实验试剂 | 第10-14页 |
1.2.1 细胞培养试剂及药物 | 第10页 |
1.2.2 抗体 | 第10-11页 |
1.2.3 qRT-PCR 相关试剂 | 第11页 |
1.2.4 细胞及组织全蛋白提取试剂 | 第11页 |
1.2.5 蛋白定量试剂 | 第11页 |
1.2.6 凝胶电泳及免疫印迹试剂 | 第11-12页 |
1.2.7 饱和硫酸铵沉淀法提取 RR 酶试剂 | 第12页 |
1.2.8 细胞活力及细胞凋亡检测试剂 | 第12页 |
1.2.9 细胞增殖检测、免疫荧光相关试剂 | 第12-14页 |
2 实验方法 | 第14-20页 |
2.1 细胞培养 | 第14页 |
2.2 RNA 提取及 qRT-PCR | 第14-15页 |
2.2.1 RNA 提取 | 第14页 |
2.2.2 实时定量 PCR | 第14-15页 |
2.3 细胞、组织中蛋白提取及 RR 酶提取 | 第15页 |
2.4 蛋白定量 | 第15-16页 |
2.5 凝胶电泳及免疫印迹 | 第16-17页 |
2.6 RR 酶活性测定 | 第17页 |
2.7 细胞活力检测 | 第17页 |
2.8 EdU 细胞增殖检测 | 第17-18页 |
2.9 免疫荧光法检测 DNA 损伤 | 第18页 |
2.10 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第18页 |
2.11 统计学处理 | 第18-20页 |
3 结果 | 第20-30页 |
3.1 宫颈癌细胞 RRM1、RRM2 蛋白表达水平与酶活性检测 | 第20页 |
3.2 宫颈癌组织和癌旁正常组织中 RR 亚基表达与 RR 酶活性 | 第20-22页 |
3.3 吉西他滨或卡铂对宫颈癌细胞生长增殖能力的影响 | 第22-23页 |
3.4 吉西他滨对宫颈癌细胞 DNA 合成的影响 | 第23-24页 |
3.5 卡铂对宫颈癌细胞的 DNA 损伤作用 | 第24-25页 |
3.6 流式细胞仪检测吉西他滨或卡铂诱导细胞凋亡效应 | 第25-26页 |
3.7 吉西他滨与卡铂合用对宫颈癌细胞的协同毒性作用 | 第26-27页 |
3.8 吉西他滨增强了卡铂产生的 DNA 损伤作用 | 第27-28页 |
3.9 吉西他滨促进了卡铂的诱导细胞凋亡效应 | 第28-30页 |
4 讨论 | 第30-33页 |
5 结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-37页 |
附录A | 第37-44页 |
参考文献 | 第40-44页 |
在学研究成果 | 第44-45页 |
致谢 | 第45页 |