| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-17页 |
| 第一部分 ：组织蛋白酶F在胃癌患者中的表达及临床资料相关性分析 | 第17-39页 |
| 1 前言 | 第17-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-30页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要引物 | 第22页 |
| 2.2 研究对象和分组 | 第22-23页 |
| 2.2.1 组织标本收集选择 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞株选择 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第23页 |
| 2.3.2 胃癌细胞及胃粘膜上皮组织总RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.3.3 RNA反转录 | 第24页 |
| 2.3.4 实时定量PCR检测CTSF在人胃癌细胞株及活体癌组织中的表达情况 | 第24-25页 |
| 2.3.5 细胞总蛋白抽提及蛋白浓度测定 | 第25-26页 |
| 2.3.6 Westernblot鉴定CTSF蛋白水平的表达高低 | 第26-27页 |
| 2.3.7 免疫组化检测胃癌组织中CTSF的表达情况 | 第27-28页 |
| 2.3.8 免疫组化结果观察 | 第28-29页 |
| 2.3.9 数据分析 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-36页 |
| 3.1 胃癌及相应正常胃粘膜上皮组织的CTSF的mRNA及蛋白表达水平 | 第30-32页 |
| 3.2 CTSF与胃癌临床病理学特征及预后的关系 | 第32-34页 |
| 3.3 人胃癌细胞株中CTSF的mRNA及蛋白表达水平 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 第二部分 ：CTSF对胃癌生物学行为的调控作用 | 第39-61页 |
| 6 前言 | 第39-41页 |
| 7 材料和方法 | 第41-48页 |
| 7.1 主要试剂和仪器 | 第41-43页 |
| 7.1.1 主要试剂 | 第41-42页 |
| 7.1.2 主要仪器 | 第42-43页 |
| 7.1.3 实验细胞 | 第43页 |
| 7.2 研究对象和分组 | 第43页 |
| 7.3 研究对方法 | 第43-48页 |
| 7.3.1 人胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823和MKN45细胞培养及传代 | 第43-44页 |
| 7.3.2 慢病毒载体转染人胃癌细胞株 | 第44-45页 |
| 7.3.3 细胞总RNA提取、逆转录,QT-PCR检测不同设计靶点慢病毒转染敲减CTSF后的表达,判断慢病毒转染后敲减CTSF的效率 | 第45页 |
| 7.3.4 WesternBlot检测蛋白水平慢病毒转染后敲减CTSF的效率 | 第45页 |
| 7.3.5 细胞增殖与活力实验CellCountingKit(CCK8)法 | 第45页 |
| 7.3.6 细胞凋亡检测 | 第45-46页 |
| 7.3.7 细胞迁移实验 | 第46-47页 |
| 7.3.8 细胞侵袭实验 | 第47页 |
| 7.3.9 数据分析 | 第47-48页 |
| 8 结果 | 第48-58页 |
| 8.1 慢病毒载体转染人胃癌细胞株及检验转染效率及敲减CTSF效率 | 第48-50页 |
| 8.2 CTSF表达下调促进人胃癌细胞株增殖 | 第50-52页 |
| 8.3 CTSF表达下调抑制人胃癌细胞株凋亡 | 第52-54页 |
| 8.4 CTSF表达下调增强人胃癌细胞株迁移及侵袭能力 | 第54-58页 |
| 9 讨论 | 第58-60页 |
| 10 结论 | 第60-61页 |
| 第三部分 ：CTSF下游靶基因的筛选及相关通路的初步探讨 | 第61-76页 |
| 11 前言 | 第61-62页 |
| 12 材料与方法 | 第62-67页 |
| 12.1 主要试剂和仪器 | 第62-64页 |
| 12.1.1 主要试剂 | 第62-63页 |
| 12.1.2 主要仪器 | 第63-64页 |
| 12.1.3 实验细胞 | 第64页 |
| 12.2 研究对象和分组 | 第64-65页 |
| 12.3 研究方法 | 第65-67页 |
| 12.3.1 人胃癌细胞株SGC-7901细胞培养及传代 | 第65页 |
| 12.3.2 人胃癌细胞转染慢病毒 | 第65页 |
| 12.3.3 细胞总RNA提取、逆转录,QT-PCR检测CTSFshRNA干扰后的表达 | 第65页 |
| 12.3.4 人全基因组表达谱芯片(mRNAmicroarray)的制作 | 第65页 |
| 12.3.5 WesternBlot检测细胞相关蛋白表达 | 第65-66页 |
| 12.3.6 统计学分析 | 第66-67页 |
| 13 结果 | 第67-72页 |
| 13.1 初步筛选CTSF调控的下游基因 | 第67页 |
| 13.2 初步探讨CTSF在胃癌中的下游调控通路 | 第67-69页 |
| 13.3 初步探讨CTSF在胃癌中的可能的上下游调控网络 | 第69-71页 |
| 13.4 验证CTSF调控的相关基因的表达变化 | 第71-72页 |
| 14 讨论 | 第72-75页 |
| 15 结论 | 第75-76页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 综述 | 第84-118页 |
| 参考文献 | 第103-118页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 个人简历 | 第120页 |
