| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1 犬细小病毒的病原及诊断方法 | 第12-14页 |
| 2 犬瘟热病毒的病原及诊断方法 | 第14-16页 |
| 3 荧光定量PCR检测犬细小病毒、犬瘟热病毒研究进展 | 第16-21页 |
| 4 不提取核酸的荧光定量PCR法检测病原体研究进展 | 第21-23页 |
| 5 犬细小病毒的遗传进化研究进展 | 第23-26页 |
| 6 研究目的和意义 | 第26-28页 |
| 第二章 不提取核酸直接检测犬细小病毒和犬瘟热病毒 | 第28-45页 |
| 1 材料 | 第29-31页 |
| 1.1 病毒 | 第29页 |
| 1.2 主要试验仪器 | 第29-30页 |
| 1.3 生物试剂 | 第30页 |
| 1.4 临床病料 | 第30-31页 |
| 2 方法 | 第31-33页 |
| 2.1 病毒核酸提取 | 第31页 |
| 2.2 引物设计与合成 | 第31页 |
| 2.3 重组质粒标准品的制备 | 第31-32页 |
| 2.4 荧光定量(RT-)PCR检测法反应体系的建立及条件优化 | 第32页 |
| 2.5 标准曲线的制作 | 第32-33页 |
| 2.6 荧光定量(RT-)PCR检测法特异性试验 | 第33页 |
| 2.7 荧光定量(RT-)PCR检测法敏感性试验 | 第33页 |
| 2.8 荧光定量(RT-)PCR检测法重复性试验 | 第33页 |
| 2.9 CPV、CDV核酸和原液荧光定量(RT-) PCR结果比较 | 第33页 |
| 2.10 临床样品检测 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-42页 |
| 3.1 质粒标准品的鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2 荧光定量(RT-) PCR反应体系及反应条件 | 第34-35页 |
| 3.3 荧光定量(RT-) PCR标准曲线的制作 | 第35页 |
| 3.4 荧光定量(RT-) PCR特异性试验 | 第35-36页 |
| 3.5 荧光定量(RT-) PCR敏感性试验 | 第36-37页 |
| 3.6 荧光定量(RT-) PCR重复性试验 | 第37-39页 |
| 3.7 CPV、CDV核酸及DARPM检测结果比较 | 第39-40页 |
| 3.8 临床样本的检测 | 第40-42页 |
| 4 分析讨论 | 第42-44页 |
| 5 小结 | 第44-45页 |
| 第三章 细小病毒的遗传进化分析 | 第45-59页 |
| 1 材料 | 第45-46页 |
| 1.1 主要试剂 | 第45-46页 |
| 1.2 试验仪器 | 第46页 |
| 1.3 粪样采集 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-48页 |
| 2.1 粪样病毒DNA提取 | 第46-47页 |
| 2.2 DARPM和PCR扩增及产物检测 | 第47页 |
| 2.3 系统发育分析 | 第47-48页 |
| 2.4 试验株VP2序列比较及同源性分析 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-56页 |
| 3.1 临床检测和DARPM检测结果 | 第48页 |
| 3.2 VP2基因全序列检测 | 第48-50页 |
| 3.3 VP2基因全序列进化分析 | 第50-56页 |
| 4 分析与讨论 | 第56-57页 |
| 5 小结 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的论文、专利目录 | 第69-71页 |
| 攻读学位期间所获得的荣誉 | 第71页 |
