目录 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 棉花概述 | 第12-13页 |
1.1.1 棉花纤维的发育过程 | 第12页 |
1.1.2 棉花的生产现状 | 第12-13页 |
1.2 磷脂酶A2研究进展 | 第13-18页 |
1.2.1 磷脂和磷脂酶概述 | 第13页 |
1.2.2 磷脂酶A2的分类及分子特性 | 第13-14页 |
1.2.3 磷脂酶A2与生长素信号转导 | 第14-15页 |
1.2.4 磷脂酶A2(sPLA2)对细胞发育的影响 | 第15-16页 |
1.2.5 PLA2抑制剂抑制PIN的正确定位 | 第16-18页 |
第二章 引言 | 第18-22页 |
2.1 立论依据 | 第18-20页 |
2.2 技术路线 | 第20-22页 |
第三章 材料与方法 | 第22-36页 |
3.1 材料 | 第22-26页 |
3.1.1 植物材料 | 第22页 |
3.1.2 菌株和载体 | 第22页 |
3.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
3.1.4 主要仪器 | 第23页 |
3.1.5 主要缓冲液和培养基配方 | 第23-26页 |
3.2 方法 | 第26-36页 |
3.2.1 棉花遗传转化 | 第26-27页 |
3.2.2 番茄遗传转化 | 第27-28页 |
3.2.3 蛋白的原核表达 | 第28页 |
3.2.4 脂肪酸甲酯化分析 | 第28页 |
3.2.5 转基因棉花胚珠的扫描电镜观察 | 第28-29页 |
3.2.6 引物设计表 | 第29-30页 |
3.2.7 表达载体的构建 | 第30-36页 |
第四章 结果与分析 | 第36-50页 |
4.1 胚珠离体培养 | 第36-38页 |
4.1.1 PLA2抑制剂ONO、HELSS和ETYA对纤维发育的影响 | 第36-38页 |
4.2 GhPLA2α和GhPLA2β序列分析和表达分析 | 第38-41页 |
4.2.1 棉花GhPLA2α和GhPLA2β基因的序列分析 | 第38-40页 |
4.2.2 GhPLA2α和GhPLA2β组织表达特异性分析 | 第40-41页 |
4.3 GhPLA2α和GhPLA2β原核表达 | 第41-44页 |
4.3.1 原核表达引物设计及表达载体构建 | 第41页 |
4.3.2 蛋白原核诱导表达 | 第41-42页 |
4.3.3 GhPLA2α和GhPLA2β的功能验证 | 第42-44页 |
4.4 GhPLA2α启动子功能分析 | 第44-45页 |
4.4.1 GhPLA2α上游调控序列融合GUS基因的表达载体的构建 | 第44页 |
4.4.2 GhPLA2α上游序列序列融合GUS的转基因番茄的获得及分子鉴定 | 第44-45页 |
4.5 转基因棉花植株的筛选及表型观察 | 第45-50页 |
4.5.1 转基植株分子鉴定 | 第45-48页 |
4.5.2 成熟纤维长度统计 | 第48页 |
4.5.3 转基因棉花的产量和纤维品质性状 | 第48-50页 |
第五章 讨论 | 第50-52页 |
5.1 GhPLA2α和GhPLA2β是有功能的sPLA2 | 第50页 |
5.2 GhPLA2α表达特异性分析 | 第50页 |
5.3 GhPLA2α和GhPLA2β调控棉纤维的伸长 | 第50-52页 |
第六章 主要结论和创新点 | 第52-54页 |
6.1 主要结论 | 第52页 |
6.2 创新点 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录 | 第61-63页 |
附录1 缩略词英汉对照表 | 第61-62页 |
附录2 参与课题及发表论文情况 | 第62-63页 |