| 中文摘要 | 第3-4页 |
| 英文摘要 | 第4页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 引言 | 第7-16页 |
| 一 文献综述 | 第7-13页 |
| (一) 骨骼的发育及其影响因素 | 第7-8页 |
| (二) 成骨细胞分化相关的转录因子的研究及进展 | 第8-10页 |
| (三) 分离特异表基因的方法研究以及进展 | 第10-13页 |
| 二 本论文的研究内容和意义 | 第13-16页 |
| 材料和方法 | 第16-29页 |
| 一 实验材料 | 第16-17页 |
| 1 细胞及其培养试剂 | 第16页 |
| 2 细胞转染以及RNA 制备试剂 | 第16页 |
| 3 SSH 相关试剂以及药品 | 第16页 |
| 4 主要仪器及设备 | 第16-17页 |
| 二 实验方法 | 第17-29页 |
| 1 MLO-Y4 细胞的培养 | 第17页 |
| 2 C3H10T1/2 细胞的培养 | 第17-18页 |
| 3 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第18页 |
| 4 感受态细胞的转化及α互补筛选 | 第18-19页 |
| 5 转染质粒的制备 | 第19-20页 |
| 6 细胞的转染 | 第20页 |
| 7 RNA 的制备及电泳检测 | 第20-21页 |
| 8 RT－PCR | 第21页 |
| 9 PCR- Selected subtraction（抑制性消减杂交SSH） | 第21-26页 |
| 10 Virtual Northern blot | 第26-29页 |
| 结果与分析 | 第29-38页 |
| 一 转染绿色荧光蛋白结果 | 第29页 |
| 二 转染效率检测的RT-PCR 的结果 | 第29-30页 |
| 三 抑制性消减杂交(SSH)的结果 | 第30-38页 |
| 1 PCR 法合成dscDNA | 第30-31页 |
| 2 回收产物经过 RsaI 酶切后电泳结果 | 第31页 |
| 3 酶切后产物与 Adaptor 连接 PCR 检测结果 | 第31-32页 |
| 4 第一次 PCR 结果 | 第32页 |
| 5 第二次 PCR 结果 | 第32-34页 |
| 6 文库的构建 | 第34页 |
| 7 Virtual Northern Blot 结果分析 | 第34-35页 |
| 8 测序结果分析 | 第35-37页 |
| 9 在MLO-Y4细胞中Cbfa1对Osx的作用 | 第37-38页 |
| 讨 论 | 第38-41页 |
| 一 细胞转染 | 第38页 |
| 二 SSH 成功的必要条件 | 第38-39页 |
| 三 测序结果分析 | 第39-40页 |
| 四 Cbfa1 在 MLO-Y4 细胞中诱导 Osx 的表达 | 第40页 |
| 五 SSH 方法的缺欠 | 第40-41页 |
| 结 论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 致 谢 | 第46页 |
