缩略语表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
Abstract | 第13-17页 |
前言 | 第18-19页 |
文献回顾 | 第19-28页 |
1 白癜风概述 | 第19-24页 |
2 microRNA(miRNA)概述 | 第24-28页 |
实验一 miR-146a,miR-149,miR-196a2,miR-499 单核苷酸多态性与白癜风的关联性研究 | 第28-43页 |
1 材料 | 第28-29页 |
1.1 实验仪器 | 第28页 |
1.2 主要试剂 | 第28-29页 |
2 方法 | 第29-34页 |
2.1 研究人群及数据采集 | 第30页 |
2.2 调查表的设计及条目定义 | 第30-31页 |
2.3 血液样本中基因组 DNA 制备及保存 | 第31-32页 |
2.4 PCR-RFLP 测定基因型 | 第32-34页 |
2.5 质量控制及统计学分析方法 | 第34页 |
3 结果 | 第34-40页 |
3.1 研究对象的一般特征 | 第34-36页 |
3.2 电泳结果和基因型判别 | 第36-37页 |
3.3 miRNA 位点单核苷酸基因多态性与白癜风易感性的关系 | 第37-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
实验二 miR-196a2 单核苷酸多态性对人黑素细胞损伤保护的细胞生物学研究 | 第43-53页 |
1 材料 | 第43-44页 |
1.1 主要仪器设备 | 第43页 |
1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
1.3 细胞株 | 第44页 |
2 方法 | 第44-48页 |
2.1 miR-196a2 表达质粒的构建 | 第44-45页 |
2.2 细胞培养 | 第45页 |
2.3 细胞转染 | 第45-46页 |
2.4 黑素细胞活性检测 | 第46页 |
2.5 黑素细胞凋亡检测 | 第46-47页 |
2.6 透射电镜观察不同质粒转染组黑素细胞超微结构变化 | 第47页 |
2.7 统计方法 | 第47-48页 |
3 结果 | 第48-50页 |
3.1 miR-196a2 SNP rs11614913 T>C 对黑素细胞活力无显著影响 | 第48页 |
3.2 miR-196a2 SNP rs11614913 T>C 可降低黑素细胞早期凋亡率 | 第48-49页 |
3.3 miR-196a2 SNP rs11614913 T>C 对黑素细胞超微结构的影响 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
实验三 miR-196a2 单核苷酸多态性对人黑素细胞损伤保护机制的初步研究 | 第53-62页 |
1 材料 | 第53页 |
1.1 主要仪器设备 | 第53页 |
1.2 主要试剂 | 第53页 |
2 方法 | 第53-57页 |
2.1 预测及构建 TRP-13’UTR 报告质粒 | 第53-54页 |
2.2 细胞培养 | 第54-55页 |
2.3 细胞转染 | 第55页 |
2.4 荧光素酶报告基因检测 | 第55页 |
2.5 转染细胞的黑素合成含量测定 | 第55-56页 |
2.6 转染细胞的酪氨酸酶活性测定 | 第56页 |
2.7 转染细胞的 ROS 含量测定 | 第56-57页 |
3 结果 | 第57-58页 |
3.1 miR-196a2 SNP rs11614913 T>C 降低靶基因 TRP-1 的表达 | 第57页 |
3.2 miR-196a2 SNP rs11614913 T>C 能降低黑素细胞的黑素合成量,而对酪氨酸酶活性没有影响 | 第57-58页 |
3.3 miR-196a2 SNP rs11614913 T>C 能降低H_2O_2诱导下黑素细胞中 ROS 水平 | 第58页 |
4 讨论 | 第58-62页 |
小结 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-79页 |
附录 | 第79-82页 |
个人简历和研究成果 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |