| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 人D-二聚体分离纯化及鉴定 | 第13-25页 |
| 1 材料 | 第13-14页 |
| 1.1 器件与仪器 | 第13-14页 |
| 1.2 试剂 | 第14页 |
| 2 方法 | 第14-20页 |
| 2.1 溶液配制 | 第14-16页 |
| 2.1.1 TBS缓冲液 | 第14页 |
| 2.1.2 Sephacryl S-300凝胶层析工作液 | 第14页 |
| 2.1.3 聚焦层析工作液 | 第14-15页 |
| 2.1.4 透析袋处理液 | 第15页 |
| 2.1.5 电泳相关溶液 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-20页 |
| 2.2.1 制备交联纤维蛋白降解片段(FDP) | 第16页 |
| 2.2.2 Sephacryl S-300凝胶层析纯化D-dimer | 第16-17页 |
| 2.2.3 聚焦层析 | 第17页 |
| 2.2.4 D-dimer含量测定 | 第17页 |
| 2.2.5 样品总蛋白的测定 | 第17-18页 |
| 2.2.6 D-dimer总蛋白含量比计算 | 第18页 |
| 2.2.7 透析袋的处理 | 第18页 |
| 2.2.8 SDS-PAGE | 第18-20页 |
| 3. 结果 | 第20-23页 |
| 3.1 制备交联纤维蛋白 | 第20页 |
| 3.2 制备交联纤维蛋白降解产物 | 第20页 |
| 3.3 Sephacryl S-300凝胶层析 | 第20-21页 |
| 3.4 聚焦层析 | 第21-22页 |
| 3.5 终产物SDS-PAGE电泳和Westen Bolt图谱 | 第22页 |
| 3.6 纯化D-dimer相关数据 | 第22-23页 |
| 4. 讨论 | 第23-25页 |
| 第二章 抗人D-二聚体单克隆抗体的制备 | 第25-53页 |
| 1 材料 | 第25-27页 |
| 1.1 小鼠 | 第25页 |
| 1.2 器材与仪器 | 第25-26页 |
| 1.3 试剂 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-41页 |
| 2.1 溶液配制 | 第27-31页 |
| 2.1.1 ELISA相关溶液 | 第27页 |
| 2.1.2 细胞培养相关溶液 | 第27-28页 |
| 2.1.3 核型分析相关溶液 | 第28-29页 |
| 2.1.4 D-dimer McAb纯化相关溶液 | 第29页 |
| 2.1.5 磷酸盐缓冲液(PBS) | 第29页 |
| 2.1.6 电泳相关溶液 | 第29-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-41页 |
| 2.2.1 间接ELISA方法检测抗体 | 第31页 |
| 2.2.2 杂交瘤细胞株的建立 | 第31-35页 |
| 2.2.3 杂交瘤细胞计数 | 第35-36页 |
| 2.2.4 琼脂糖免疫双向扩散法检潮D-dimer McAb亚类 | 第36页 |
| 2.2.5 D-dimer McAb的制备 | 第36-38页 |
| 2.2.6 杂交瘤细胞株遗传学性质鉴定 | 第38-39页 |
| 2.2.7 SDS-PAGE电泳 | 第39-40页 |
| 2.2.8 样品蛋白含量测定 | 第40-41页 |
| 3 结果 | 第41-47页 |
| 3.1 间接ELISA方法检测小鼠血清抗体效价及确定D-dimer包被量 | 第41页 |
| 3.2 细胞融合效果以及阳性孔率 | 第41-42页 |
| 3.3 融合细胞生长情况 | 第42页 |
| 3.4 杂交瘤细胞的冻存 | 第42-43页 |
| 3.5 杂交瘤细胞株性质 | 第43-44页 |
| 3.5.1 核染色体分析 | 第43页 |
| 3.5.2 杂交瘤细胞株分泌D-dimer孳克隆抗体的稳定性 | 第43-44页 |
| 3.5.3 琼脂糖免疫双向扩散检测D-dimer单克隆抗体亚类 | 第44页 |
| 3.6 腹水的诱生、采集和效价测定 | 第44页 |
| 3.7 D-dimer McAb的纯化 | 第44-45页 |
| 3.8 SDS-PAGE鉴定D-dimer McAb纯度 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-53页 |
| 4.1 影响杂交瘤细胞株建立的因素 | 第47-50页 |
| 4.1.1 抗原的选择与处理 | 第47-48页 |
| 4.1.2 细胞生长环境 | 第48-49页 |
| 4.1.3 细胞融合 | 第49-50页 |
| 4.2 腹水的产生和纯化 | 第50-53页 |
| 4.2.1 制备腹水 | 第50-51页 |
| 4.2.2 抗体纯化 | 第51-53页 |
| 第三章 抗人D-二聚体单克隆抗体的鉴定及应用初探 | 第53-72页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| 1.1 器材及仪器 | 第53页 |
| 1.2 试剂 | 第53-54页 |
| 2 方法 | 第54-59页 |
| 2.1 溶液配制 | 第54-55页 |
| 2.1.1 制备D-dimer McAb偶联聚苯乙烯乳胶微粒的相关溶液 | 第54页 |
| 2.1.2 0.1mol/LpH7. 40磷酸盐缓冲液（PBS) | 第54页 |
| 2.1.3 二价金属离子对抗原抗体结合的影响实验溶液 | 第54-55页 |
| 2.2 实验方法 | 第55-59页 |
| 2.2.1 D-dimer McAb的性质鉴定 | 第55-56页 |
| 2.2.2 D-dimer McAb偶联聚苯乙烯乳胶微粒的制备 | 第56-57页 |
| 2.2.3 抗体偶联后的特异性检测 | 第57-58页 |
| 2.2.4 偶联好的聚苯乙烯乳胶微粒与D-dimer的反应 | 第58-59页 |
| 3 结果 | 第59-70页 |
| 3.1 D-dimer McAb性质鉴定 | 第59-68页 |
| 3.1.1 D-dimer McAb与D-dimer反应特异性 | 第59-60页 |
| 3.1.2 D-dimer McAb抗原麦位的确以 | 第60页 |
| 3.1.3 D-dimer McAb相对亲和力的测定 | 第60-61页 |
| 3.1.4 二价金属离子对抗原抗体结合的影响 | 第61-68页 |
| 3.2 D-dimer McAb在聚苯乙烯乳胶表面的偶联反应 | 第68页 |
| 3.3 偶联后聚苯乙烯乳胶微粒与D-dimer反应结果 | 第68-70页 |
| 4. 讨论 | 第70-72页 |
| 4.1 D-dimer McAb的特异性 | 第70页 |
| 4.2 D-dimer McAb对抗原表位的识别 | 第70-71页 |
| 4.3 D-dimer McAb的相对亲和力 | 第71页 |
| 4.4 金属离子对D-dimer McAb与抗原结合的影响 | 第71页 |
| 4.5 聚苯乙烯乳胶微粒表面偶联D-dimer McAb | 第71-72页 |
| 4.6 偶联好的聚苯乙烯微粒与D-dimer反应 | 第72页 |
| 所取得的成果和课题后续设计 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 文献综述 | 第77-87页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
