| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1 日本乙型脑炎病毒概述 | 第9-13页 |
| ·日本乙型脑炎病毒发生与流行特点 | 第9页 |
| ·日本乙型脑炎病毒病原学 | 第9-11页 |
| ·日本乙型脑炎病原特性 | 第9-10页 |
| ·日本乙型脑炎病毒基因组结构 | 第10-11页 |
| ·日本乙型脑炎病毒基因组产物 | 第11页 |
| ·乙脑病毒病疫苗研究进展 | 第11-13页 |
| ·灭活疫苗 | 第11-12页 |
| ·减毒活疫苗 | 第12页 |
| ·基因工程疫苗 | 第12-13页 |
| 2 猪细小病毒概述 | 第13-19页 |
| ·猪细小病毒病的发生与流行特点 | 第13-14页 |
| ·猪细小病毒病原学 | 第14-16页 |
| ·猪细小病毒病原特性 | 第14-15页 |
| ·猪细小病毒基因组结构 | 第15页 |
| ·猪细小病毒基因组产物 | 第15-16页 |
| ·猪细小病毒病疫苗研究进展 | 第16-19页 |
| ·常规疫苗 | 第16-17页 |
| ·新型疫苗 | 第17-19页 |
| 3. IFN-γ文献综述 | 第19-22页 |
| ·IFN-γ的结构和特点 | 第19-20页 |
| ·IFN-γ的产生和调节 | 第20页 |
| ·IFN-γ的生物学功能 | 第20-21页 |
| ·IFN-γ的免疫增强作用 | 第21页 |
| ·问题与展望 | 第21-22页 |
| 4. 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 共表达γ干扰素的乙型脑炎病毒与猪细小病毒核酸疫苗的构建及其免疫原性研究 | 第23-58页 |
| 1. 实验材料 | 第23-25页 |
| ·质粒、菌株及细胞 | 第23页 |
| ·主要药品与试剂 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·主要溶液的配制 | 第24页 |
| ·试验动物 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| 2 试验方法 | 第25-40页 |
| ·IFN-γ基因的克隆与鉴定 | 第25-29页 |
| ·IFN-γ基因引物的设计与合成 | 第25-26页 |
| ·质粒pMD-N-IFN-γ的抽提 | 第26页 |
| ·IFN-γ基因的PCR | 第26-27页 |
| ·IFN-γ基因的回收 | 第27页 |
| ·IFN-γ基因的克隆及鉴定 | 第27-29页 |
| ·含PPV和JEV基因的质粒PCDNA-VE的构建 | 第29-33页 |
| ·重叠PCR连接VP2和E10基因的引物的设计与合成 | 第29-30页 |
| ·VP2-E10基因的重叠PCR | 第30-31页 |
| ·重组基因pMD-VE的回收 | 第31页 |
| ·重组质粒pMD-VE的克隆及鉴定 | 第31-33页 |
| ·重组质粒pcDNA.VE的构建 | 第33页 |
| ·含有IFN-γ、PPV和JEV的重组质粒pcDNA.VEI的构建 | 第33-36页 |
| ·pcDNA-VE与pMD-IFN-γ的酶切回收 | 第33-34页 |
| ·连接与转化 | 第34页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第34-36页 |
| ·PCDNA.VEI质粒DNA转染VERO细胞 | 第36-37页 |
| ·pCDNA.VEI质粒DNA的抽提与纯化 | 第36-37页 |
| ·pCDNA.VEI质粒DNA转染Vero细胞表达与鉴定 | 第37页 |
| ·PCDNA.VEI核酸疫苗的免疫原性研究 | 第37-40页 |
| ·试验设计 | 第37-38页 |
| ·免疫小鼠血清抗体的ELISA检测 | 第38-39页 |
| ·脾淋巴细胞增殖反应试验 | 第39-40页 |
| ·小鼠T细胞亚群动态监测 | 第40页 |
| 3 试验结果 | 第40-51页 |
| ·质粒PMD-IFN-γ的鉴定 | 第40-42页 |
| ·质粒pMD-IFN-γ的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·质粒pMD-IFN-γ的酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·质粒pMD-IFN-γ的序列测定 | 第42页 |
| ·质粒PCDNA.VE的鉴定 | 第42-43页 |
| ·质粒PCDNA.VEI的鉴定 | 第43-44页 |
| ·质粒PCDNA.VEI的序列测定 | 第44-45页 |
| ·PCDNA.VEI质粒DNA转染VERO细胞的荧光观察 | 第45-46页 |
| ·PCDNA.VEI核酸疫苗的免疫原性研究 | 第46-51页 |
| ·抗体检测 | 第46-48页 |
| ·脾细胞增殖试验 | 第48-49页 |
| ·T细胞亚群数量的检测 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-56页 |
| ·核酸疫苗的构建 | 第51-54页 |
| ·核酸疫苗的优点和存在问题 | 第51-52页 |
| ·提高核酸疫苗免疫水平的策略 | 第52-54页 |
| ·抗原表位的选择 | 第54-55页 |
| ·γ干扰素的免疫增强效应 | 第55-56页 |
| ·影响DNA疫苗的免疫效果的其他因素 | 第56页 |
| 5 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
