| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 模式动物斑马鱼 | 第9-11页 |
| 1.1 斑马鱼的形态 | 第9页 |
| 1.2 斑马鱼的繁殖与胚胎发育 | 第9-10页 |
| 1.3 斑马鱼在生物学领域的应用 | 第10-11页 |
| 1.4 斑马鱼研究的意义 | 第11页 |
| 2 CD36 概述 | 第11-16页 |
| 2.1 CD36 的结构特点 | 第11-13页 |
| 2.2 CD36 的分布与功能 | 第13-15页 |
| 2.3 CD36 的表达调控 | 第15-16页 |
| 3 研究的目的、意义及技术路线 | 第16-17页 |
| 3.1 研究的目的、意义 | 第16-17页 |
| 3.2 主要技术路线 | 第17页 |
| 第二章 斑马鱼CD36 基因的原核表达和功能研究 | 第17-58页 |
| 0 前言 | 第17-18页 |
| 1 实验材料及用品 | 第18-20页 |
| 1.1 实验动物的获取和饲养 | 第18页 |
| 1.2 主要化学试剂和仪器设备 | 第18-20页 |
| 1.2.1 主要的化学试剂和配置方法 | 第18-19页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-41页 |
| 2.1 克隆斑马鱼CD36 基因胞外部分序列 | 第20-24页 |
| 2.1.1 引物设计 | 第20-21页 |
| 2.1.2 斑马鱼总 RNA 的提取 | 第21-22页 |
| 2.1.3 反转录获得cDNA | 第22-23页 |
| 2.1.4 PCR克隆CD36 基因上的目的片段 | 第23页 |
| 2.1.5 回收 PCR 产物 | 第23-24页 |
| 2.2 构建原核表达载体 | 第24-27页 |
| 2.2.1 将目的片段导入克隆载体 | 第24页 |
| 2.2.2 转化DH5α感受态细胞 | 第24-25页 |
| 2.2.3 基因测序 | 第25页 |
| 2.2.4 从测序正确菌液中提取重组克隆质粒 | 第25-26页 |
| 2.2.5 pET-28a和目的基因片段的酶切、连接和转化 | 第26-27页 |
| 2.3 重组蛋白pET-28a-CD36 的表达、纯化及复性 | 第27-32页 |
| 2.3.1 重组蛋白的表达和检测 | 第27-28页 |
| 2.3.2 重组蛋白pET-28a-CD36 的Western blotting鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.3 重组蛋白表达条件的优化 | 第29页 |
| 2.3.4 融合蛋白的纯化 | 第29-31页 |
| 2.3.5 重组蛋白的复性 | 第31-32页 |
| 2.3.6 重组蛋白的质谱鉴定 | 第32页 |
| 2.4 重组原核蛋白的功能研究 | 第32-33页 |
| 2.4.1 重组蛋白抗菌活性的检测 | 第32页 |
| 2.4.2 重组蛋白与细菌的结合 | 第32-33页 |
| 2.5 TALEN技术应用于CD36 | 第33-41页 |
| 2.5.1 TALEN技术概述 | 第33-37页 |
| 2.5.2 实验方法 | 第37-41页 |
| 3 结果 | 第41-56页 |
| 3.1 斑马鱼总RNA的制备 | 第41-42页 |
| 3.2 普通PCR扩增目的条带 | 第42-43页 |
| 3.3 重组蛋白的原核表达及纯化 | 第43-50页 |
| 3.3.1 原核表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.3.2 重组蛋白的原核表达 | 第44-46页 |
| 3.3.3 IPTG 最佳诱导浓度和诱导时间的确定 | 第46-47页 |
| 3.3.4 重组蛋白的Western blotting 鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3.5 重组蛋白的纯化 | 第48-49页 |
| 3.3.6 质谱鉴定 | 第49-50页 |
| 3.4 重组蛋白的功能研究 | 第50-52页 |
| 3.4.1 抑菌试验 | 第50-51页 |
| 3.4.2 重组蛋白与细菌的结合 | 第51-52页 |
| 3.5 TALEN技术结果 | 第52-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简历 | 第70-71页 |
| 在学校期间发表的学术论文 | 第71-72页 |
