| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 植物抗逆性生理生化与分子机制研究 | 第10-12页 |
| 1.1.1 植物逆境条件下形态及生理上的变化 | 第10-11页 |
| 1.1.2 植物抗逆的分子机制 | 第11-12页 |
| 1.2 DREB 转录因子的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 DREB 转录因子的结构特征与分类 | 第12页 |
| 1.2.2 DREB 转录因子在逆境胁迫中的作用 | 第12-14页 |
| 1.2.3 DREB 转录因子与脱落酸信号转导途径的关联 | 第14-15页 |
| 1.2.4 DREB 转录因子在植物抗逆基因工程中的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 实时荧光定量 PCR 技术 | 第16-17页 |
| 1.3.1 实时荧光定量 PCR 技术的原理 | 第16页 |
| 1.3.2 实时荧光定量 PCR 技术的应用 | 第16-17页 |
| 1.4 本研究的内容和意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 植物材料与胁迫处理 | 第19页 |
| 2.1.2 试验主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 试验菌株和载体 | 第19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 高粱叶片总 RNA 的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 cDNA 第一条链的合成 | 第20-21页 |
| 2.2.3 高粱 SbDREB2 基因编码区的获得 | 第21页 |
| 2.2.4 目的片段的回收 | 第21-22页 |
| 2.2.5 PCR 扩增产物与 T 载体的连接、转化和测序 | 第22-23页 |
| 2.2.6 高粱基因组 DNA 的提取 | 第23页 |
| 2.2.7 SbDREB2 基因的生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2.8 SbDREB2 基因原核表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.9 SDS-PAGE 电泳检测 SbDREB2 在表达菌株 BL21 中的表达 | 第25页 |
| 2.2.10 SbDREB2 基因的表达特性分析 | 第25-26页 |
| 2.2.11 SbDREB2 基因植物表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.12 p3301-SbDREB2 转化烟草 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-37页 |
| 3.1 高粱总 RNA 的提取 | 第29页 |
| 3.2 SbDREB2 基因开放阅读框（ORF）的克隆 | 第29-30页 |
| 3.3 启动子序列分析 | 第30-31页 |
| 3.4 SbDREB2 基因的生物信息学分析 | 第31页 |
| 3.5 蛋白多序列比对与系统进化树分析 | 第31-33页 |
| 3.6 SbDREB2 蛋白的原核表达载体的构建及诱导表达 | 第33-34页 |
| 3.6.1 SbDREB2 蛋白的原核表达载体的构建 | 第33页 |
| 3.6.2 SbDREB2 蛋白诱导表达 | 第33-34页 |
| 3.7 SbDREB2 基因在不同品种间表达特性分析 | 第34-35页 |
| 3.8 SbDREB2 基因转化烟草 | 第35-37页 |
| 3.8.1 真核表达载体 pCAMBIA3301-SbDREB2 载体的构建 | 第35页 |
| 3.8.2 转烟草阳性植株的获得 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-41页 |
| 4.1 高粱 SbDREB2 转录因子的序列分析 | 第37-38页 |
| 4.2 高粱 SbDREB2 基因启动子序列分析 | 第38页 |
| 4.3 SbDREB2 蛋白原核表达分析 | 第38-39页 |
| 4.4 SbDREB2 基因荧光定量 PCR 表达特性分析 | 第39-40页 |
| 4.5 SbDREB2 基因下一步研究展望 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 附录Ⅰ：试验所用载体图谱 | 第50-52页 |
| 附录Ⅱ：试验中所用试剂配方 | 第52-54页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
