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两个拟南芥叶绿素缺陷突变体的基因克隆与初步功能分析

第一章 文献综述第1-18页
   ·叶绿体的发育第8-9页
   ·叶绿素生物合成重要基因CHLM 的研究进展第9-12页
   ·PPR 蛋白家族的研究进展第12-16页
     ·PPR 蛋白的结构及分类第12-13页
     ·PPR 蛋白的主要功能第13-16页
   ·RNA 编辑第16-18页
第二章 拟南芥黄化突变体chlm-4 的基因定位与分析第18-27页
 摘要第18-19页
 Abstract第19-20页
   ·引言第20页
   ·材料与方法第20-21页
     ·植物材料与生长条件第20页
     ·实验方法第20-21页
       ·野生型和突变体chlm-4 的叶绿体电镜观察第20页
       ·野生型和突变体chlm-4 的叶绿体色素含量的测定第20页
       ·分子标记的建立第20页
       ·图位克隆chlm-4 突变基因第20-21页
       ·等位分析第21页
       ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第21页
   ·实验结果第21-25页
     ·chlm-4 突变体的分离、表型和遗传分析第21-22页
     ·chlm-4 突变体叶绿体色素含量的测定及电子显微镜观察第22页
     ·突变体chlm-4 的基因定位和分析第22-25页
   ·讨论第25-27页
     ·Gly~(59) 对于Mg-原卟啉Ⅸ甲基转移酶功能的行使是必需的第25页
     ·叶绿素合成受阻可能影响基粒类囊体的形成第25-26页
     ·CHLM 基因的4 个等位突变体分析第26-27页
第三章 拟南芥黄化斑叶突变体atecb2-2 的基因克隆与初步功能分析第27-49页
 摘要第27-28页
 Abstract第28-29页
   ·引言第29页
   ·材料与方法第29-37页
     ·实验植物第29页
     ·所用菌株及质粒第29页
     ·主要实验试剂第29-30页
     ·叶绿体色素含量测定及电镜材料的固定第30页
     ·叶绿素诱导动力学曲线测定第30页
     ·植物组织总DNA 的提取第30-31页
       ·研磨法第30-31页
       ·高通量PCR 模板DNA 提取法第31页
     ·分子标记的PCR 反应条件:第31-32页
     ·质粒的提取、酶切鉴定及连接第32页
       ·碱裂解法提取少量质粒第32页
       ·酶切鉴定体系第32页
       ·连接体系第32页
     ·感受态细胞的制备第32-33页
       ·热击E.coli 感受态制备第33页
       ·农杆菌感受态细胞的制备第33页
     ·大肠杆菌和农杆菌的转化第33-34页
       ·大肠杆菌的转化第33-34页
       ·农杆菌的转化第34页
     ·互补载体的构建第34页
     ·植物组织总RNA 的提取第34-35页
     ·RNA 纯化并质检第35页
     ·RNA 反转录合成cDNA 第一链第35-36页
     ·Real-time RT-PCR第36页
     ·质体基因accD 的RNA 编辑效率检测第36-37页
   ·实验结果第37-44页
     ·黄化斑叶突变体ems91 的分离与表型分析第37-38页
     ·突变体ems91 的叶绿体色素含量测定和叶绿体超微结构观察第38-40页
     ·突变体ems91 基因的克隆第40-43页
     ·突变体atecb2-2 中accD 编辑效率的检测第43-44页
   ·讨论第44-49页
     ·Thr500 对于维持AtECB2 基因的功能非常重要第44-45页
     ·AtECB2 基因在叶绿体早期发育中起重要作用第45-47页
     ·除参与accD 基因的RNA 编辑外,AtECB2 蛋白还具有其它功能第47-49页
参考文献第49-53页
致谢第53-54页
攻读学位期间发表的研究成果第54页

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