摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-29页 |
1.1 microRNA概述 | 第13-21页 |
1.1.1 microRNA的发现与生物合成过程 | 第15页 |
1.1.2 microRNA的特点 | 第15-16页 |
1.1.3 microRNA的作用机制 | 第16页 |
1.1.4 microRNA的保守性 | 第16-17页 |
1.1.5 植物microRNA的生物学功能 | 第17-19页 |
1.1.6 microRNA的研究方法 | 第19-21页 |
1.2 植物miRNA对非生物及生物胁迫的响应 | 第21-22页 |
1.2.1 植物miRNA对非生物胁迫的响应 | 第21-22页 |
1.2.2 植物miRNA对生物胁迫的响应 | 第22页 |
1.3 植物miR168研究进展 | 第22-23页 |
1.4 miRNA调控果实发育及果实品质形成的研究 | 第23-28页 |
1.4.1 miRNA调控果实发育 | 第23-24页 |
1.4.2 miRNA调控果实品质形成 | 第24-28页 |
1.5 研究目的及意义 | 第28-29页 |
第二章 果树miRNA成熟体序列保守性解析 | 第29-32页 |
2.1 材料与方法 | 第29-30页 |
2.1.1 数据来源 | 第29页 |
2.1.2 果树miRNA成熟体序列分析 | 第29-30页 |
2.2 结果与讨论 | 第30-31页 |
2.3 小结 | 第31-32页 |
第三章 miR168启动子功能研究 | 第32-46页 |
3.1 试验材料 | 第33-34页 |
3.1.1 植物材料 | 第33页 |
3.1.2 菌株与质粒 | 第33页 |
3.1.3 仪器与试剂 | 第33页 |
3.1.4 克隆miR168启动子所用引物 | 第33-34页 |
3.2 试验方法 | 第34-37页 |
3.2.1 miR168启动子的分离 | 第34-35页 |
3.2.2 拟南芥转化表达载体的构建 | 第35-36页 |
3.2.3 蘸花法转化拟南芥 | 第36-37页 |
3.2.4 GUS组织化学染色检测基因表达 | 第37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-43页 |
3.3.1 不同物种植物miR168序列分析 | 第37页 |
3.3.2 不同物种植物miR168启动子序列的克隆及分析 | 第37-38页 |
3.3.3 不同物种植物miR168启动子在转基因拟南芥中的表型分析 | 第38-40页 |
3.3.4 AGO1m与miR168m表型互补载体的构建 | 第40-41页 |
3.3.5 不同物种植物miR168启动子表型互补分析 | 第41-43页 |
3.4 讨论 | 第43-44页 |
3.5 小结 | 第44-46页 |
第四章 解袋后苹果果皮miRNA差异表达分析 | 第46-62页 |
4.1 试验材料 | 第47页 |
4.1.1 植物材料 | 第47页 |
4.1.2 主要试剂与仪器 | 第47页 |
4.2 试验方法 | 第47-49页 |
4.2.1 果实套袋处理及样品采集 | 第47页 |
4.2.2 miRNA提取及cDNA文库的构建 | 第47-48页 |
4.2.3 苹果果皮中已知miRNA和预测新mi RNA | 第48-49页 |
4.2.4 差异表达miRNA | 第49页 |
4.2.5 预测差异表达miRNA的靶基因 | 第49页 |
4.3 结果与分析 | 第49-58页 |
4.3.3 苹果果皮miRNA测序结果分析 | 第49-50页 |
4.3.4 苹果果皮中已知miRNA的鉴定 | 第50-52页 |
4.3.5 预测苹果果皮中新miRNA | 第52页 |
4.3.6 解袋后苹果果皮miRNA表达差异分析 | 第52-56页 |
4.3.7 差异表达miRNA的目标基因及功能预测 | 第56-58页 |
4.4 讨论 | 第58-61页 |
4.4.1 成熟期苹果果皮miRNA表达特性 | 第58-59页 |
4.4.2 苹果果皮差异表达miRNAs及目标基因在光保护果皮中的作用 | 第59-61页 |
4.5 小结 | 第61-62页 |
第五章 解袋后苹果果皮miRNA对花青苷合成的调控 | 第62-74页 |
5.1 试验材料 | 第62-63页 |
5.1.1 植物材料 | 第62页 |
5.1.2 主要试剂与仪器 | 第62-63页 |
5.2 试验方法 | 第63-64页 |
5.2.1 果实套袋处理及样品采集 | 第63页 |
5.2.2 苹果果皮色泽指标的测定 | 第63页 |
5.2.3 苹果果皮花青苷含量的测定 | 第63-64页 |
5.2.4 数据统计分析 | 第64页 |
5.2.5 苹果miRNAs表达的检测 | 第64页 |
5.2.6 苹果miRNAs目标基因表达的检测 | 第64页 |
5.3 结果与分析 | 第64-71页 |
5.3.1 解袋后苹果果皮色泽参数的变化 | 第64-66页 |
5.3.2 解袋后苹果果皮花青苷含量的变化 | 第66-67页 |
5.3.3 解袋后调控苹果果皮花青苷合成miRNAs的表达 | 第67-69页 |
5.3.4 解袋后调控苹果果皮花青苷合成miRNAs目标基因的表达 | 第69-71页 |
5.4 讨论 | 第71-73页 |
5.5 小结 | 第73-74页 |
第六章 结论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-92页 |
缩略语 | 第92-93页 |
附录 | 第93-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
作者简介 | 第105页 |