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miR168启动子功能特异性解析及microRNA在苹果果皮着色过程中的功能研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第13-29页
    1.1 microRNA概述第13-21页
        1.1.1 microRNA的发现与生物合成过程第15页
        1.1.2 microRNA的特点第15-16页
        1.1.3 microRNA的作用机制第16页
        1.1.4 microRNA的保守性第16-17页
        1.1.5 植物microRNA的生物学功能第17-19页
        1.1.6 microRNA的研究方法第19-21页
    1.2 植物miRNA对非生物及生物胁迫的响应第21-22页
        1.2.1 植物miRNA对非生物胁迫的响应第21-22页
        1.2.2 植物miRNA对生物胁迫的响应第22页
    1.3 植物miR168研究进展第22-23页
    1.4 miRNA调控果实发育及果实品质形成的研究第23-28页
        1.4.1 miRNA调控果实发育第23-24页
        1.4.2 miRNA调控果实品质形成第24-28页
    1.5 研究目的及意义第28-29页
第二章 果树miRNA成熟体序列保守性解析第29-32页
    2.1 材料与方法第29-30页
        2.1.1 数据来源第29页
        2.1.2 果树miRNA成熟体序列分析第29-30页
    2.2 结果与讨论第30-31页
    2.3 小结第31-32页
第三章 miR168启动子功能研究第32-46页
    3.1 试验材料第33-34页
        3.1.1 植物材料第33页
        3.1.2 菌株与质粒第33页
        3.1.3 仪器与试剂第33页
        3.1.4 克隆miR168启动子所用引物第33-34页
    3.2 试验方法第34-37页
        3.2.1 miR168启动子的分离第34-35页
        3.2.2 拟南芥转化表达载体的构建第35-36页
        3.2.3 蘸花法转化拟南芥第36-37页
        3.2.4 GUS组织化学染色检测基因表达第37页
    3.3 结果与分析第37-43页
        3.3.1 不同物种植物miR168序列分析第37页
        3.3.2 不同物种植物miR168启动子序列的克隆及分析第37-38页
        3.3.3 不同物种植物miR168启动子在转基因拟南芥中的表型分析第38-40页
        3.3.4 AGO1m与miR168m表型互补载体的构建第40-41页
        3.3.5 不同物种植物miR168启动子表型互补分析第41-43页
    3.4 讨论第43-44页
    3.5 小结第44-46页
第四章 解袋后苹果果皮miRNA差异表达分析第46-62页
    4.1 试验材料第47页
        4.1.1 植物材料第47页
        4.1.2 主要试剂与仪器第47页
    4.2 试验方法第47-49页
        4.2.1 果实套袋处理及样品采集第47页
        4.2.2 miRNA提取及cDNA文库的构建第47-48页
        4.2.3 苹果果皮中已知miRNA和预测新mi RNA第48-49页
        4.2.4 差异表达miRNA第49页
        4.2.5 预测差异表达miRNA的靶基因第49页
    4.3 结果与分析第49-58页
        4.3.3 苹果果皮miRNA测序结果分析第49-50页
        4.3.4 苹果果皮中已知miRNA的鉴定第50-52页
        4.3.5 预测苹果果皮中新miRNA第52页
        4.3.6 解袋后苹果果皮miRNA表达差异分析第52-56页
        4.3.7 差异表达miRNA的目标基因及功能预测第56-58页
    4.4 讨论第58-61页
        4.4.1 成熟期苹果果皮miRNA表达特性第58-59页
        4.4.2 苹果果皮差异表达miRNAs及目标基因在光保护果皮中的作用第59-61页
    4.5 小结第61-62页
第五章 解袋后苹果果皮miRNA对花青苷合成的调控第62-74页
    5.1 试验材料第62-63页
        5.1.1 植物材料第62页
        5.1.2 主要试剂与仪器第62-63页
    5.2 试验方法第63-64页
        5.2.1 果实套袋处理及样品采集第63页
        5.2.2 苹果果皮色泽指标的测定第63页
        5.2.3 苹果果皮花青苷含量的测定第63-64页
        5.2.4 数据统计分析第64页
        5.2.5 苹果miRNAs表达的检测第64页
        5.2.6 苹果miRNAs目标基因表达的检测第64页
    5.3 结果与分析第64-71页
        5.3.1 解袋后苹果果皮色泽参数的变化第64-66页
        5.3.2 解袋后苹果果皮花青苷含量的变化第66-67页
        5.3.3 解袋后调控苹果果皮花青苷合成miRNAs的表达第67-69页
        5.3.4 解袋后调控苹果果皮花青苷合成miRNAs目标基因的表达第69-71页
    5.4 讨论第71-73页
    5.5 小结第73-74页
第六章 结论第74-76页
参考文献第76-92页
缩略语第92-93页
附录第93-104页
致谢第104-105页
作者简介第105页

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