| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| ·昆虫气味结合蛋白研究进展 | 第13-21页 |
| ·OBP 的研究方法 | 第13-14页 |
| ·气味结合蛋白的分离技术 | 第13-14页 |
| ·气味结合蛋白鉴定与功能研究的技术方法 | 第14页 |
| ·OBP 的类型及存在部位 | 第14-16页 |
| ·OBP 的生化特性 | 第16页 |
| ·OBP 的生物合成与降解 | 第16-17页 |
| ·OBP 的生理功能 | 第17-18页 |
| ·气味结合蛋白和神经膜蛋白间的互作引起化学信号转导 | 第18-19页 |
| ·展望 | 第19-21页 |
| 第二章 研究内容和技术路线 | 第21-22页 |
| ·研究内容 | 第21页 |
| ·小菜蛾触角GOBP2 基因的克隆与序列分析 | 第21页 |
| ·小菜蛾PxGOBP2 基因的原核表达与多克隆抗体的制备 | 第21页 |
| ·小菜蛾PxGOBP2 基因转录与编码蛋白的组织定位研究 | 第21页 |
| ·技术路线（图2-1） | 第21-22页 |
| 第三章 一般材料与和方法 | 第22-27页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·昆虫、菌种和载体 | 第22页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第22页 |
| ·其它试剂 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-25页 |
| ·氯化钙法制备高效感受态细胞 | 第22页 |
| ·质粒DNA 转化感受态细胞 | 第22-23页 |
| ·碱法小量制备质粒DNA | 第23页 |
| ·PCR 反应 | 第23页 |
| ·DNA 片段分离回收 | 第23页 |
| ·双酶切反应 | 第23页 |
| ·连接反应 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE | 第23-24页 |
| ·蛋白印迹Western blot | 第24页 |
| ·外源基因在E.coli 中的表达 | 第24页 |
| ·小菜蛾总RNA 的提取、mRNA 的纯化及15t 链cDNA 的合成 | 第24页 |
| ·Northern Blot | 第24-25页 |
| ·常规实验试剂配制 | 第25-27页 |
| ·LB 培养基 | 第25页 |
| ·碱法质粒提取试剂 | 第25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE 试剂 | 第25页 |
| ·Western blot 试剂 | 第25-26页 |
| ·ELISA 试剂 | 第26页 |
| ·抗生素 | 第26页 |
| ·RNA 酶 | 第26-27页 |
| 第四章 小菜蛾PxGOBP2 基因的克隆与序列分析 | 第27-35页 |
| ·材料与方法 | 第27-30页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·小菜蛾、菌株和载体 | 第27页 |
| ·酶与试剂 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| ·PCR 引物的设计及合成 | 第27页 |
| ·总RNA 的提取及mRNA 的纯化 | 第27-28页 |
| ·一链cDNA 的合成 | 第28页 |
| ·目的基因的克隆 | 第28页 |
| ·PCR 产物的克隆 | 第28-30页 |
| ·DNA 测序及序列分析 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-34页 |
| ·小菜蛾触角总RNA 的提取、m RNA 的纯化及一链cDNA 的合成 | 第30页 |
| ·小菜蛾PxGOBP2 基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·序列分析 | 第31-34页 |
| ·小结与讨论 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| 第五章 小菜蛾PxGOBP2 基因的原核表达与多克隆抗体的制备 | 第35-42页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-37页 |
| ·融合表达载体pMAL-c4E-PxGOBP2 的构建 | 第35页 |
| ·PxGOBP2 在大肠杆菌中的表达 | 第35页 |
| ·表达条件的优化 | 第35-36页 |
| ·小菜蛾PxGOBP2 基因原核表达蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第37页 |
| ·多克隆抗体效价的测定 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·融合表达载体pMAL-c4E-PxGOBP2 的构建 | 第37-38页 |
| ·pMAL-c4E-PxGOBP2 在T81（DE3）中的表达 | 第38-39页 |
| ·表达条件的优化 | 第39页 |
| ·原核表达蛋白PxGOBP2 的亲和色谱纯化 | 第39-40页 |
| ·PxGOBP2 基因多克隆抗体的鉴定和效价测定 | 第40-41页 |
| ·小结与讨论 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第六章 小菜蛾PxGOBP2 基因转录与编码蛋白的组织定位研究 | 第42-46页 |
| ·材料与方法 | 第42-43页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·试虫 | 第42页 |
| ·化学及生化试剂 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-43页 |
| ·RNA 的提取 | 第42页 |
| ·RT-PCR 分析PxGOBP2 基因的转录 | 第42页 |
| ·Northern Blot 分析PxGOBP2 基因的转录 | 第42页 |
| ·小菜蛾虫体蛋白的提取 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE（参考第三章） | 第43页 |
| ·Western Blot 分析 | 第43页 |
| ·结果分析 | 第43-45页 |
| ·RT-PCR 分析 | 第43页 |
| ·Northern Blot | 第43-44页 |
| ·Western Blot | 第44-45页 |
| ·小结与讨论 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第七章 结论与讨论 | 第46-48页 |
| ·结论 | 第46页 |
| ·小菜蛾PxGOBP2 基因的克隆与序列分析 | 第46页 |
| ·小菜蛾PxGOBP2 基因转录分析 | 第46页 |
| ·小菜蛾PxGOBP2 编码蛋白的组织定位分析 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
| 发表论文情况 | 第53页 |
