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高尿酸通过HMGB1/RAGE信号通路诱导内皮功能损伤的实验研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-8页
中英缩略词表第11-12页
第1章 前言第12-15页
第2章 材料与方法第15-35页
    2.1 实验材料第15-21页
        2.1.1 细胞株第15页
        2.1.2 主要实验试剂第15-17页
        2.1.3 主要实验设备与实验仪器第17-18页
        2.1.4 主要溶液配制第18-21页
    2.2 实验方法第21-35页
        2.2.1 细胞常规培养第21-22页
        2.2.2 细胞增殖与毒性检测第22-23页
        2.2.3 细胞干预及分组第23-24页
        2.2.4 荧光定量PCR(Real-time PCR)检测各组RAGE、HMGB1、ICAM-1、VCAM-1 mRNA的表达第24-28页
        2.2.5 western blot分析各处理组RAGE、HMGB1、NF-κB等蛋白的相对表达量第28-31页
        2.2.6 硝酸还原酶法检测各组细胞培养上清NO含量第31-33页
        2.2.7 ELISA法检测细胞培养上清液中IL-6 和TNF-α 的表达水平第33-34页
        2.2.8 统计方法第34-35页
第3章 结果第35-47页
    3.1 高尿酸对血管内皮功能的损伤作用第35-36页
        3.1.1 高尿酸刺激HUVECs致内皮细胞e NOS蛋白表达减少第35页
        3.1.2 高尿酸刺激内皮细胞NO产生和释放减少第35-36页
    3.2 高尿酸作用于HUVECs后激活HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路第36-40页
        3.2.1 高尿酸对细胞RAGE、HMGB1、ICAM-1及VCAM-1 mRNA表达的影响第36-37页
        3.2.2 高尿酸对细胞总RAGE、HMGB1、ICAM-1及VC AM-1蛋白表达的影响第37-38页
        3.2.3 高尿酸对细胞培养上清液中HMGB1蛋白表达的影响第38-39页
        3.2.4 高尿酸对细胞NF-κB核浆蛋白表达的影响第39-40页
        3.2.5 高尿酸对细胞因子IL-6 及TNF-α 释放水平的影响第40页
    3.3 高尿酸对细胞存活率的影响第40-41页
    3.4 抗RAGE抗体通过部分抑制HMGB1/RAGE信号通路的激活减轻尿酸对血管内皮功能的损伤作用第41-47页
        3.4.1 抗RAGE抗体预处理后对高尿酸作用的细胞RAGE与HMGB1 mRNA及蛋白表达的影响第41-42页
        3.4.2 抗RAGE抗体预处理后对高尿酸作用的细胞NF-κB核浆蛋白及胞外HMGB1蛋白表达的影响第42-43页
        3.4.3 抗RAGE抗体预处理后对高尿酸作用的细胞eNOS的蛋白表达及NO水平的影响第43-44页
        3.4.4 抗RAGE抗体预处理后对高尿酸作用的细胞粘附分子mRNA及蛋白表达的影响第44-45页
        3.4.5 抗RAGE抗体预处理后对高尿酸作用的细胞因子IL-6 和TNF-α 释放水平的影响第45-47页
第4章 讨论第47-50页
第5章 结论第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-56页
攻读学位期间的研究成果第56-57页
综述 晚期糖基化终末产物受体与慢性疾病的研究进展第57-67页
    参考文献第64-67页

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