摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第11-13页 |
第二章 CBS在肝癌细胞中的生物学作用 | 第13-33页 |
2.1 实验材料 | 第13-20页 |
2.1.1 主要仪器 | 第13-14页 |
2.1.2 细胞株 | 第14页 |
2.1.3 药品和试剂 | 第14-16页 |
2.1.4 试剂与药品的配制 | 第16-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-24页 |
2.2.1 细胞培养 | 第20页 |
2.2.2 RT-PCR | 第20-21页 |
2.2.3 siRNA转染 | 第21-22页 |
2.2.4 Western Blot | 第22页 |
2.2.5 MTT检测细胞活性 | 第22-23页 |
2.2.6 Edu assay | 第23页 |
2.2.7 细胞凋亡检测 | 第23-24页 |
2.2.8 活性氧检测 | 第24页 |
2.2.9 内源性硫化氢的检测 | 第24页 |
2.2.10 统计学分析 | 第24页 |
2.3 实验结果 | 第24-30页 |
2.3.1 CBS在肝正常细胞和肝癌细胞中的表达水平 | 第24-25页 |
2.3.2 抑制CBS的表达及活性对肝癌细胞内源性硫化氢的释放及细胞生长的影响 | 第25-27页 |
2.3.3 抑制CBS的表达对肝癌细胞增殖的影响 | 第27-28页 |
2.3.4 抑制CBS对凋亡及凋亡相关蛋白的影响 | 第28-29页 |
2.3.5 抑制CBS对HO-1 蛋白以及氧化应激的影响 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30-31页 |
2.5 小结 | 第31-33页 |
第三章 QIC2对肝癌细胞的作用与机制研究 | 第33-51页 |
3.1 实验材料 | 第33-39页 |
3.1.1 主要仪器 | 第33-34页 |
3.1.2 细胞株 | 第34页 |
3.1.3 药品和试剂 | 第34-35页 |
3.1.4 试剂与药品的配制 | 第35-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-42页 |
3.2.1 细胞培养 | 第39页 |
3.2.2 Western Blot | 第39-40页 |
3.2.3 MTT检测细胞活性 | 第40页 |
3.2.4 Edu assay | 第40页 |
3.2.5 活性氧检测 | 第40-41页 |
3.2.6 GSSG和GSH检测 | 第41页 |
3.2.7 内源性硫化氢的检测 | 第41-42页 |
3.2.8 细胞凋亡检测 | 第42页 |
3.2.9 统计学分析 | 第42页 |
3.3 实验结果 | 第42-48页 |
3.3.1 AOAA对肝癌细胞和肝正常细胞生长的影响 | 第42-43页 |
3.3.2 C类化合物对肝癌SMMC-7721细胞中CBS表达及细胞活性的影响 | 第43-44页 |
3.3.3 QIC2对肝癌SMMC-7721细胞生长的影响 | 第44页 |
3.3.4 QIC2对肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
3.3.5 QIC2对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响 | 第45-46页 |
3.3.6 QIC2对肝癌细胞CBS /硫化氢系统和氧化应激影响 | 第46-48页 |
3.4 讨论 | 第48-50页 |
3.5 小结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
附录 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-59页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59-60页 |