| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-14页 |
| 1.1 卤虫的研究概况 | 第8-9页 |
| 1.2 中国卤虫 | 第9页 |
| 1.3 RBBP4的研究进展 | 第9-12页 |
| 1.3.1 RBBP4的研究背景 | 第9-10页 |
| 1.3.2 RBBP4的结构特征 | 第10-11页 |
| 1.3.3 RBBP4的功能 | 第11-12页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第12-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-30页 |
| 2.1 材料 | 第14-19页 |
| 2.1.1 卤虫的孵化及培养 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14-18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 卤虫总RNA提取 | 第19页 |
| 2.2.2 cDNA的合成 | 第19-20页 |
| 2.2.3 目的基因片段的扩增 | 第20页 |
| 2.2.4 cDNA末端快速扩增（RACE） | 第20-22页 |
| 2.2.5 PCR产物回收与克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.6 原位杂交 | 第23-25页 |
| 2.2.7 Real-Time PCR | 第25页 |
| 2.2.8 As-RBBP4蛋白的原核表达 | 第25-27页 |
| 2.2.9 As-RBBP4重组蛋白的大量诱导和纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.10 Western Blot | 第28-29页 |
| 2.2.11 生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.2.12 2~(-△△CT)计算法 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-49页 |
| 3.1 AS-RBBP4 cDNA全长序列的获得 | 第30-32页 |
| 3.1.1 rbbp4片段的获得 | 第30页 |
| 3.1.2 rbbp43’端序列的获得 | 第30-31页 |
| 3.1.3 rbbp45’端序列的获得 | 第31页 |
| 3.1.4 rbbp4 cDNA序列全长 | 第31-32页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第32-37页 |
| 3.3 序列进化关系分析 | 第37-40页 |
| 3.4 As-rbbp4表达模式 | 第40-43页 |
| 3.4.1 As-rbbp4的表达部位 | 第40-41页 |
| 3.4.2 As-rbbp4的表达水平 | 第41-43页 |
| 3.5 AS-rbbp4开放阅读框（ORF）的扩增 | 第43-44页 |
| 3.6 AS-RBBP4重组蛋白的表达及纯化 | 第44-46页 |
| 3.6.1 As-RBBP4重组蛋白的诱导表达 | 第44页 |
| 3.6.2 As-RBBP4重组蛋白的可溶性检测 | 第44-45页 |
| 3.6.3 As-RBBP4重组蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| 3.7 AS-RBBP4蛋白的表达模式 | 第46-49页 |
| 3.7.1 不同发育时期As-RBBP4蛋白的表达 | 第46页 |
| 3.7.2 卤虫温度刺激下As-RBBP4蛋白的表达 | 第46-47页 |
| 3.7.3 高盐刺激下As-RBBP4蛋白的表达 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 As-rbbp4基因全长及进化特征 | 第49页 |
| 4.2 As-rbbp4在不同发育时期的表达部位 | 第49-50页 |
| 4.3 As-rbbp4在不同发育时期的表达水平 | 第50页 |
| 4.4 低温和高盐刺激条件下AS-RBBP4的表达水平 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
