| 缩略语表 | 第8-12页 |
| 中文摘要 | 第12-16页 |
| Abstract | 第16-21页 |
| 前言 | 第22-25页 |
| 文献回顾 | 第25-50页 |
| 一、骨髓损伤与造血重建 | 第25-39页 |
| 1 正常造血 | 第25-32页 |
| 1.1 正常造血 | 第25-28页 |
| 1.1.1 造血干细胞移植 | 第26-27页 |
| 1.1.2 造血干细胞体外扩增 | 第27-28页 |
| 1.2 造血微环境 | 第28-32页 |
| 1.2.1 造血微环境概况 | 第28-29页 |
| 1.2.2 造血微环境组成 | 第29-32页 |
| 2 造血损伤与造血重建 | 第32-39页 |
| 2.1 造血损伤概述 | 第32-33页 |
| 2.2 造血干细胞和造血微环境在造血重建中的作用 | 第33-35页 |
| 2.2.1 造血干细胞与造血重建 | 第33-34页 |
| 2.2.2 造血微环境与造血重建 | 第34-35页 |
| 2.3 造血重建研究现状 | 第35-39页 |
| 2.3.1 Notch信号通路 | 第35-36页 |
| 2.3.2 凋亡信号通路 | 第36页 |
| 2.3.3 TGF-β 信号通路 | 第36页 |
| 2.3.4 细胞因子信号通路 | 第36-37页 |
| 2.3.5 细胞外基质蛋白 | 第37-38页 |
| 2.3.6 造血微环境调控造血重建 | 第38-39页 |
| 二、Notch信号途径对造血调控的多样性 | 第39-50页 |
| 1. Notch信号通路概述 | 第39-42页 |
| 1.1 Notch信号通路的组成 | 第39-40页 |
| 1.2 Notch信号通路的激活 | 第40-41页 |
| 1.3 Notch受体和配体在造血系统的表达 | 第41-42页 |
| 2. Notch信号通路与造血调控 | 第42-50页 |
| 2.1 Notch信号通路与造血干细胞 | 第42-44页 |
| 2.1.1 Notch信号促进造血干细胞―干性‖维持 | 第42-43页 |
| 2.1.2 Notch信号促进造血干细胞体外扩增 | 第43-44页 |
| 2.1.3 Notch信号并非不可或缺 | 第44页 |
| 2.2 Notch信号通路与髓系 | 第44-46页 |
| 2.2.1 Notch信号调控髓系具有争议 | 第44-45页 |
| 2.2.2 Notch信号缺失促进骨髓增殖性疾病 | 第45-46页 |
| 2.2.3 Notch信号与急性髓系白血病 | 第46页 |
| 2.2.4 Notch信号在髓系恶性肿瘤中的应用前景 | 第46页 |
| 2.3 Notch信号通路与淋系 | 第46-47页 |
| 2.3.1 Notch信号调控T、B细胞分化 | 第47页 |
| 2.3.2 Notch信号促进T-ALL发生 | 第47页 |
| 2.4 Notch信号通路与巨核系/红系 | 第47-48页 |
| 2.4.1 Notch信号与巨核系 | 第47-48页 |
| 2.4.2 Notch信号与红系 | 第48页 |
| 2.5 Notch信号通路与造血微环境 | 第48-50页 |
| 第一部分 Notch信号对辐射小鼠造血重建的影响 | 第50-66页 |
| 1. 材料 | 第50-53页 |
| 1.1 实验仪器 | 第50页 |
| 1.2 实验材料 | 第50-53页 |
| 1.2.1 小鼠 | 第50-51页 |
| 1.2.2 试剂 | 第51页 |
| 1.2.3 抗体 | 第51-52页 |
| 1.2.4 引物 | 第52页 |
| 1.2.5 主要缓冲液 | 第52-53页 |
| 2．实验方法 | 第53-56页 |
| 2.1 骨髓特异性剔除RBP-J双转基因小鼠的构建、饲养和鉴定 | 第53-54页 |
| 2.1.1 小鼠的交配 | 第53页 |
| 2.1.2 小鼠基因组提取 | 第53-54页 |
| 2.1.3 小鼠基因型鉴定 | 第54页 |
| 2.2 poly：I-C诱导骨髓特异性RBP-J基因剔除 | 第54-55页 |
| 2.3 辐照模型建立 | 第55页 |
| 2.4 存活率观察 | 第55页 |
| 2.5 流式细胞术 | 第55-56页 |
| 2.6 组织染色 | 第56页 |
| 2.7 瑞氏-吉姆萨染色 | 第56页 |
| 2.8 统计 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-63页 |
| 3.1 遗传修饰小鼠基因型鉴定和剔除效率鉴定 | 第56-57页 |
| 3.1.1 遗传修饰小鼠基因型鉴定 | 第56-57页 |
| 3.1.2 遗传修饰小鼠剔除效率鉴定 | 第57页 |
| 3.2 骨髓Notch信号缺失不利于骨髓抑制后造血恢复 | 第57-63页 |
| 3.2.1 RBP-J剔除小鼠TBI后存活率降低 | 第58-59页 |
| 3.2.2 剔除RBP-J不利于TBI小鼠造血干祖细胞恢复 | 第59-60页 |
| 3.2.3 剔除RBP-J不利于TBI小鼠髓系细胞恢复 | 第60-61页 |
| 3.2.4 RBP-J剔除小鼠TBI后淋系细胞恢复情况 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| 第二部分 可溶性内皮靶向Notch重组配体D1R对骨髓损伤小鼠造血的影响 | 第66-115页 |
| 1 材料 | 第66-69页 |
| 1.1 实验仪器 | 第66页 |
| 1.2 实验材料 | 第66-69页 |
| 1.2.1 小鼠 | 第66页 |
| 1.2.2 细胞、菌种和质粒 | 第66页 |
| 1.2.3 试剂 | 第66-67页 |
| 1.2.4 抗体 | 第67-68页 |
| 1.2.5 引物 | 第68页 |
| 1.2.6 主要缓冲液 | 第68-69页 |
| 2 方法 | 第69-75页 |
| 2.1 构建和纯化mD1R重组蛋白 | 第69-73页 |
| 2.1.1 p ET22b-mD1R原核表达载体的构建 | 第69-71页 |
| 2.1.2 BL-21原核表达mD1R蛋白 | 第71页 |
| 2.1.3 重组蛋白mD1R的纯化 | 第71-72页 |
| 2.1.4 复性与透析 | 第72-73页 |
| 2.2 流式细胞术 | 第73页 |
| 2.3 细胞粘附实验 | 第73页 |
| 2.4 小鼠血常规检测 | 第73页 |
| 2.5 集落形成单位检测 | 第73-74页 |
| 2.6 免疫荧光染色 | 第74-75页 |
| 2.7 统计 | 第75页 |
| 3 结果 | 第75-109页 |
| 3.1 新型内皮细胞靶向Notch信号激活剂mD1R的构建、表达和纯化 | 第75-76页 |
| 3.2 mD1R靶向血管内皮细胞并有效激活Notch信号 | 第76-78页 |
| 3.2.1 mD1R靶向血管内皮细胞 | 第76-77页 |
| 3.2.2 mD1R有效激活Notch信号 | 第77-78页 |
| 3.3 mD1R促进电离辐射小鼠造血重建 | 第78-86页 |
| 3.3.1 mD1R促进辐照小鼠存活 | 第79-81页 |
| 3.3.2 mD1R促进辐照小鼠造血干祖细胞恢复 | 第81-83页 |
| 3.3.3 mD1R促进辐照小鼠髓系细胞重建 | 第83-85页 |
| 3.3.4 mD1R影响辐照小鼠淋系细胞重建 | 第85-86页 |
| 3.4 mD1R扩增的造血干细胞具备短期造血重建能力 | 第86-89页 |
| 3.5 mD1R促进辐照小鼠造血重建呈剂量相关性 | 第89-92页 |
| 3.6 mD1R与G-CSF无协同效应 | 第92-95页 |
| 3.7 mD1R在小鼠体内无毒副作用 | 第95-100页 |
| 3.7.1 mD1R不影响辐照小鼠造血器官 | 第95-98页 |
| 3.7.2 mD1R对造血无恶性影响 | 第98-100页 |
| 3.8 mD1R促进化疗小鼠造血恢复 | 第100-106页 |
| 3.8.1 mD1R促进化疗早期各脏器造血动员 | 第101-103页 |
| 3.8.2 mD1R促进化疗早期造血干祖细胞恢复 | 第103-104页 |
| 3.8.3 mD1R促进化疗早期髓系细胞恢复 | 第104页 |
| 3.8.4 mD1R抑制化疗早期T、B淋巴细胞分化 | 第104-106页 |
| 3.9 mD1R促进四氯化碳损伤小鼠造血恢复 | 第106-109页 |
| 3.9.1 mD1R促进四氯化碳中毒性损伤小鼠造血干祖细胞扩增 | 第107-108页 |
| 3.9.2 mD1R促进四氯化碳中毒性损伤小鼠髓系细胞扩增 | 第108-109页 |
| 4 讨论 | 第109-115页 |
| 第三部分 Notch信号调控造血重建的机制研究 | 第115-135页 |
| 1 材料 | 第115-118页 |
| 1.1 实验仪器 | 第115页 |
| 1.2 实验材料 | 第115-118页 |
| 1.2.1 小鼠 | 第115页 |
| 1.2.2 细胞、菌种和质粒 | 第115页 |
| 1.2.3 试剂 | 第115-116页 |
| 1.2.4 抗体 | 第116-117页 |
| 1.2.5 引物 | 第117-118页 |
| 1.2.6 主要缓冲液 | 第118页 |
| 2 实验方法 | 第118-123页 |
| 2.1 辐照模型建立 | 第118页 |
| 2.2 流式细胞术 | 第118-119页 |
| 2.2.1 细胞凋亡检测 | 第118页 |
| 2.2.2 细胞增殖检测 | 第118-119页 |
| 2.3 小鼠骨髓Lin-细胞磁珠分离 | 第119页 |
| 2.4 LSK细胞体外扩增体系 | 第119-120页 |
| 2.5 Western Blot | 第120页 |
| 2.6 细胞培养及转染 | 第120-121页 |
| 2.7 表达载体构建 | 第121-122页 |
| 2.8 报告基因实验 | 第122页 |
| 2.9 染色质免疫共沉淀 | 第122-123页 |
| 2.10 统计 | 第123页 |
| 3 结果 | 第123-132页 |
| 3.1 mD1R不影响造血干祖细胞增殖 | 第123-125页 |
| 3.2 mD1R抑制造血干祖细胞凋亡 | 第125-126页 |
| 3.3 mD1R上调CSF2RB2促进造血恢复 | 第126-129页 |
| 3.4 Notch调控Csf2rb2启动子激活 | 第129-130页 |
| 3.5 RBP-J和ICN1蛋白能结合Csf2rb2启动子 | 第130-131页 |
| 3.6 Notch上调STAT3信号通路促进生存 | 第131-132页 |
| 4 讨论 | 第132-135页 |
| 第四部分 Notch信号与临床造血干细胞移植后造血重建的相关性研究 | 第135-142页 |
| 1 材料 | 第135-136页 |
| 1.1 实验仪器 | 第135页 |
| 1.2 实验材料 | 第135-136页 |
| 1.2.1 临床样本 | 第135页 |
| 1.2.2 试剂 | 第135页 |
| 1.2.3 抗体 | 第135页 |
| 1.2.4 引物 | 第135-136页 |
| 1.2.5 主要缓冲液 | 第136页 |
| 2 方法 | 第136-137页 |
| 2.1 临床患者外周血单个核细胞甩片标本的制备 | 第136页 |
| 2.2 RNA提取和反转录PCR | 第136页 |
| 2.3 实时定量PCR | 第136-137页 |
| 2.4 免疫荧光染色 | 第137页 |
| 2.5 统计 | 第137页 |
| 3 结果 | 第137-140页 |
| 3.1 移植后Notch入核信号与患者预后正相关 | 第137-139页 |
| 3.2 移植后Notch下游靶基因激活与预后正相关 | 第139-140页 |
| 4 讨论 | 第140-142页 |
| 小结 | 第142-144页 |
| 参考文献 | 第144-160页 |
| 个人简历和研究成果 | 第160-161页 |
| 致谢 | 第161-162页 |
