格氏线虫表皮免疫抑制蛋白的研究
摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
英文缩略表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-28页 |
·昆虫病原线虫 | 第15-18页 |
·昆虫病原线虫的生物学 | 第15页 |
·昆虫病原线虫的生活史 | 第15-17页 |
·昆虫病原线虫共生细菌 | 第17页 |
·昆虫病原线虫与其共生细菌的共生关系 | 第17-18页 |
·线虫与昆虫免疫系统的关系 | 第18-22页 |
·昆虫免疫概述 | 第18-21页 |
·昆虫病原线虫与昆虫免疫系统的相互作用 | 第21-22页 |
·线虫表面物质与侵染的关系 | 第22-24页 |
·昆虫病原线虫的表皮 | 第22-23页 |
·表皮蛋白 | 第23页 |
·脂类 | 第23-24页 |
·基因工程技术在昆虫病原真菌中的应用 | 第24-25页 |
·转基因绿僵菌 | 第24-25页 |
·转基因白僵菌 | 第25页 |
·研究背景和意义 | 第25-26页 |
·实验设计和技术路线 | 第26-28页 |
第二章 格氏线虫免疫抑制蛋白的纯化与基因克隆 | 第28-50页 |
·材料和方法 | 第28-41页 |
·实验材料 | 第28页 |
·菌株和质粒 | 第28页 |
·主要试剂和药品 | 第28页 |
·线虫的培养 | 第28-29页 |
·线虫表皮蛋白的粗提取 | 第29页 |
·表皮蛋白粗提物蛋白分析 | 第29-30页 |
·全胶回收纯化免疫抑制蛋白 | 第30页 |
·抗昆虫免疫蛋白活性测定 | 第30-31页 |
·免疫抑制蛋白序列鉴定 | 第31-33页 |
·免疫抑制蛋白基因的克隆 | 第33-41页 |
·免疫抑制蛋白的序列分析 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-49页 |
·线虫的培养与收集 | 第41页 |
·表皮蛋白的提取和免疫抑制蛋白的纯化 | 第41-42页 |
·免疫抑制蛋白的活性分析 | 第42-43页 |
·免疫抑制蛋白的双向电泳分析和质谱鉴定 | 第43-44页 |
·Sg-enol基因的克隆 | 第44-47页 |
·Sg-ENOL理论序列的生物信息学分析 | 第47-49页 |
·讨论 | 第49页 |
·小结 | 第49-50页 |
第三章 Sg-ENOL的表达、活性鉴定和抗体制备 | 第50-60页 |
·材料和方法 | 第50-55页 |
·菌株和质粒 | 第50页 |
·主要试剂和药品 | 第50页 |
·抗免疫蛋白原核表达 | 第50-52页 |
·蛋白纯化 | 第52-54页 |
·Sg-ENOL酶学活性测定 | 第54页 |
·多克隆抗体制备及纯化 | 第54-55页 |
·结果与分析 | 第55-58页 |
·Sg-enol基因的原核表达 | 第55-56页 |
·重组Sg-ENOL蛋白的纯化 | 第56-57页 |
·Sg-ENOL的烯醇化酶活性 | 第57页 |
·重组Sg-ENOL抗体的制备与纯化 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58页 |
·小结 | 第58-60页 |
第四章 Sg-ENOL作用机理的初步研究 | 第60-73页 |
·材料和方法 | 第60-67页 |
·菌株、质粒和细胞 | 第60页 |
·主要试剂和药品 | 第60页 |
·免疫电镜检测天然Sg-ENOL定位 | 第60-61页 |
·天然Sg-ENOL蛋白的分泌特性分析 | 第61-62页 |
·昆虫细胞表达和定位 | 第62-66页 |
·Sg-ENOL与Plasminogen结合 | 第66-67页 |
·结果与分析 | 第67-71页 |
·天然Sg-ENOL的表达与定位 | 第67-69页 |
·Sg-ENOL在昆虫细胞中的表达和定位 | 第69-70页 |
·Sg-ENOL与血纤维溶酶原的结合 | 第70-71页 |
·讨论 | 第71-72页 |
·小结 | 第72-73页 |
第五章 Sg-ENOL在转基因绿僵菌中的应用 | 第73-81页 |
·材料与方法 | 第73-77页 |
·菌株及标准试虫 | 第73页 |
·主要试剂和药品 | 第73页 |
·检测Sg-ENOL对绿僵菌的增效作用 | 第73-74页 |
·转基因绿僵菌的构建 | 第74-77页 |
·转基因绿僵菌杀虫活性测定 | 第77页 |
·结果与分析 | 第77-79页 |
·Sg-ENOL对绿僵菌的增效作用 | 第77-78页 |
·绿僵菌转化子的分子验证 | 第78页 |
·绿僵菌转化子的杀虫活性 | 第78-79页 |
·讨论 | 第79-80页 |
·小结 | 第80-81页 |
结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-89页 |
附录 | 第89-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
作者简历 | 第93页 |