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格氏线虫表皮免疫抑制蛋白的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
英文缩略表第14-15页
第一章 文献综述第15-28页
   ·昆虫病原线虫第15-18页
     ·昆虫病原线虫的生物学第15页
     ·昆虫病原线虫的生活史第15-17页
     ·昆虫病原线虫共生细菌第17页
     ·昆虫病原线虫与其共生细菌的共生关系第17-18页
   ·线虫与昆虫免疫系统的关系第18-22页
     ·昆虫免疫概述第18-21页
     ·昆虫病原线虫与昆虫免疫系统的相互作用第21-22页
   ·线虫表面物质与侵染的关系第22-24页
     ·昆虫病原线虫的表皮第22-23页
     ·表皮蛋白第23页
     ·脂类第23-24页
   ·基因工程技术在昆虫病原真菌中的应用第24-25页
     ·转基因绿僵菌第24-25页
     ·转基因白僵菌第25页
   ·研究背景和意义第25-26页
   ·实验设计和技术路线第26-28页
第二章 格氏线虫免疫抑制蛋白的纯化与基因克隆第28-50页
   ·材料和方法第28-41页
     ·实验材料第28页
     ·菌株和质粒第28页
     ·主要试剂和药品第28页
     ·线虫的培养第28-29页
     ·线虫表皮蛋白的粗提取第29页
     ·表皮蛋白粗提物蛋白分析第29-30页
     ·全胶回收纯化免疫抑制蛋白第30页
     ·抗昆虫免疫蛋白活性测定第30-31页
     ·免疫抑制蛋白序列鉴定第31-33页
     ·免疫抑制蛋白基因的克隆第33-41页
     ·免疫抑制蛋白的序列分析第41页
   ·结果与分析第41-49页
     ·线虫的培养与收集第41页
     ·表皮蛋白的提取和免疫抑制蛋白的纯化第41-42页
     ·免疫抑制蛋白的活性分析第42-43页
     ·免疫抑制蛋白的双向电泳分析和质谱鉴定第43-44页
     ·Sg-enol基因的克隆第44-47页
     ·Sg-ENOL理论序列的生物信息学分析第47-49页
   ·讨论第49页
   ·小结第49-50页
第三章 Sg-ENOL的表达、活性鉴定和抗体制备第50-60页
   ·材料和方法第50-55页
     ·菌株和质粒第50页
     ·主要试剂和药品第50页
     ·抗免疫蛋白原核表达第50-52页
     ·蛋白纯化第52-54页
     ·Sg-ENOL酶学活性测定第54页
     ·多克隆抗体制备及纯化第54-55页
   ·结果与分析第55-58页
     ·Sg-enol基因的原核表达第55-56页
     ·重组Sg-ENOL蛋白的纯化第56-57页
     ·Sg-ENOL的烯醇化酶活性第57页
     ·重组Sg-ENOL抗体的制备与纯化第57-58页
   ·讨论第58页
   ·小结第58-60页
第四章 Sg-ENOL作用机理的初步研究第60-73页
   ·材料和方法第60-67页
     ·菌株、质粒和细胞第60页
     ·主要试剂和药品第60页
     ·免疫电镜检测天然Sg-ENOL定位第60-61页
     ·天然Sg-ENOL蛋白的分泌特性分析第61-62页
     ·昆虫细胞表达和定位第62-66页
     ·Sg-ENOL与Plasminogen结合第66-67页
   ·结果与分析第67-71页
     ·天然Sg-ENOL的表达与定位第67-69页
     ·Sg-ENOL在昆虫细胞中的表达和定位第69-70页
     ·Sg-ENOL与血纤维溶酶原的结合第70-71页
   ·讨论第71-72页
   ·小结第72-73页
第五章 Sg-ENOL在转基因绿僵菌中的应用第73-81页
   ·材料与方法第73-77页
     ·菌株及标准试虫第73页
     ·主要试剂和药品第73页
     ·检测Sg-ENOL对绿僵菌的增效作用第73-74页
     ·转基因绿僵菌的构建第74-77页
     ·转基因绿僵菌杀虫活性测定第77页
   ·结果与分析第77-79页
     ·Sg-ENOL对绿僵菌的增效作用第77-78页
     ·绿僵菌转化子的分子验证第78页
     ·绿僵菌转化子的杀虫活性第78-79页
   ·讨论第79-80页
   ·小结第80-81页
结论第81-82页
参考文献第82-89页
附录第89-92页
致谢第92-93页
作者简历第93页

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