| 英文缩写词说明 | 第9-12页 |
| 摘要 | 第12-15页 |
| ABSTRACT | 第15-19页 |
| 第一部分 文献综述 | 第20-37页 |
| 1 脂肪组织与前脂肪细胞 | 第20-25页 |
| 1.1 脂肪组织 | 第20-21页 |
| 1.2 前脂肪细胞 | 第21-24页 |
| 1.3 脂肪细胞因子 | 第24-25页 |
| 2 VC与前脂肪细胞分化 | 第25-31页 |
| 2.1 VC的发现 | 第25-26页 |
| 2.2 VC的生物学功能 | 第26-27页 |
| 2.3 VC的吸收及进入哺乳动物细胞的途径 | 第27-28页 |
| 2.4 VC参与靶基因表达调控 | 第28-29页 |
| 2.5 VC对前脂肪细胞成脂分化的影响 | 第29-31页 |
| 3 胶原蛋白与前脂肪细胞成脂分化 | 第31-33页 |
| 3.1 WAT中的胶原蛋白 | 第31-32页 |
| 3.2 脂肪细胞中的Col Ⅵ | 第32-33页 |
| 4 ERK1/2 信号通路与前脂肪细胞成脂分化 | 第33-35页 |
| 4.1 ERK1/2 信号通路 | 第33-34页 |
| 4.2 ERK1/2 信号通路与前脂肪细胞成脂分化 | 第34-35页 |
| 5 VC、ERK1/2 信号通路与胶原蛋白 | 第35-36页 |
| 6 论文研究的目的及意义 | 第36-37页 |
| 第二部分 AA2P促进 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化 | 第37-59页 |
| 1 实验设计 | 第37页 |
| 2 实验材料与试剂 | 第37-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.2 实验试剂及配制 | 第37-43页 |
| 3 实验仪器 | 第43-44页 |
| 4 实验步骤 | 第44-53页 |
| 4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与冻存 | 第44-45页 |
| 4.2 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养 | 第45页 |
| 4.3 油红O染色及萃取 | 第45-46页 |
| 4.4 细胞总RNA提取、检测及定量 | 第46-47页 |
| 4.5 细胞总RNA反转录为cDNA | 第47-48页 |
| 4.6 cDNA内参 β-actin检测 | 第48页 |
| 4.7 Real-time PCR | 第48-49页 |
| 4.8 细胞总蛋白抽提 | 第49-50页 |
| 4.9 细胞总蛋白浓度测定 | 第50页 |
| 4.10 细胞总蛋白变性及质量检测 | 第50-51页 |
| 4.11 Western Blot检测靶蛋白 | 第51-52页 |
| 4.12 统计学分析 | 第52-53页 |
| 5 实验结果 | 第53-57页 |
| 5.1 AA2P促进前脂肪细胞最佳浓度筛选 | 第53页 |
| 5.2 AA2P促进 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的形态学观察 | 第53-54页 |
| 5.3 AA2P对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响 | 第54-56页 |
| 5.4 AA2P影响 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响 | 第56-57页 |
| 6 讨论 | 第57-58页 |
| 7 小结 | 第58-59页 |
| 第三部分 ERK1/2 磷酸化抑制剂抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化 | 第59-68页 |
| 1 实验设计 | 第59页 |
| 2 实验材料与试剂 | 第59页 |
| 2.1 实验材料 | 第59页 |
| 2.2 实验试剂及配制 | 第59页 |
| 3 实验仪器 | 第59-60页 |
| 4 实验步骤 | 第60-61页 |
| 4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与冻存 | 第60页 |
| 4.2 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养 | 第60页 |
| 4.3 油红O染色及萃取 | 第60页 |
| 4.4 细胞总RNA提取、检测及定量 | 第60页 |
| 4.5 细胞总RNA反转录为cDNA | 第60页 |
| 4.6 cDNA内参 β-actin检测 | 第60页 |
| 4.7 Real-time PCR | 第60页 |
| 4.8 细胞全蛋白抽提 | 第60页 |
| 4.9 细胞全蛋白浓度测定 | 第60页 |
| 4.10 细胞全蛋白变性及质量检测 | 第60页 |
| 4.11 Western Blot检测靶蛋白 | 第60-61页 |
| 4.12 统计学分析 | 第61页 |
| 5 实验结果 | 第61-65页 |
| 5.1 ERK1/2 信号通路抑制剂U0126干预浓度筛选 | 第61-62页 |
| 5.2 U0126抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的形态观察结果 | 第62-63页 |
| 5.3 U0126对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响 | 第63-64页 |
| 5.4 U0126对 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响 | 第64-65页 |
| 6 讨论 | 第65-67页 |
| 7 小结 | 第67-68页 |
| 第四部分 总胶原蛋白合成抑制剂抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化 | 第68-77页 |
| 1 实验设计 | 第68页 |
| 2 实验材料与试剂 | 第68页 |
| 2.1 实验材料 | 第68页 |
| 2.2 实验试剂及配制 | 第68页 |
| 3 实验仪器 | 第68-69页 |
| 4 实验步骤 | 第69-70页 |
| 4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与冻存 | 第69页 |
| 4.2 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养 | 第69页 |
| 4.3 油红O染色及萃取 | 第69页 |
| 4.4 细胞总RNA提取、检测及定量 | 第69页 |
| 4.5 细胞总RNA反转录为cDNA | 第69页 |
| 4.6 cDNA内参 β-actin检测 | 第69页 |
| 4.7 Real-time PCR | 第69页 |
| 4.8 细胞全蛋白抽提 | 第69页 |
| 4.9 细胞全蛋白浓度测定 | 第69页 |
| 4.10 细胞全蛋白变性及质量检测 | 第69页 |
| 4.11 Western Blot检测靶蛋白 | 第69-70页 |
| 4.12 统计学分析 | 第70页 |
| 5 实验结果 | 第70-75页 |
| 5.1 胶原蛋白合成抑制剂EDHB最佳干预浓度筛选 | 第70-71页 |
| 5.2 EDHB影响 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的形态学观察结果 | 第71-72页 |
| 5.3 EDHB对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响 | 第72-74页 |
| 5.4 EDHB对 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响 | 第74-75页 |
| 6 讨论 | 第75-76页 |
| 7 小结 | 第76-77页 |
| 第五部分 慢病毒敲低Col VI抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化 | 第77-87页 |
| 1 实验设计 | 第77页 |
| 2 实验材料和试剂 | 第77-78页 |
| 2.1 实验材料 | 第77页 |
| 2.2 载体及siRNA序列 | 第77-78页 |
| 2.3 实验试剂及配制 | 第78页 |
| 3 实验仪器 | 第78页 |
| 4 实验步骤 | 第78-80页 |
| 4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏 | 第78页 |
| 4.2 慢病毒感染 | 第78-79页 |
| 4.3 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养 | 第79页 |
| 4.4 油红O染色及萃取 | 第79页 |
| 4.5 细胞总RNA提取、检测及定量 | 第79页 |
| 4.6 细胞总RNA反转录为cDNA | 第79页 |
| 4.7 cDNA内参 β-actin检测 | 第79页 |
| 4.8 Real-time PCR | 第79页 |
| 4.9 细胞全蛋白抽提 | 第79页 |
| 4.10 细胞全蛋白浓度测定 | 第79页 |
| 4.11 细胞全蛋白变性及质量检测 | 第79页 |
| 4.12 Western Blot检测靶蛋白 | 第79页 |
| 4.13 统计学分析 | 第79-80页 |
| 5 实验结果 | 第80-85页 |
| 5.1 慢病毒感染 3T3-L1前脂肪细胞MOI值筛选及最佳感染条件摸索 | 第80页 |
| 5.2 敲低Col VI对 3T3-L1细胞成脂分化形态的影响 | 第80-82页 |
| 5.3 敲低Col VI对 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响 | 第82-84页 |
| 5.4 敲低Col VI对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响 | 第84-85页 |
| 6 讨论 | 第85-86页 |
| 7 小结 | 第86-87页 |
| 第六部分 EDHB与U0126合用抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化 | 第87-93页 |
| 1 实验设计 | 第87页 |
| 2 实验材料与试剂 | 第87页 |
| 2.1 实验材料 | 第87页 |
| 2.2 实验试剂及配制 | 第87页 |
| 3 实验仪器 | 第87页 |
| 4 实验步骤 | 第87-89页 |
| 4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与冻存 | 第87页 |
| 4.2 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养 | 第87-88页 |
| 4.3 油红O染色及萃取 | 第88页 |
| 4.4 细胞总RNA提取、检测及定量 | 第88页 |
| 4.5 细胞总RNA反转录为cDNA | 第88页 |
| 4.6 cDNA内参 β-actin检测 | 第88页 |
| 4.7 Real-time PCR | 第88页 |
| 4.8 细胞全蛋白抽提 | 第88页 |
| 4.9 细胞全蛋白浓度测定 | 第88页 |
| 4.10 细胞全蛋白变性及质量检测 | 第88页 |
| 4.11 Western Blot检测靶蛋白 | 第88页 |
| 4.12 统计学分析 | 第88-89页 |
| 5 实验结果 | 第89-92页 |
| 5.1 EDHB和U0126合用抑制 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的形态学检测结果 | 第89页 |
| 5.2 EDHB与U0126合用对 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中靶基因表达的影响 | 第89-91页 |
| 5.3 EDHB与U0126合用对 3T3-L1细胞成脂分化过程中靶蛋白表达的影响 | 第91-92页 |
| 6 讨论 | 第92页 |
| 7 小结 | 第92-93页 |
| 全文讨论与总结 | 第93-98页 |
| 参考文献 | 第98-109页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 英文文章 | 第111-142页 |
