摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
第章:绪论 | 第8-15页 |
·癌症 | 第8-10页 |
·低氧信号通路 | 第10-11页 |
·维生素C 在癌症治疗中的历史 | 第11-14页 |
·本课题的创新之处 | 第14-15页 |
第二章:实验材料与方法 | 第15-30页 |
·实验材料 | 第15-21页 |
·本课题使用细胞及来源 | 第15页 |
·本课题使用抗体总结 | 第15页 |
·本课题使用ShRNA 总结 | 第15页 |
·培养基和一些重要试剂的配置方法 | 第15-18页 |
·主要试剂与材料 | 第18-20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-30页 |
·RNA 提取步骤及RT-PCR | 第21-22页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第22-23页 |
·免疫蛋白印迹 | 第23-24页 |
·免疫荧光 | 第24-25页 |
·细胞培养 | 第25-26页 |
·质粒转染及病毒感染 | 第26页 |
·MTT 法检测细胞活力 | 第26-27页 |
·高效液相色谱法HPLC 检测细胞内维生素C 的量 | 第27页 |
·液体闪烁仪检测维生素C 同位素竞争性吸收实验 | 第27页 |
·细胞内ROS 含量的测定 | 第27-28页 |
·Comet assay(彗星电泳法检测细胞DNA损伤) | 第28页 |
·TUNEL 法(脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法) | 第28-29页 |
·ATP 含量测量 | 第29页 |
·NAD/NADH 测量 | 第29页 |
·Hoechst-PI 染色法 | 第29-30页 |
第三章:实验结果 | 第30-40页 |
·维生素C 选择性杀死VHL 缺陷的肾癌细胞,且具有HIF 依赖性 | 第30-31页 |
·氧化型维生素C 通过GLUT1 转运至胞内并产生细胞毒性 | 第31-34页 |
·HIF 阳性细胞在胞内累积更多的维生素C 并通过与胞内铁离子反应产生更多的ROS | 第34-36页 |
·过量的ROS 引发DNA 损伤并激发DNA 修复 | 第36-37页 |
·DNA 修复通路的过分激活诱发细胞坏死 | 第37-40页 |
第四章:讨论 | 第40-44页 |
参考文献 | 第44-52页 |
附录 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-55页 |
攻读硕士学位期间取得的与学术论文相关的成果 | 第55页 |