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高剂量维生素C杀死肾癌细胞相关机理研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
第章:绪论第8-15页
   ·癌症第8-10页
   ·低氧信号通路第10-11页
   ·维生素C 在癌症治疗中的历史第11-14页
   ·本课题的创新之处第14-15页
第二章:实验材料与方法第15-30页
   ·实验材料第15-21页
     ·本课题使用细胞及来源第15页
     ·本课题使用抗体总结第15页
     ·本课题使用ShRNA 总结第15页
     ·培养基和一些重要试剂的配置方法第15-18页
     ·主要试剂与材料第18-20页
     ·主要仪器第20-21页
   ·实验方法第21-30页
     ·RNA 提取步骤及RT-PCR第21-22页
     ·碱裂解法提取质粒第22-23页
     ·免疫蛋白印迹第23-24页
     ·免疫荧光第24-25页
     ·细胞培养第25-26页
     ·质粒转染及病毒感染第26页
     ·MTT 法检测细胞活力第26-27页
     ·高效液相色谱法HPLC 检测细胞内维生素C 的量第27页
     ·液体闪烁仪检测维生素C 同位素竞争性吸收实验第27页
     ·细胞内ROS 含量的测定第27-28页
     ·Comet assay(彗星电泳法检测细胞DNA损伤)第28页
     ·TUNEL 法(脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法)第28-29页
     ·ATP 含量测量第29页
     ·NAD/NADH 测量第29页
     ·Hoechst-PI 染色法第29-30页
第三章:实验结果第30-40页
   ·维生素C 选择性杀死VHL 缺陷的肾癌细胞,且具有HIF 依赖性第30-31页
   ·氧化型维生素C 通过GLUT1 转运至胞内并产生细胞毒性第31-34页
   ·HIF 阳性细胞在胞内累积更多的维生素C 并通过与胞内铁离子反应产生更多的ROS第34-36页
   ·过量的ROS 引发DNA 损伤并激发DNA 修复第36-37页
   ·DNA 修复通路的过分激活诱发细胞坏死第37-40页
第四章:讨论第40-44页
参考文献第44-52页
附录第52-53页
致谢第53-55页
攻读硕士学位期间取得的与学术论文相关的成果第55页

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