| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 本文所用英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 肝癌危害及其诊断 | 第11-14页 |
| 1.1.1 肝癌的危害 | 第11页 |
| 1.1.2 肝癌的现有诊断方法及不足 | 第11-13页 |
| 1.1.3 核酸适配体筛选对肝癌早期诊治研究的重要性 | 第13-14页 |
| 1.2 肿瘤核酸适配体及筛选 | 第14-18页 |
| 1.2.1. 核酸适配体的特点 | 第14-15页 |
| 1.2.2 肿瘤核酸适配体筛选原理及流程 | 第15-17页 |
| 1.2.3 肿瘤细胞核酸适配体筛选现状 | 第17-18页 |
| 1.3. 核酸适配体在肿瘤标志物研究和癌症诊断治疗中的应用 | 第18-22页 |
| 1.3.1 核酸适配体在肿瘤标志物研究中的应用 | 第18-19页 |
| 1.3.2 核酸适配体用于癌症诊断的研究 | 第19-20页 |
| 1.3.3 核酸适配体用于癌症治疗的研究 | 第20-22页 |
| 1.4 本论文拟开展的工作 | 第22-23页 |
| 第2章 人肝癌细胞株 Bel-7404 核酸适配体的筛选 | 第23-39页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 实验部分 | 第23-30页 |
| 2.2.1 试剂和仪器 | 第23-26页 |
| 2.2.2 溶液的配制 | 第26页 |
| 2.2.3 PCR 退火温度的优化 | 第26-27页 |
| 2.2.4 琼脂糖电泳与凝胶成像 | 第27页 |
| 2.2.5 筛选实验部分 | 第27-28页 |
| 2.2.6 ssDNA 的制备及定量 | 第28-29页 |
| 2.2.7 多轮筛选 | 第29页 |
| 2.2.8 克隆和测序 | 第29页 |
| 2.2.9 流式细胞分析 | 第29-30页 |
| 2.2.10 激光共聚焦成像 | 第30页 |
| 2.2.11 序列的同源性及二级结构分析 | 第30页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第30-38页 |
| 2.3.0．PCR 退火温度的选择 | 第31页 |
| 2.3.1 筛选条件的选择 | 第31-32页 |
| 2.3.2 PCR 产物电泳结果 | 第32-33页 |
| 2.3.3 紫外定量 ssDNA | 第33-34页 |
| 2.3.4 筛选文库进化过程 | 第34页 |
| 2.3.5 测序结果及分析 | 第34-36页 |
| 2.3.6 核酸适配体的初步考察 | 第36-37页 |
| 2.3.7 核酸适配体的二级结构分析 | 第37-38页 |
| 2.4 小结 | 第38-39页 |
| 第3章 人肝癌细胞株 Bel-7404 核酸适配体的性质考察及其应用 | 第39-53页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 实验部分 | 第39-43页 |
| 3.2.1 试剂和仪器 | 第39-41页 |
| 3.2.2 溶液的配制 | 第41页 |
| 3.2.3 流式细胞分析 | 第41-43页 |
| 3.2.4 核酸适配体在组织切片上的应用 | 第43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-52页 |
| 3.3.1 核酸适配体的解离常数 | 第43-44页 |
| 3.3.2 核酸适配体的细胞特异性分析 | 第44-45页 |
| 3.3.3 核酸适配体的温度稳定性分析 | 第45-46页 |
| 3.3.4 核酸适配体的酶作用影响 | 第46-47页 |
| 3.3.5 核酸适配体的序列优化结果分析 | 第47-51页 |
| 3.3.6 组织切片结果分析 | 第51-52页 |
| 3.4 小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 附录 A 攻读硕士学位期间所发表的学术论文及专利 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
