| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-32页 |
| 1.1 草甘膦简介 | 第12-13页 |
| 1.2 草甘膦的生产方法 | 第13-20页 |
| 1.2.1 甘氨酸(Gly)路线合成草甘膦 | 第13-15页 |
| 1.2.1.1 亚磷酸二甲酯法 | 第13-14页 |
| 1.2.1.2 亚磷酸三甲酯法 | 第14-15页 |
| 1.2.2 亚氨基二乙酸(IDA)路线合成草甘膦 | 第15-20页 |
| 1.2.2.1 氯乙酸法 | 第16页 |
| 1.2.2.2 氨代氯乙酸法 | 第16-17页 |
| 1.2.2.3 氮川三乙酸法 | 第17页 |
| 1.2.2.4 氢氰酸直接合成法 | 第17-18页 |
| 1.2.2.5 二乙醇胺脱氢法 | 第18-19页 |
| 1.2.2.6 羟基乙腈法 | 第19-20页 |
| 1.3 亚氨基二乙酸的其他应用 | 第20-21页 |
| 1.3.1 鳌合剂 | 第20-21页 |
| 1.3.2 其他精细化工领域 | 第21页 |
| 1.4 腈水解酶 | 第21-25页 |
| 1.4.1 腈水解酶的作用机理 | 第22-23页 |
| 1.4.2 腈水解酶的区域选择性 | 第23页 |
| 1.4.3 腈水解酶的立体选择性 | 第23页 |
| 1.4.4 腈水解酶的应用 | 第23-25页 |
| 1.4.5 腈水解酶用于生产亚氨基二乙酸 | 第25页 |
| 1.5. 结语 | 第25-27页 |
| 参考文献 | 第27-32页 |
| 第二章 亚氨基二乙腈水解酶菌种的筛选与鉴定 | 第32-45页 |
| 2.1 引言 | 第32-33页 |
| 2.2 材料与方法 | 第33-39页 |
| 2.2.1 土样 | 第33页 |
| 2.2.2 化学试剂与主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.2.3 培养基 | 第34页 |
| 2.2.3.1 富集培养基 | 第34页 |
| 2.2.3.2 平板培养基 | 第34页 |
| 2.2.3.3 斜面培养基 | 第34页 |
| 2.2.3.4 发酵培养基 | 第34页 |
| 2.2.4 菌种的初筛 | 第34-35页 |
| 2.2.5 菌种的复筛 | 第35页 |
| 2.2.6 菌株形态结构观察及生理生化鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.7 Biolog鉴定 | 第36页 |
| 2.2.8 16S rDNA 的分子生物学鉴定 | 第36页 |
| 2.2.9 系统发育学分析 | 第36页 |
| 2.2.10 酶活的定义 | 第36-37页 |
| 2.2.11 检测方法 | 第37-39页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第39-43页 |
| 2.3.1 筛选结果 | 第39页 |
| 2.3.2 菌株ZJB-09133 的鉴定 | 第39-43页 |
| 2.3.2.1 菌落以及形态特征 | 第39-40页 |
| 2.3.2.2 Biolog 鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.2.3 16S rDNA的分子生物学鉴定 | 第41-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 第三章 Alcaligenes faecalis ZJB09133 细胞培养 和产酶条件的研究 | 第45-59页 |
| 3.1 引言 | 第45-46页 |
| 3.2 材料 | 第46-47页 |
| 3.2.1 菌种 | 第46页 |
| 3.2.2 斜面培养基 | 第46页 |
| 3.2.3 种子培养基 | 第46页 |
| 3.2.4 基础发酵培养基 | 第46页 |
| 3.2.5 主要试剂及设备 | 第46-47页 |
| 3.3 方法 | 第47-48页 |
| 3.3.1 培养方法 | 第47页 |
| 3.3.1.1 斜面培养 | 第47页 |
| 3.3.1.2 种子摇瓶培养 | 第47页 |
| 3.3.1.3 发酵摇瓶培养 | 第47页 |
| 3.3.2 菌体的收集 | 第47页 |
| 3.3.3 生物量的测定 | 第47-48页 |
| 3.3.4 静息细胞的转化 | 第48页 |
| 3.3.5 酶活的定义 | 第48页 |
| 3.3.6 液相检测方法 | 第48页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第48-57页 |
| 3.4.1 碳源的优化 | 第49-50页 |
| 3.4.2 复合碳源的比例 | 第50-51页 |
| 3.4.3 氮源的优化 | 第51页 |
| 3.4.4 酵母膏的用量的优化 | 第51-52页 |
| 3.4.5 金属离子对菌体生长及产酶的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.6 Mg~(2+)的浓度对菌体生长及产酶的影响 | 第53-54页 |
| 3.4.7 诱导剂对菌体生长及产酶的影响 | 第54页 |
| 3.4.8 培养基的初始pH对菌体生长及产酶的影响 | 第54-55页 |
| 3.4.9 培养温度对菌体生长及产酶的影响 | 第55-56页 |
| 3.4.10 接种量对菌体生长及产酶的影响 | 第56页 |
| 3.4.11 随着时间变化菌体的生长以及产酶曲线 | 第56-57页 |
| 3.5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第四章 Alcaligenes faecalis ZJB09133 静息细胞以及 游离酶转化条件的研究 | 第59-77页 |
| 4.1 引言 | 第59-60页 |
| 4.2 材料与方法 | 第60-62页 |
| 4.2.1 菌株 | 第60页 |
| 4.2.2 主要试剂与设备 | 第60页 |
| 4.2.3 菌体细胞的培养和收集 | 第60-61页 |
| 4.2.4 细胞破碎以及游离酶的获得 | 第61页 |
| 4.2.5 酶活的定义 | 第61页 |
| 4.2.6 粗酶液总蛋白含量的测定 | 第61页 |
| 4.2.7 分析方法 | 第61-62页 |
| 4.3 结果与分析 | 第62-75页 |
| 4.3.1 超声波破碎条件的优化 | 第62-64页 |
| 4.3.1.1 蛋白质—OD595 值标准曲线的绘制 | 第62页 |
| 4.3.1.2 功率对破碎效果的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.1.3 菌悬液浓度的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.1.4 破碎时间的影响 | 第64页 |
| 4.3.2 静息细胞以及游离酶的催化特性的研究 | 第64-75页 |
| 4.3.2.1 静息细胞以及游离酶对底物浓度的耐受性 | 第64-65页 |
| 4.3.2.2 细胞浓度以及游离酶浓度对转化过程影响 | 第65-66页 |
| 4.3.2.3 转化温度对静息细胞以及游离酶的转化过程的影响 | 第66-68页 |
| 4.3.2.4 缓冲体系对静息细胞以及游离酶的转化过程的影响 | 第68-70页 |
| 4.3.2.5 静息细胞以及游离酶的温度稳定性 | 第70-71页 |
| 4.3.2.6 产物对酶活的抑制 | 第71-73页 |
| 4.3.2.7 静息细胞以及游离酶转化的进程 | 第73-74页 |
| 4.3.2.8 静息细胞水解亚氨基二乙腈过程的动力学特性的研究 | 第74-75页 |
| 4.4 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-77页 |
| 第五章 结论与展望 | 第77-80页 |
| 5.1 结论 | 第77-78页 |
| 5.2 展望 | 第78-80页 |
| 附录 | 第80-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表的主要学术论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
