| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-15页 |
| 1.1 家蝇、日本沼虾 | 第9页 |
| 1.2 节肢动物的先天免疫 | 第9-10页 |
| 1.3 硫氰酸生成酶研究进展 | 第10-15页 |
| 第2章 序列的检索与分析 | 第15-26页 |
| 2.1 实验方法 | 第15页 |
| 2.2 实验结果 | 第15-25页 |
| 2.2.1 家蝇与日本沼虾转录组中的硫氰酸生成酶序列 | 第15-20页 |
| 2.2.2 序列分析 | 第20-25页 |
| 2.3 讨论 | 第25-26页 |
| 第3章 原核表达和重组蛋白活性研究 | 第26-35页 |
| 3.1 实验方法 | 第26-28页 |
| 3.1.1 总 RNA 提取和 cDNA 合成 | 第26页 |
| 3.1.2 原核表达载体构建 | 第26-27页 |
| 3.1.3 重组蛋白的诱导表达与条件优化 | 第27页 |
| 3.1.4 可溶性表达的重组蛋白的纯化 | 第27页 |
| 3.1.5 重组蛋白的变性与复性 | 第27-28页 |
| 3.1.6 重组蛋白的硫氰酸生成酶活性测定 | 第28页 |
| 3.1.7 数据的统计分析 | 第28页 |
| 3.2 实验结果 | 第28-33页 |
| 3.2.1 原核表达载体构建 | 第28-29页 |
| 3.2.2 原核表达结果 | 第29-31页 |
| 3.2.3 重组蛋白的硫氰酸生成酶活性测定 | 第31-33页 |
| 3.3 讨论 | 第33-35页 |
| 第4章 家蝇硫氰酸生成酶 Md-Rho1 相互作用蛋白的筛选 | 第35-39页 |
| 4.1 实验方法 | 第35-36页 |
| 4.1.1 GST 标签融合蛋白的表达、纯化和活性测定 | 第35页 |
| 4.1.2 GST pull down 实验 | 第35-36页 |
| 4.2 实验结果 | 第36-37页 |
| 4.2.1 GST 标签融合蛋白的表达、纯化和活性测定 | 第36-37页 |
| 4.2.2 GST pull down 实验 | 第37页 |
| 4.3 讨论 | 第37-39页 |
| 第5章 家蝇与日本沼虾硫氰酸生成酶的表达模式研究 | 第39-46页 |
| 5.1 实验方法 | 第39-40页 |
| 5.1.1 细菌刺激 | 第39页 |
| 5.1.2 总 RNA 提取与 cDNA 合成 | 第39页 |
| 5.1.3 家蝇幼虫总蛋白的提取 | 第39页 |
| 5.1.4 硫氰酸生成酶活性测定 | 第39-40页 |
| 5.1.5 数据处理 | 第40页 |
| 5.2 实验结果 | 第40-44页 |
| 5.2.1 家蝇 Md-Rho3 基因的组织定量和细菌刺激后表达模式 | 第40-41页 |
| 5.2.2 家蝇 Md-Rho4 基因的组织定量和细菌刺激后表达模式 | 第41页 |
| 5.2.3 家蝇幼虫细菌刺激后硫氰酸生成酶活性变化 | 第41-42页 |
| 5.2.4 日本沼虾 Mn-Rho1 基因的组织定量和细菌刺激后表达模式 | 第42-43页 |
| 5.2.5 日本沼虾 Mn-Rho2 基因的组织定量和细菌刺激后表达模式 | 第43-44页 |
| 5.3 讨论 | 第44-46页 |
| 第6章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 硕士期间发表论文 | 第52页 |
