| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文对照 | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-21页 |
| 1.1 肿瘤干细胞 | 第13页 |
| 1.1.1 肿瘤干细胞 | 第13页 |
| 1.1.2 肿瘤干细胞的生物学特性 | 第13页 |
| 1.2 肿瘤干细胞的分离与鉴定 | 第13-15页 |
| 1.2.1 流式细胞分选法（FACS） | 第14页 |
| 1.2.2 磁性细胞分选法（MACS） | 第14页 |
| 1.2.3 侧群细胞分选法 | 第14-15页 |
| 1.2.4 肿瘤干细胞的鉴定方法 | 第15页 |
| 1.3 结肠癌干细胞及其标记物 | 第15-18页 |
| 1.3.1 CD133 | 第16页 |
| 1.3.2 CD44 | 第16-17页 |
| 1.3.3 EpCAM | 第17页 |
| 1.3.4 Nanog | 第17-18页 |
| 1.3.5 CLDN-6 | 第18页 |
| 1.4 甲硫哒嗪（Thioridazine） | 第18-20页 |
| 1.4.1 甲硫哒嗪可抑制肿瘤细胞的增殖 | 第18-19页 |
| 1.4.2 甲硫哒嗪可促进肿瘤干细胞分化 | 第19页 |
| 1.4.3 甲硫哒嗪可诱导肿瘤细胞的凋亡 | 第19-20页 |
| 1.5 实验立题依据 | 第20-21页 |
| 第2章 材料与试剂 | 第21-27页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 仪器 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.3 细胞株 | 第23页 |
| 2.1.4 PCR 所用引物 | 第23页 |
| 2.2 主要试剂配制 | 第23-27页 |
| 2.2.1 PBS 配制 | 第23页 |
| 2.2.2 0.25%胰酶-EDTA 混合液配制（10×） | 第23-24页 |
| 2.2.3 RPMI 1640 培养液配制 | 第24页 |
| 2.2.4 DMEM/F12 肿瘤干细胞培养液配制 | 第24页 |
| 2.2.5 磁珠分选用 Buffer1 配制 | 第24页 |
| 2.2.6 磁珠分选用 Buffer2 配制 | 第24-25页 |
| 2.2.7 磁珠分选用 Buffer3 配制 | 第25页 |
| 2.2.8 磁珠分选用 Dnase I 配制 | 第25页 |
| 2.2.9 药物溶液的配制 | 第25页 |
| 2.2.10 Western Blot 分析用 30%聚丙酰胺溶液配制 | 第25页 |
| 2.2.11 Western Blot 分析用 10%SDS 溶液 | 第25页 |
| 2.2.12 Western Blot 分析用 10%过硫酸铵（APS）溶液 | 第25-26页 |
| 2.2.13 Western Blot 分析用 SDS-PAGE 电泳缓冲液（5×） | 第26页 |
| 2.2.14 Western Blot 分析用转膜液（10×） | 第26页 |
| 2.2.15 Western Blot 分析用 TBS 缓冲液（10×） | 第26页 |
| 2.2.16 5%封闭液 | 第26页 |
| 2.2.17 Western Blot 制胶浓度 | 第26页 |
| 2.2.18 吖啶橙（AO） | 第26页 |
| 2.2.19 溴化乙锭（EB） | 第26-27页 |
| 第3章 实验方法 | 第27-36页 |
| 3.1 结肠癌干细胞的分选、培养及鉴定 | 第27-32页 |
| 3.1.1 免疫磁珠法筛选 EpCAM~+CD44~+结肠癌干细胞 | 第27-28页 |
| 3.1.2 结肠癌干细胞培养 | 第28-29页 |
| 3.1.3 EpCAM~+CD44~+结肠癌干细胞的鉴定 | 第29-32页 |
| 3.2 甲硫哒嗪对结肠癌干细胞增殖的影响 | 第32-33页 |
| 3.3 甲硫哒嗪对结肠癌干细胞凋亡的影响 | 第33-35页 |
| 3.3.1 细胞形态观察 | 第33页 |
| 3.3.2 吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）双染 | 第33页 |
| 3.3.3 Annexin V-FITC-PI 双染色法检测细胞早期凋亡 | 第33页 |
| 3.3.4 细胞凋亡线粒体膜电位检测（JC-1） | 第33-34页 |
| 3.3.5 Bax 和 Bcl-2 的 Q-PCR 检测 | 第34页 |
| 3.3.6 Western Blot 检测 caspase3 蛋白的表达 | 第34-35页 |
| 3.4 数据分析 | 第35-36页 |
| 第4章 实验结果 | 第36-43页 |
| 4.1 结肠癌干细胞的分选、培养及鉴定 | 第36-39页 |
| 4.1.1 EpCAM~+CD44~+HCT116 细胞的筛选 | 第36页 |
| 4.1.2 EpCAM~+CD44~+HCT116 细胞的培养 | 第36页 |
| 4.1.3 EpCAM~+CD44~+HCT116 细胞的鉴定 | 第36-39页 |
| 4.2 甲硫哒嗪对结肠癌干细胞增殖的影响 | 第39页 |
| 4.3 甲硫哒嗪对结肠癌干细胞凋亡的影响 | 第39-43页 |
| 4.3.1 药物作用后的细胞形态变化 | 第39页 |
| 4.3.2 吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）双染 | 第39-40页 |
| 4.3.3 Annexin V-FITC-PI 双染色法检测细胞早期凋亡 | 第40-41页 |
| 4.3.4 细胞凋亡线粒体膜电位检测（JC-1） | 第41页 |
| 4.3.5 Bax 和 Bcl-2 的 Q-PCR 检测 | 第41-42页 |
| 4.3.6 Western Blot 分析 | 第42-43页 |
| 第5章 讨论 | 第43-45页 |
| 第6章 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
