摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-34页 |
2.1 研究资料及仪器设备 | 第13-17页 |
2.1.1 实验对象 | 第13页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第13-14页 |
2.1.3 药品与试剂 | 第14-15页 |
2.1.4 试剂配制 | 第15-17页 |
2.2 实验流程与方法 | 第17-34页 |
2.2.1 CF的培养 | 第17-18页 |
2.2.1.1 CFs的原代培养 | 第17-18页 |
2.2.1.2 CFs的传代培养 | 第18页 |
2.2.2 细胞活力的测定 | 第18-19页 |
2.2.3 免疫组化(SABC)法 | 第19-20页 |
2.2.4 载体腺病毒的扩增 | 第20页 |
2.2.5 载体腺病毒对CFs的感染 | 第20页 |
2.2.6 CaN-siRNA的设计 | 第20-21页 |
2.2.7 siRNA转染与检测 | 第21页 |
2.2.8 CaN-siRNA的筛选 | 第21-22页 |
2.2.9 实验分组与指标测定 | 第22-33页 |
2.2.9.1 细胞增殖活性的测定 | 第23-24页 |
2.2.9.2 细胞内钙离子浓度的检测 | 第24-25页 |
2.2.9.3 胶原蛋白表达的测定——免疫印迹(western blot)法 | 第25-28页 |
2.2.9.4 CaN活性的测定 | 第28-29页 |
2.2.9.5 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法 | 第29-32页 |
2.2.9.6 动态观察NFAT的核转移 | 第32-33页 |
2.2.10 统计学分析 | 第33-34页 |
第三章 结果 | 第34-54页 |
3.1 不同频率、电压和作用时间的EFS对CFs增殖活力的影响 | 第34-36页 |
3.2 不同浓度的CaN抑制剂(CsA和FK506)对EFS诱导的CFs增殖的影响 | 第36-38页 |
3.3 表达无活性的CaN病毒对EFS诱导的CFs增殖的影响 | 第38-40页 |
3.4 CaN-siRNA对EFS诱导的CFs增殖的影响 | 第40-44页 |
3.5 药物作用、表达无活性的病毒作用和小干扰作用对EFS诱导的CFs内collagen Ⅰ和Ⅲ蛋白表达的影响 | 第44-46页 |
3.6 钙离子螫合剂对EFS诱导的钙离子浓度和CFs增殖的影响 | 第46-48页 |
3.7 药物作用、表达无活性的病毒和小干扰作用对EFS诱导的CaN活性表达的影响 | 第48-49页 |
3.8 CFs内NFAT各亚型的表达 | 第49-50页 |
3.9 药物作用和表达无活性的病毒对EFS诱导的NFAT核转移的影响 | 第50-54页 |
第四章 讨论 | 第54-58页 |
第五章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
英文缩写词表 | 第63-65页 |
综述 | 第65-83页 |
综述参考文献 | 第79-83页 |
在攻读硕士学位期间公开发表的论文 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |