英文缩写词表 | 第7-10页 |
提要 | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一章 综述 | 第12-28页 |
第一部分 系统性红斑狼疮T淋巴细胞的异常及其在发病中的作用 | 第12-23页 |
第二部分 系统性红斑狼疮T细胞活化和克隆扩增的特点 | 第23-28页 |
第二章 实验材料及方法 | 第28-41页 |
一、 实验动物 | 第28页 |
二、 主要试剂 | 第28-33页 |
1 试剂及来源 | 第28-30页 |
2 主要实验试剂配制 | 第30-33页 |
三、 主要实验仪器 | 第33-35页 |
四、 实验方法 | 第35-41页 |
(一) RT-PCR-SSCP分析法 | 第35-36页 |
1 细胞总RNA的提取 | 第35页 |
2 TCR Vβ基因的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第35-36页 |
3 单链构象多态性分析(SSCP) | 第36页 |
(二) TCR Vβ6基因CDR3片段核苷酸序列分析 | 第36-38页 |
1 DNA片段的回收 | 第36-37页 |
2 连接反应 | 第37页 |
3 重组质粒的转化 | 第37页 |
4 转化细胞的筛选与鉴定 | 第37页 |
5 质粒DNA的纯化 | 第37-38页 |
6 测序PCR反应 | 第38页 |
7 测序样品准备及测序 | 第38页 |
8 T细胞克隆鉴定 | 第38页 |
(三) 流式细胞术检测T细胞表型 | 第38-39页 |
1 各脏器单细胞悬液的制备 | 第38-39页 |
2 染色 | 第39页 |
3 检测 | 第39页 |
(四) 磁珠分离法(MACS)分选细胞 | 第39页 |
1 染色 | 第39页 |
2 细胞分选 | 第39页 |
(五) 流式细胞术分选细胞 | 第39-40页 |
1 脏器采集 | 第39-40页 |
2 染色 | 第40页 |
3 细胞分选 | 第40页 |
4 分选细胞的RT-PCR-SSCP分析 | 第40页 |
(六) 图像分析 | 第40-41页 |
第三章 实验结果 | 第41-63页 |
一、 狼疮鼠各脏器中T细胞克隆性分析 | 第41页 |
1 幼年未发病组狼疮鼠的T细胞克隆性 | 第41页 |
2 成年发病组狼疮鼠的T细胞克隆性 | 第41页 |
二、 成年发病狼疮鼠的T细胞表型分析 | 第41-42页 |
1 克隆扩增广泛浸润的T细胞为CD4~+T细胞 | 第42页 |
2 狼疮发病鼠中存在活化的CD4~+T细胞 | 第42页 |
3 克隆扩增并广泛浸润的T细胞为CD4~+CD69~+T细胞 | 第42页 |
三、 狼疮发病鼠中TCR Vβ6亚家族CDR3片段的测序分析 | 第42-44页 |
1 (NZB×NZW)F1成年发病鼠的CDR3序列特点 | 第42-43页 |
2 MRL/1pr成年发病鼠的CDR3序列特点 | 第43页 |
3 两种狼疮模型鼠的CDR3序列的共同特点 | 第43页 |
4 图像分析结果 | 第43-44页 |
附表 | 第44-52页 |
附图 | 第52-63页 |
第四章 讨论 | 第63-68页 |
第五章 结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-86页 |
攻读博士学位期间发表的文章 | 第86-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
中文摘要 | 第88-91页 |
英文摘要 | 第91页 |