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狼疮模型鼠各脏器TCR Vβ基因的表达及T细胞克隆性分析

英文缩写词表第7-10页
提要第10-11页
前言第11-12页
第一章 综述第12-28页
    第一部分 系统性红斑狼疮T淋巴细胞的异常及其在发病中的作用第12-23页
    第二部分 系统性红斑狼疮T细胞活化和克隆扩增的特点第23-28页
第二章 实验材料及方法第28-41页
    一、 实验动物第28页
    二、 主要试剂第28-33页
        1 试剂及来源第28-30页
        2 主要实验试剂配制第30-33页
    三、 主要实验仪器第33-35页
    四、 实验方法第35-41页
        (一) RT-PCR-SSCP分析法第35-36页
            1 细胞总RNA的提取第35页
            2 TCR Vβ基因的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)第35-36页
            3 单链构象多态性分析(SSCP)第36页
        (二) TCR Vβ6基因CDR3片段核苷酸序列分析第36-38页
            1 DNA片段的回收第36-37页
            2 连接反应第37页
            3 重组质粒的转化第37页
            4 转化细胞的筛选与鉴定第37页
            5 质粒DNA的纯化第37-38页
            6 测序PCR反应第38页
            7 测序样品准备及测序第38页
            8 T细胞克隆鉴定第38页
        (三) 流式细胞术检测T细胞表型第38-39页
            1 各脏器单细胞悬液的制备第38-39页
            2 染色第39页
            3 检测第39页
        (四) 磁珠分离法(MACS)分选细胞第39页
            1 染色第39页
            2 细胞分选第39页
        (五) 流式细胞术分选细胞第39-40页
            1 脏器采集第39-40页
            2 染色第40页
            3 细胞分选第40页
            4 分选细胞的RT-PCR-SSCP分析第40页
        (六) 图像分析第40-41页
第三章 实验结果第41-63页
    一、 狼疮鼠各脏器中T细胞克隆性分析第41页
        1 幼年未发病组狼疮鼠的T细胞克隆性第41页
        2 成年发病组狼疮鼠的T细胞克隆性第41页
    二、 成年发病狼疮鼠的T细胞表型分析第41-42页
        1 克隆扩增广泛浸润的T细胞为CD4~+T细胞第42页
        2 狼疮发病鼠中存在活化的CD4~+T细胞第42页
        3 克隆扩增并广泛浸润的T细胞为CD4~+CD69~+T细胞第42页
    三、 狼疮发病鼠中TCR Vβ6亚家族CDR3片段的测序分析第42-44页
        1 (NZB×NZW)F1成年发病鼠的CDR3序列特点第42-43页
        2 MRL/1pr成年发病鼠的CDR3序列特点第43页
        3 两种狼疮模型鼠的CDR3序列的共同特点第43页
        4 图像分析结果第43-44页
    附表第44-52页
    附图第52-63页
第四章 讨论第63-68页
第五章 结论第68-69页
参考文献第69-86页
攻读博士学位期间发表的文章第86-87页
致谢第87-88页
中文摘要第88-91页
英文摘要第91页

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