| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-34页 |
| 1.1 马铃薯耐冻性研究进展 | 第15-32页 |
| 1.1.1 低温危害 | 第15-16页 |
| 1.1.2 冷驯化及作用 | 第16-17页 |
| 1.1.3 冷驯化过程中的冷诱导基因 | 第17-18页 |
| 1.1.4 马铃薯耐冻性遗传变异及改良 | 第18-20页 |
| 1.1.5 马铃薯耐冻性与基因表达变化的关系 | 第20-21页 |
| 1.1.6 转录组测序 | 第21-24页 |
| 1.1.7 脂肪酸脱氢酶与植物抗冻性 | 第24-29页 |
| 1.1.8 CAPS分子标记研究进展 | 第29-30页 |
| 1.1.9 马铃薯的转基因研究 | 第30-32页 |
| 1.2 本论文的研究内容与目的及拟解决的关键问题 | 第32-34页 |
| 第二章 马铃薯野生种S.acaule冷驯化前后的转录组分析及验证 | 第34-54页 |
| 2.1 试验材料 | 第34-35页 |
| 2.2 方法 | 第35-38页 |
| 2.2.1 RNA提取及纯化 | 第35页 |
| 2.2.2 cDNA反转录 | 第35-36页 |
| 2.2.3 建库 | 第36页 |
| 2.2.4 数据过滤 | 第36页 |
| 2.2.5 比对统计 | 第36页 |
| 2.2.6 基因表达注释 | 第36-37页 |
| 2.2.7 内参基因及引物设计 | 第37页 |
| 2.2.8 qRT-PCR | 第37页 |
| 2.2.9 标准曲线的绘制及基因扩增效率 | 第37页 |
| 2.2.10 数据分析 | 第37-38页 |
| 2.2.11 验证序列的引物设计及合成 | 第38页 |
| 2.2.12 序列比对分析 | 第38页 |
| 2.2.13 统计分析 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-50页 |
| 2.3.1 测序产量及质量 | 第38-40页 |
| 2.3.2 基因表达覆盖度统计结果 | 第40-41页 |
| 2.3.3 GO分类 | 第41页 |
| 2.3.4 代谢途径基因注释 | 第41页 |
| 2.3.5 差异基因表达分析 | 第41-42页 |
| 2.3.6 冷驯化期间寒冷诱导相关基因的差异表达分析 | 第42-47页 |
| 2.3.7 荧光定量PCR的效率 | 第47-48页 |
| 2.3.8 表达稳定性 | 第48-49页 |
| 2.3.9 序列比对结果 | 第49-50页 |
| 2.3.10 qRT-PCR | 第50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-53页 |
| 2.4.1 转录组分析 | 第50-52页 |
| 2.4.2 内参基因筛选 | 第52页 |
| 2.4.3 转绿组预测结果验证 | 第52-53页 |
| 2.5 小结 | 第53-54页 |
| 第三章 三个耐冻性不同的野生马铃薯中SAD基因和FAD2基因的克隆及表达分析 | 第54-68页 |
| 3.1 材料和方法 | 第55-57页 |
| 3.1.1 材料 | 第55页 |
| 3.1.2 方法 | 第55-57页 |
| 3.2 结果与分析 | 第57-65页 |
| 3.2.1 耐冻性鉴定 | 第57页 |
| 3.2.2 序列分析 | 第57-62页 |
| 3.2.3 进化关系分析 | 第62-64页 |
| 3.2.4 基因表达分析 | 第64-65页 |
| 3.3 讨论 | 第65-66页 |
| 3.4 小结 | 第66-68页 |
| 第四章 硬脂酰载体蛋白脱氢酶基因(SAD)CAPS标记的开发及验证 | 第68-74页 |
| 4.1 材料与方法 | 第68-70页 |
| 4.1.1 材料 | 第68页 |
| 4.1.2 方法 | 第68-70页 |
| 4.2 结果 | 第70-73页 |
| 4.2.1 耐冻性鉴定结果 | 第70页 |
| 4.2.2 SAD基因DAN序列的查找、序列分析及引物设计及筛选结果 | 第70-71页 |
| 4.2.3 SNP和CAPS标记 | 第71-72页 |
| 4.2.4 CAPS标记与冷驯化能力的相关分析 | 第72-73页 |
| 4.3 讨论 | 第73页 |
| 4.4 小结 | 第73-74页 |
| 第五章 野生马铃薯S.commersonii的SAD基因遗传转化 | 第74-87页 |
| 5.1 材料与方法 | 第74-78页 |
| 5.1.1 材料 | 第74页 |
| 5.1.2 方法 | 第74-78页 |
| 5.2 结果与分析 | 第78-85页 |
| 5.2.1 SAD基因的克隆及序列分析 | 第78-79页 |
| 5.2.2 植物表达载体pBI121-SAD-CMM的酶切鉴定 | 第79-80页 |
| 5.2.3 农杆菌介导的SAD-CMM基因遗传转化 | 第80-81页 |
| 5.2.4 转基因植株的PCR检测 | 第81-82页 |
| 5.2.5 Southern blotting | 第82页 |
| 5.2.6 GUS染色 | 第82-83页 |
| 5.2.7 SAD-CMM基因表达分析 | 第83页 |
| 5.2.8 耐冻性鉴定 | 第83-84页 |
| 5.2.9 脂肪酸成分分析 | 第84-85页 |
| 5.3 讨论 | 第85-86页 |
| 5.4 小结 | 第86-87页 |
| 第六章 全文结论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 作者简介 | 第107页 |
