| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 前言综述 | 第12-18页 |
| 1.1 研究背景及意义 | 第12-13页 |
| 1.1.1 农膜降解物在土壤中的残留 | 第12页 |
| 1.1.2 国内外现状分析 | 第12页 |
| 1.1.3 可降解地膜存在的问题 | 第12页 |
| 1.1.4 土壤微生物的角色 | 第12-13页 |
| 1.1.5 土壤微生物多样性的含义及研究意义 | 第13页 |
| 1.1.6 土壤微生物遗传多样性的含义及角色 | 第13页 |
| 1.1.7 课题研究意义 | 第13页 |
| 1.2 土壤微生物遗传多样性的研究方法及理论支撑 | 第13-15页 |
| 1.2.1 土壤微生物多样性的研究方法及其特点 | 第13-14页 |
| 1.2.2 DGGE的起源及应用 | 第14页 |
| 1.2.3 DGGE原理及技术分析 | 第14-15页 |
| 1.2.4 选择DGGE的必要性 | 第15页 |
| 1.3 研究思路、研究内容及研究路线 | 第15-18页 |
| 1.3.1 研究思路 | 第15-16页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 1.3.3 技术路线 | 第17-18页 |
| 第2章 土壤DNA的采集、提取及检测 | 第18-27页 |
| 2.1 引言 | 第18-19页 |
| 2.1.1 土壤DNA的提取 | 第18页 |
| 2.1.2 土壤基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第18-19页 |
| 2.2 材料 | 第19-22页 |
| 2.2.1 实验原材料 | 第19页 |
| 2.2.2 实验主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.3 实验主要耗材及仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.4 试剂的组成、配制及使用 | 第21-22页 |
| 2.3 方法 | 第22-23页 |
| 2.3.1 实验样品的设计 | 第22页 |
| 2.3.2 实验样品的采集 | 第22页 |
| 2.3.3 土壤DNA的提取 | 第22页 |
| 2.3.4 琼脂糖凝胶电泳的检测 | 第22-23页 |
| 2.3.5 核酸OD值的检测 | 第23页 |
| 2.4 实验结果分析 | 第23-26页 |
| 2.4.1 土壤基因组电泳条件探索 | 第23-25页 |
| 2.4.2 核酸OD值的检测 | 第25-26页 |
| 2.5 本章小结 | 第26-27页 |
| 第3章 16S rDNA v3区基因PCR扩增及条件优化 | 第27-42页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 材料 | 第27-29页 |
| 3.2.1 试剂 | 第27-28页 |
| 3.2.2 仪器及耗材 | 第28-29页 |
| 3.2.3 试剂的组成、配制及使用 | 第29页 |
| 3.3 方法 | 第29-35页 |
| 3.3.1 退火温度初步探索 | 第30-31页 |
| 3.3.2 PCR辅助剂DMSO对PCR的影响 | 第31-33页 |
| 3.3.3 BSA对PCR的影响 | 第33页 |
| 3.3.4 比较两种辅助剂DMSO与BSA对PCR的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.5 循环条件重复性验证 | 第34-35页 |
| 3.4 结果与分析 | 第35-41页 |
| 3.4.1 退火温度初步探索 | 第35-36页 |
| 3.4.2 PCR辅助剂及退火方式的筛选 | 第36-41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 DGGE电泳及多样性分析 | 第42-59页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 材料 | 第42-43页 |
| 4.2.1 DGGE所需试剂 | 第42-43页 |
| 4.2.2 DGGE所需仪器耗材 | 第43页 |
| 4.3 方法 | 第43-44页 |
| 4.3.1 DGGE电泳及染色剂凝胶成像分析 | 第43-44页 |
| 4.3.2 DGGE图谱分析 | 第44页 |
| 4.4 结果与分析 | 第44-58页 |
| 4.4.1 第1批细菌 16S rDNA基因的PCR-DGGE | 第44-52页 |
| 4.4.2 第2批细菌 16S rDNA基因的PCR-DGGE | 第52-58页 |
| 4.5 本章小结 | 第58页 |
| 4.6 结论 | 第58-59页 |
| 第5章 讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
