| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩写词中英文对照表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 棉花抗逆育种 | 第13-15页 |
| 1.1.1 非生物胁迫对棉花生长发育的影响 | 第13页 |
| 1.1.2 盐碱化对棉花生长发育的影响 | 第13-14页 |
| 1.1.3 干旱对棉花生长发育的影响 | 第14-15页 |
| 1.2 棉花抗逆育种的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.1 棉花抗逆优异资源材料发掘 | 第15页 |
| 1.2.2 棉花耐盐抗旱资源的发掘 | 第15页 |
| 1.2.3 高效养分利用棉花资源发掘 | 第15-16页 |
| 1.2.4 棉花耐盐性相关分子标记的筛选 | 第16页 |
| 1.3 多胺的概念及功能 | 第16-17页 |
| 1.4 多胺在植物体内的合成与代谢 | 第17-18页 |
| 1.4.1 多胺的合成 | 第17-18页 |
| 1.4.2 多胺的分解代谢 | 第18页 |
| 1.5 多胺与非生物胁迫 | 第18-20页 |
| 1.5.1 多胺与盐胁迫 | 第19-20页 |
| 1.5.2 多胺与渗透胁迫 | 第20页 |
| 1.6 多胺氧化酶的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.7 研究目的 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 菌株与质粒 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 拟南芥DNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.2 棉花DNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.3 拟南芥RNA提取 | 第25页 |
| 2.2.4 棉花RNA提取 | 第25-26页 |
| 2.2.5 RNA的完整性检验 | 第26页 |
| 2.2.6 消解RNA中的基因组DNA | 第26-27页 |
| 2.2.7 RNA反转录为cDNA | 第27页 |
| 2.2.8 大肠杆菌Top10感受态的制备 | 第27页 |
| 2.3 植物表达载体的构建 | 第27-31页 |
| 2.3.1 GhPAO1、GhPAO2、GhPAO3基因克隆 | 第27-28页 |
| 2.3.2 连接pEASY-Blunt cloning载体 | 第28-29页 |
| 2.3.3 连接产物转化大肠杆菌 | 第29页 |
| 2.3.4 质粒的提取 | 第29-30页 |
| 2.3.5 重组质粒鉴定 | 第30页 |
| 2.3.6 GhPAO1、GhPAO2、GhPAO3基因RT-PCR | 第30页 |
| 2.3.7 生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.3.8 GhPAO过表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.4 构建植物表达载体电击转化根癌农杆菌 | 第31-32页 |
| 2.4.1 根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| 2.4.2 根癌农杆菌感受态的电击转化 | 第32页 |
| 2.5 拟南芥的遗传转化 | 第32-35页 |
| 2.5.1 拟南芥种植 | 第32页 |
| 2.5.2 菌液的培养 | 第32-33页 |
| 2.5.3 蘸花法侵染拟南芥 | 第33页 |
| 2.5.4 转基因拟南芥筛选 | 第33页 |
| 2.5.5 转基因拟南芥验证 | 第33页 |
| 2.5.6 转pGWB17-GhPAO1基因的拟南芥植株盐处理 | 第33页 |
| 2.5.7 高效液相色谱法测定拟南芥中多胺含量 | 第33-34页 |
| 2.5.8 拟南芥DAB染色 | 第34页 |
| 2.5.9 拟南芥H_2O_2含量测定 | 第34-35页 |
| 2.6 棉花的遗传转化 | 第35-36页 |
| 2.6.1 培养无菌苗 | 第35页 |
| 2.6.2 愈伤诱导及筛选 | 第35页 |
| 2.6.3 胚状体的发生及再生苗的获得 | 第35页 |
| 2.6.4 抗性棉花的PCR验证 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-53页 |
| 3.1 GhPAO1/2/3 基因克隆与表达分析 | 第36-41页 |
| 3.1.1 GhPAO1/2/3 基因的克隆 | 第36页 |
| 3.1.2 GhPAO1/2/3 基因生物信息学分析 | 第36-39页 |
| 3.1.3 GhPAO1/2/3 基因不同组织表达分析 | 第39页 |
| 3.1.4 GhPAO1/2/3 基因不同处理条件下的表达分析 | 第39-41页 |
| 3.2 植物表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 3.2.1 入门载体的构建（BP反应） | 第41-42页 |
| 3.2.2 表达载体的构建（LR反应） | 第42页 |
| 3.2.3 pGWB17- GhPAO1/2/3 超表达载体转化农杆菌 | 第42-43页 |
| 3.3 遗传转化及功能初步分析 | 第43-51页 |
| 3.3.1 GhPAO1/2/3 拟南芥的遗传转化 | 第43页 |
| 3.3.2 GhPAO1转基因后代的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.3 NaCl处理对GhPAO1转基因拟南芥萌发的影响 | 第44-46页 |
| 3.3.4 外施多胺、D-Arg、1,8-DO对拟南芥种子萌发的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.5 外施多胺、D-Arg、1,8-DO拟南芥H_2O_2含量的测定 | 第47-48页 |
| 3.3.6 NaCl处理下外施多胺、D-Arg、1,8-DO对拟南芥绿色子叶率的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.7 NaCl处理条件下外施多胺、D-Arg、1,8-DO拟南芥H_2O_2含量的测定 | 第49-50页 |
| 3.3.8 GhPAO1拟南芥幼苗抗盐性分析 | 第50-51页 |
| 3.4 棉花遗传转化 | 第51-53页 |
| 3.4.1 pGWB17- GhPAO1/2/3 基因转化棉花 | 第51-52页 |
| 3.4.2 转基因GhPAO1/2 棉花胚性愈伤的PCR检测 | 第52-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 总结与展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65-66页 |
| 导师评阅表 | 第66页 |
