| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-21页 |
| 1 病毒与宿主的相互作用 | 第11-12页 |
| 2 柯萨奇病毒概述 | 第12-13页 |
| 3 Caspase-3概述 | 第13-15页 |
| 4 3C蛋白酶概述 | 第15-16页 |
| 5 防治CVB_3感染的研究现状 | 第16页 |
| 6 基因载体应用概述 | 第16-17页 |
| 7 本课题的研究内容和意义 | 第17-21页 |
| 第一章 质粒p-rc-sig-6、腺病毒Ad-rc-6和Ad-rc-8及慢病毒LV-rc-sig-6基因载体的构建 | 第21-35页 |
| 1.1 材料、试剂及仪器 | 第21-24页 |
| 1.1.1 引物、载体、质粒 | 第21-22页 |
| 1.1.2 培养基 | 第22-23页 |
| 1.1.3 主要试剂及耗材 | 第23页 |
| 1.1.4 主要溶液 | 第23页 |
| 1.1.5 仪器设备 | 第23-24页 |
| 1.2 研究方法 | 第24-31页 |
| 1.2.1 p-rc-sig-6表达载体的构建 | 第24-31页 |
| 1.3 研究结果 | 第31-32页 |
| 1.3.1 获得了重组质粒p-rc-sig-6 | 第31-32页 |
| 1.4 本章小结 | 第32页 |
| 1.5 讨论 | 第32-35页 |
| 第二章 上述3类基因载体的表达检测、对细胞活性的影响以及对细胞感染CVB_3的防治效果的研究 | 第35-57页 |
| 2.1 材料、试剂及仪器 | 第35-37页 |
| 2.1.1 表达载体、qPCR引物、菌株、细胞 | 第35-36页 |
| 2.1.2 培养基和胰酶 | 第36页 |
| 2.1.3 主要试剂及耗材 | 第36页 |
| 2.1.4 主要溶液 | 第36-37页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第37页 |
| 2.2 研究方法 | 第37-43页 |
| 2.2.1 Hela细胞培养 | 第37页 |
| 2.2.2 冻存细胞株 | 第37-38页 |
| 2.2.3 复苏细胞株 | 第38页 |
| 2.2.4 细胞总RNA的提取及纯化 | 第38-39页 |
| 2.2.5 反转录PCR(Reverse Transcription,RT-PCR) | 第39-40页 |
| 2.2.6 Real-time实时荧光定量PCR | 第40-41页 |
| 2.2.7 细胞转染 | 第41-42页 |
| 2.2.8 CVB_3病毒的扩增及浓缩 | 第42页 |
| 2.2.9 CVB_3病毒的滴度测定 | 第42-43页 |
| 2.2.10 CVB_3病毒感染细胞 | 第43页 |
| 2.3 研究结果 | 第43-53页 |
| 2.3.1 质粒基因载体p-rc-6,p-rc-sig-6导入Hela细胞后的转录检测 | 第43-44页 |
| 2.3.2 腺病毒基因载体Ad-rc-6和Ad-rc-8导入Hela细胞后的转录检测 | 第44-45页 |
| 2.3.3 慢病毒载体LV-rc-sig-6导入Hela细胞后的转录检测 | 第45-46页 |
| 2.3.4 转进腺病毒载体Ad-rc-6的Hela细胞的显微照片 | 第46-47页 |
| 2.3.5 转进慢病毒载体LV-rc-sig-6的Hela细胞的显微照片 | 第47页 |
| 2.3.6 质粒p-Cas-3,p-rc-6,p-rc-8的转染对Hela细胞活性无影响 | 第47-48页 |
| 2.3.7 腺病毒载体Ad-rc-6和Ad-rc-8的导入对Hela细胞活性无影响 | 第48-49页 |
| 2.3.8 慢病毒载体LV-rc-sig-6的导入对Hela细胞活性无影响 | 第49-50页 |
| 2.3.9 计算得出了CVB_3病毒的滴度 | 第50-51页 |
| 2.3.10 质粒p-rc-6和p-rc-8具有保护细胞群的作用 | 第51-52页 |
| 2.3.11 腺病毒载体Ad-rc-6和Ad-rc-8具有保护细胞群的作用 | 第52-53页 |
| 2.4 本章小结 | 第53页 |
| 2.5 讨论 | 第53-57页 |
| 第三章 腺病毒基因载体Ad-rc-6和Ad-rc-8及慢病毒LV-rc-sig-6对乳鼠感染CVB3的防治效果 | 第57-69页 |
| 3.1 材料、试剂及仪器 | 第57-58页 |
| 3.1.1 病毒,基因载体及实验动物 | 第57页 |
| 3.1.2 实验耗材 | 第57-58页 |
| 3.1.3 实验环境及设备 | 第58页 |
| 3.2 研究方法 | 第58-59页 |
| 3.2.1 腹腔注射腺病毒载体Ad-rc-6及Ad-rc-8及CVB_3 | 第58页 |
| 3.2.2 口腔灌胃腺病毒载体Ad-rc-6及Ad-rc-8及CVB_3 | 第58页 |
| 3.2.3 腹腔注射慢病毒载体LV-precas3-c6及CVB_3 | 第58-59页 |
| 3.3 研究结果 | 第59-65页 |
| 3.3.1 建立了CVB3感染乳鼠的模型 | 第59-60页 |
| 3.3.2 腺病毒载体Ad-rc-6及Ad-rc-8的转导能帮助乳鼠防御CVB_3感染 | 第60-63页 |
| 3.3.3 慢病毒载体LV-precas3-c6的转导能帮助乳鼠防御CVB_3感染 | 第63-65页 |
| 3.4 本章小结 | 第65页 |
| 3.5 讨论 | 第65-69页 |
| 结论 | 第69-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 攻读硕士期间发表的文章 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
