摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第12-26页 |
1.1 动物性别决定和性别分化 | 第12-16页 |
1.1.1 遗传型性别决定 | 第13-14页 |
1.1.2 环境型性别决定 | 第14-16页 |
1.2 鱼类性别决定和性别分化 | 第16-21页 |
1.2.1 鱼类的性别决定类型 | 第16-17页 |
1.2.2 鱼类性别决定与性别分化相关基因 | 第17-21页 |
1.3 环境内分泌干扰物对鱼类性别决定和性别分化的影响 | 第21-23页 |
1.3.1 诱导基因突变 | 第21-22页 |
1.3.2 影响基因表达 | 第22页 |
1.3.3 干扰鱼类激素合成以及与代谢途径相关酶的活性 | 第22-23页 |
1.3.4 不同雄性或者雌性激素对鱼类产生的雄性或雌性化作用 | 第23页 |
1.4 miRNA的研究概述 | 第23-24页 |
1.4.1 miRNA的定义 | 第23页 |
1.4.2 miRNA的生物发生和作用机制 | 第23-24页 |
1.4.3 miRNA的功能 | 第24页 |
1.4.4 miRNA的研究进展 | 第24页 |
1.5 本实验的研究目的及意义 | 第24-26页 |
第二章 来曲唑和阿特拉津处理对泥鳅性腺及性别分化相关基因表达的影响 | 第26-56页 |
2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.1.1 实验动物 | 第26页 |
2.1.2 实验仪器 | 第26-27页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第27页 |
2.1.4 引物 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-31页 |
2.2.1 实验设计 | 第28-29页 |
2.2.2 总RNA的提取 | 第29-30页 |
2.2.3 普通反转录 | 第30页 |
2.2.4 q-RT PCR | 第30-31页 |
2.2.5 石蜡切片 | 第31页 |
2.3 结果 | 第31-56页 |
2.3.1 泥鳅脑和性腺总RNA的提取 | 第31-32页 |
2.3.2 组织学分析 | 第32-34页 |
2.3.3 基因表达分析 | 第34-56页 |
第三章 来曲唑和阿特拉津对泥鳅性腺miRNA的表达的影响及功能分析 | 第56-70页 |
3.1 实验方法 | 第56-61页 |
3.1.1 性腺组织收集,样本准备 | 第56页 |
3.1.2 总RNA的提取 | 第56页 |
3.1.3 miRNA反转录 | 第56-57页 |
3.1.4 miRNA荧光定量pcr | 第57-59页 |
3.1.5 miRNA测序实验流程: | 第59页 |
3.1.6 miRNA测序信息分析 | 第59页 |
3.1.7 miRNA的鉴定 | 第59-60页 |
3.1.8 miRNA的表达分析 | 第60页 |
3.1.9 荧光定量PCR验证miRNA测序数据 | 第60页 |
3.1.10 miRNA的靶基因预测及靶基因富集分析 | 第60-61页 |
3.2 结果 | 第61-66页 |
3.2.1 构建泥鳅精巢和卵巢miRNA文库 | 第61-63页 |
3.2.2 各样品已知miRNA鉴定 | 第63页 |
3.2.3 各样品新的miRNA鉴定 | 第63-64页 |
3.2.4 miRNA样品间差异表达分析 | 第64页 |
3.2.5 荧光定量PCR验证差异表达的miRNA | 第64-65页 |
3.2.6 miRNA靶基因位点预测 | 第65-66页 |
3.2.7 样品间差异表达miRNA的靶基因富集分析 | 第66页 |
3.3 讨论 | 第66-70页 |
第四章 总结 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第86-87页 |